中文摘要 | 第4-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
第1章 前言 | 第15-33页 |
1.1 肿瘤与其靶向治疗 | 第15-18页 |
1.1.1 肿瘤的靶向治疗 | 第16-18页 |
1.2 肿瘤的基因治疗 | 第18-24页 |
1.2.1 基因治疗的定义 | 第18-19页 |
1.2.2 肿瘤选择性治疗基因TRAIL | 第19-23页 |
1.2.3 基因治疗的肿瘤靶向策略 | 第23-24页 |
1.3 基因治疗的载体 | 第24-33页 |
1.3.1 溶瘤病毒载体 | 第25-26页 |
1.3.2 腺病毒作为溶瘤病毒载体 | 第26-28页 |
1.3.3 溶瘤腺病毒治疗的局限性 | 第28-29页 |
1.3.4 溶瘤腺病毒载体的肿瘤靶向策略 | 第29-33页 |
第2章 论文设计 | 第33-37页 |
1.1 论文思路 | 第33-35页 |
1.2 论文目的 | 第35-36页 |
1.3 实验设计 | 第36-37页 |
第3章 材料与方法 | 第37-57页 |
1.1 实验材料 | 第37-39页 |
1.1.1 细胞、质粒、菌株和动物 | 第37-38页 |
1.1.2 主要材料和试剂 | 第38页 |
1.1.3 主要仪器和器材 | 第38-39页 |
1.2 实验方法 | 第39-57页 |
1.2.1 外源基因和病毒骨架质粒的构建 | 第39-43页 |
1.2.2 重组腺病毒载体的包装、扩增、纯化及滴度检测 | 第43-49页 |
1.2.3 腺病毒免疫胶体金电镜 | 第49-50页 |
1.2.4 流式细胞仪检测DcR1、DcR2、DR4、DR5 | 第50页 |
1.2.5 细胞凋亡检测 | 第50-52页 |
1.2.6 重组腺病毒的体外抗肿瘤活性检测 | 第52页 |
1.2.7 Slot blot实验 | 第52-53页 |
1.2.8 腺病毒的体内注射后肿瘤靶向检测 | 第53-54页 |
1.2.9 溶瘤腺病毒的体内抗肿瘤活性检测 | 第54-55页 |
1.2.10 静脉给药后对肝肾组织的安全性检测 | 第55-57页 |
第4章 结果与讨论 | 第57-91页 |
1.1 衣壳蛋白pⅨ改造腺病毒载体的建立 | 第57-64页 |
1.1.1 衣壳蛋白改造腺病毒骨架质粒的构建 | 第57-60页 |
1.1.2 穿梭质粒PDC311-zTRAIL-RPF构建 | 第60-62页 |
1.1.3 重组腺病毒的获得及鉴定 | 第62-64页 |
1.1.4 小结 | 第64页 |
1.2 衣壳蛋白pⅨ改造腺病毒性质鉴定 | 第64-73页 |
1.2.1 不同细胞株的的DR4、DR5、DcR1、DcR2的表达 | 第65-66页 |
1.2.2 改造后腺病毒粒子表面TRAIL的检测 | 第66-68页 |
1.2.3 病毒表面TRAIL的生物活性分析 | 第68-72页 |
1.2.4 小结 | 第72-73页 |
1.3 衣壳修饰的溶瘤腺病毒及其体外抗肿瘤活性 | 第73-80页 |
1.3.1 穿梭质粒的构建及溶瘤腺病毒获得 | 第73-76页 |
1.3.2 体外溶瘤腺病毒的基因表达水平 | 第76-78页 |
1.3.3 溶瘤腺病毒的体外抗肿瘤活性 | 第78-80页 |
1.3.4 小结 | 第80页 |
1.4 衣壳蛋白pⅨ改造溶瘤腺病毒的体内抗肿瘤活性 | 第80-91页 |
1.4.1 系统给药后改造腺病毒的体内生物分布 | 第80-82页 |
1.4.2 改造溶瘤腺病毒的体内肿瘤靶向检测 | 第82-85页 |
1.4.3 改造溶瘤腺病毒的体内抗肿瘤活性 | 第85-87页 |
1.4.4 改造溶瘤腺病毒系统给药后的安全性分析 | 第87-88页 |
1.4.5 小结 | 第88-91页 |
结论 | 第91-95页 |
参考文献 | 第95-105页 |
作者简介及在学期间所获的科研成果 | 第105-107页 |
致谢 | 第107页 |