致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-14页 |
1 引言 | 第14-24页 |
1.1 农药使用现状及设施蔬菜中的农药残留问题 | 第14-16页 |
1.1.1 农药使用有助于作物增产 | 第14页 |
1.1.2 农药残留的原因及其对哺乳动物的危害 | 第14-15页 |
1.1.3 农药残留对土壤及作物的影响 | 第15-16页 |
1.1.4 降低农药残留的方法 | 第16页 |
1.2 植物体中的农药降解代谢机制 | 第16-17页 |
1.3 油菜素内脂在促进植物体内农药降解中的作用 | 第17-19页 |
1.3.1 油菜素内酯BR的生理作用及信号传导机制 | 第17-18页 |
1.3.2 油菜素甾醇类BRs在农药降解中的作用 | 第18-19页 |
1.4 谷胱甘肽概述 | 第19-20页 |
1.4.1 谷胱甘肽性质 | 第19页 |
1.4.2 谷胱甘肽功能 | 第19-20页 |
1.5 GRXs概述 | 第20-23页 |
1.5.1 谷氧还蛋白的性质与分类 | 第20-21页 |
1.5.2 谷氧还蛋白的作用机理 | 第21-22页 |
1.5.3 谷氧还蛋白的生理功能 | 第22-23页 |
1.6 本文研究的目的和意义 | 第23-24页 |
2 BRs调控H_2O_2信号参与百菌清的降解 | 第24-36页 |
2.1 材料与方法 | 第25-28页 |
2.1.1 实验设计 | 第25页 |
2.1.2 基因沉默材料准备 | 第25-26页 |
2.1.3 菌株与载体 | 第26页 |
2.1.4 病毒侵染 | 第26页 |
2.1.5 番茄中百菌清含量的测定 | 第26页 |
2.1.6 谷胱甘肽含量的测定 | 第26-27页 |
2.1.7 谷胱甘肽S-转移酶(GST)的活力测定 | 第27页 |
2.1.8 荧光定量PCR分析 | 第27-28页 |
2.1.9 H_2O_2亚细胞定位 | 第28页 |
2.2 结果与分析 | 第28-34页 |
2.2.1 RBOH1沉默对叶片中H_2O_2的影响 | 第28-29页 |
2.2.2 RBOH1沉默植株中百菌清降解的效果 | 第29-30页 |
2.2.3 RBOH1沉默植株中谷胱甘肽含量对CHT和EBR处理的响应 | 第30-31页 |
2.2.4 RBOH1沉默植株中解毒相关基因对CHT和EBR处理的响应 | 第31-32页 |
2.2.5 RBOH1沉默植株中谷胱甘肽S-转移酶对CHT和EBR处理的响应 | 第32-33页 |
2.2.6 CHT和EBR处理对RBOH1沉默植株中GRX基因表达的影响 | 第33-34页 |
2.3 讨论 | 第34-36页 |
3 CGFS型GRX基因在百菌清降解代谢中的功能 | 第36-46页 |
3.1 材料与方法 | 第37-38页 |
3.1.1 实验设计 | 第37页 |
3.1.2 基因沉默材料准备 | 第37页 |
3.1.3 菌株与载体 | 第37页 |
3.1.4 病毒侵染 | 第37页 |
3.1.5 番茄中百菌清含量的测定 | 第37页 |
3.1.6 谷胱甘肽含量的测定 | 第37-38页 |
3.1.7 谷胱甘肽S-转移酶(GST)的活力测定 | 第38页 |
3.1.8 荧光定量PCR分析 | 第38页 |
3.2 结果与分析 | 第38-44页 |
3.2.1 4个GRX基因在CHT降解中的作用 | 第38页 |
3.2.2 GRX沉默植株中谷胱甘肽含量对CHT处理的响应 | 第38-39页 |
3.2.3 GRX沉默植株中农药解毒相关基因表达对CHT处理的响应 | 第39-40页 |
3.2.4 GRX沉默植株中谷胱甘肽S-转移酶对CHT处理的响应 | 第40-41页 |
3.2.5 GRXS16基因对EBR诱导的CHT降解的作用 | 第41-42页 |
3.2.6 GRXS16沉默植株中谷胱甘肽含量对CHT处理的响应 | 第42页 |
3.2.7 GRXS16沉默植株中解毒相关基因表达对CHT处理的响应 | 第42-43页 |
3.2.8 GRXS16沉默植株中谷胱甘肽S-转移酶对CHT处理的响应 | 第43-44页 |
3.3 讨论 | 第44-46页 |
4 GRXS16基因过表达对百菌清降解的作用 | 第46-63页 |
4.1 材料与方法 | 第47-55页 |
4.1.1 转基因(过表达)材料的获得和筛选 | 第47-50页 |
4.1.2 材料 | 第50页 |
4.1.3 番茄中百菌清含量的测定 | 第50页 |
4.1.4 谷胱甘肽含量的测定 | 第50页 |
4.1.5 谷胱甘肽S-转移酶(GST)的活力测定 | 第50页 |
4.1.6 荧光定量PCR分析 | 第50-51页 |
4.1.7 蛋白验证 | 第51-53页 |
4.1.8 原核表达 | 第53-54页 |
4.1.9 实验处理 | 第54-55页 |
4.2 结果与分析 | 第55-60页 |
4.2.1 SDS-PAGE验证GRXS16蛋白体外表达 | 第55页 |
4.2.2 Weston blot验证转基因株系中GRXS16蛋白的表达 | 第55-56页 |
4.2.3 qPCR验证GRXS16蛋白的表达 | 第56页 |
4.2.4 GRXS16过表达植株生长相关指标 | 第56-57页 |
4.2.5 GRXS16过表达植株对CHT处理的响应 | 第57-58页 |
4.2.6 GRXS16过表达植株谷胱甘肽含量对CHT处理的响应 | 第58-59页 |
4.2.7 GRXS16过表达植株GST1对CHT处理的响应 | 第59页 |
4.2.8 GRXS16过表达植株GST活力对CHT处理的响应 | 第59-60页 |
4.2.9 GRXS16过表达植株谷胱甘肽合成基因GSH1、GSH2对CHT处理的响应 | 第60页 |
4.3 讨论 | 第60-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-69页 |