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茶树重要萜类香气物质生物合成机理的研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-10页
主要符号注释表第19-21页
第一章 文献综述第21-33页
    1.1 萜类化合物概述第21-22页
        1.1.1 萜类化合物在植物中的作用第21页
        1.1.2 茶树萜类化合物的合成途径第21-22页
    1.2 挥发性萜类物质与茶叶香气品质第22-23页
        1.2.1 倍半萜橙花叔醇与茶叶香气品质第22-23页
        1.2.2 单萜香叶醇与茶叶香气品质第23页
    1.3 茶树萜类代谢途径相关基因的研究进展第23-24页
    1.4 Nudix水解酶与香叶醇第24-25页
    1.5 法尼基焦磷酸合成酶第25-26页
    1.6 miRNA与茶树挥发性萜类化合物第26-30页
        1.6.1 茶树miRNA的研究进展第26-27页
        1.6.2 miR167及其靶基因的研究进展第27-30页
    1.7 逆境胁迫对茶叶香气的影响第30-32页
    1.8 本研究的目的和意义第32-33页
第二章 茶树香气的测定第33-40页
    2.1 引言第33页
    2.2 材料和方法第33-35页
        2.2.1 实验材料第33-34页
        2.2.2 实验仪器第34页
        2.2.3 挥发性萜类化合物的收集和分析第34-35页
        2.2.4 统计学分析第35页
    2.3 结果与分析第35-39页
    2.4 讨论第39-40页
第三章 茶树倍半萜橙花叔醇合成酶基因功能研究第40-59页
    3.1 引言第40页
    3.2 材料和方法第40-46页
        3.2.1 实验材料和药品第40-41页
        3.2.2 实验仪器第41-42页
        3.2.3 基因克隆和序列分析第42页
        3.2.4 DNA提取第42-43页
        3.2.5 RNA提取和cDNA合成第43页
        3.2.6 基因定量分析第43页
        3.2.7 原核表达与蛋白的纯化第43页
        3.2.8 酶促反应产物的检测第43-44页
        3.2.9 过表达转基因植物的获得和分析第44页
        3.2.10 亚细胞定位第44-45页
        3.2.11 茶树和转基因拟南芥中橙花叔醇的测定第45-46页
        3.2.12 激素处理第46页
        3.2.13 统计学分析第46页
    3.3 结果与分析第46-56页
        3.3.1 茶树橙花叔醇合成酶基因克隆和序列分析第46-48页
        3.3.2 茶树橙花叔醇合成酶基因酶学性质第48-49页
        3.3.3 茶树橙花叔醇合成酶基因在植物中的功能分析第49-51页
        3.3.4 茶树橙花叔醇合成酶基因的亚细胞定位第51-52页
        3.3.5 茶树橙花叔醇合成酶基因的时空表达和产物释放关系第52-55页
        3.3.6 激素诱导茶树橙花叔醇合成酶基因的表达第55-56页
    3.4 讨论第56-59页
第四章 茶树Nudix水解酶基因功能研究第59-71页
    4.1 引言第59页
    4.2 材料和方法第59-63页
        4.2.1 实验材料第59-60页
        4.2.2 实验仪器第60页
        4.2.3 基因克隆和序列分析第60-61页
        4.2.4 DNA提取第61页
        4.2.5 RNA提取和cDNA合成第61页
        4.2.6 基因定量分析第61页
        4.2.7 原核表达与蛋白的纯化第61-62页
        4.2.8 酶促反应产物的检测第62页
        4.2.9 亚细胞定位第62页
        4.2.10 茶树中香叶醇的测定第62-63页
        4.2.11 统计学分析第63页
    4.3 结果与分析第63-69页
        4.3.1 茶树Nudix水解酶基因CsNUDX1的克隆第63-64页
        4.3.2 茶树Nudix水解酶CsNUDX1的酶学性质第64-66页
        4.3.3 茶树Nudix水解酶CsNUDX1的亚细胞定位第66-67页
        4.3.4 茶树Nudix水解酶基因CsNUDX1的时空表达和产物释放关系第67-69页
    4.4 讨论第69-71页
第五章 茶树法尼基焦磷酸合成酶基因功能研究第71-79页
    5.1 引言第71页
    5.2 材料和方法第71-74页
        5.2.1 实验材料第71页
        5.2.2 实验仪器第71-72页
        5.2.3 基因克隆第72-73页
        5.2.4 DNA提取第73页
        5.2.5 RNA提取和cDNA合成第73页
        5.2.6 基因定量分析第73页
        5.2.7 原核表达与蛋白的纯化第73页
        5.2.8 酶促反应产物的检测第73-74页
        5.2.9 亚细胞定位第74页
        5.2.10 过表达植株的获得第74页
        5.2.11 统计学分析第74页
    5.3 结果与分析第74-78页
        5.3.1 茶树法尼基焦磷酸合成酶CsFPS的基因克隆和酶学性质第74-76页
        5.3.2 茶树法尼基焦磷酸合成酶CsFPS的亚细胞定位第76-77页
        5.3.3 茶树法尼基焦磷酸合成酶基因在烟草中过表达第77-78页
    5.4 讨论第78-79页
第六章 茶树miR167对萜类合成酶的调控作用第79-90页
    6.1 引言第79页
    6.2 材料和方法第79-82页
        6.2.1 实验材料第79页
        6.2.2 实验仪器第79-80页
        6.2.3 miR167的克隆和MIM167的构建第80页
        6.2.4 SmallRNA和总RNA提取及cDNA合成第80-81页
        6.2.5 miR167成熟序列及其靶基因的定量分析第81-82页
        6.2.6 asODN方法抑制靶基因的表达第82页
        6.2.7 MeJA处理第82页
        6.2.8 统计学分析第82页
    6.3 结果与分析第82-88页
        6.3.1 茶树中miR167及其靶基因CsARF6和CsARF8的表达第82-84页
        6.3.2 茶树中miR167及其靶基因CsARF6和CsARF8的关系第84-85页
        6.3.3 MIM167转基因植株抑制miR167的表达第85-87页
        6.3.4 MeJA诱导miR167的表达第87-88页
    6.4 讨论第88-90页
结论第90-92页
参考文献第92-113页
作者简介第113-114页

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