| 附件 | 第4-12页 |
| 英文缩略词表 | 第12-14页 |
| 中文摘要 | 第14-23页 |
| 英文摘要 | 第23-32页 |
| 1 前言 | 第33-38页 |
| 2 实验材料 | 第38-46页 |
| 2.1 细胞株 | 第38页 |
| 2.2 实验动物 | 第38页 |
| 2.3 药品 | 第38页 |
| 2.4 主要仪器与设备 | 第38-40页 |
| 2.5 主要试剂 | 第40-42页 |
| 2.6 主要试剂配制 | 第42-46页 |
| 3 实验方法 | 第46-58页 |
| 3.1 miR-145低表达或miR-21高表达HepG2细胞模型的建立及CASE干预 | 第46-53页 |
| 3.1.1 细胞培养 | 第46页 |
| 3.1.2 细胞实验分组 | 第46页 |
| 3.1.3 细胞转染 | 第46-47页 |
| 3.1.4 MTT法检测各组细胞增殖情况 | 第47页 |
| 3.1.5 体外细胞划痕实验观察各组细胞移行情况 | 第47页 |
| 3.1.6 流式细胞术检测各组细胞凋亡情况 | 第47-48页 |
| 3.1.7 qRT-PCR法检测各组细胞中miR-145和miR-21的表达 | 第48-50页 |
| 3.1.8 Westernblot法检测各组细胞中信号通路相关蛋白分子表达 | 第50-53页 |
| 3.2 miR-145低表达或miR-21高表达的HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤模型的建立及CASE干预 | 第53-56页 |
| 3.2.1 实验动物模型的制备 | 第53-54页 |
| 3.2.2 HE染色法评估各组瘤块病理学特征 | 第54页 |
| 3.2.3 qRT-PCR法检测各组移植瘤组织中miR-145和miR-21的表达 | 第54-55页 |
| 3.2.4 Western blot法检测各组移植瘤组织中信号通路相关蛋白分子的表达 | 第55-56页 |
| 3.3 CASE对Smad3WT、Smad3EPSM、Smad33S-A三种质粒稳转HepG2细胞中miR-145和miR-21表达的影响 | 第56页 |
| 3.3.1 细胞培养和分组 | 第56页 |
| 3.3.2 qRT-PCR法检测各组细胞中miR-145和miR-21的表达 | 第56页 |
| 3.4 建立Smad3WT、Smad3EPSM、Smad33S-A三种质粒稳转HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤模型及CASE干预 | 第56-57页 |
| 3.4.1 稳转细胞肝癌裸鼠移植瘤模型的制备 | 第56-57页 |
| 3.4.2 HE染色法评估各组瘤块病理学特征 | 第57页 |
| 3.4.3 透射电镜下观察各组瘤块的细胞超微结构 | 第57页 |
| 3.4.4 qRT-PCR法检测各组瘤块中miR-145和miR-21的表达 | 第57页 |
| 3.4.5 Western blot法检测各组瘤块中pSmad3C/pSmad3L蛋白水平 | 第57页 |
| 3.5 统计分析 | 第57-58页 |
| 4 结果 | 第58-98页 |
| 4.1 CASE对miR-145低表达的HepG2细胞生物学功能的影响及对其作用机制 | 第58-66页 |
| 4.1.1 CASE对miR-145低表达的HepG2细胞增殖能力的抑制作用 | 第58页 |
| 4.1.2 CASE对miR-145低表达的HepG2细胞迁移能力的抑制作用 | 第58-60页 |
| 4.1.3 CASE促进miR-145低表达的HepG2细胞的凋亡 | 第60-61页 |
| 4.1.4 CASE促进miR-145低表达的HepG2细胞内miR-145的表达 | 第61-62页 |
| 4.1.5 CASE对miR-145低表达的HepG2细胞内TGF-β/Smad信号通路相关蛋白表达的影响 | 第62-64页 |
| 4.1.6 CASE对miR-145低表达HepG2细胞内MAPK信号通路相关蛋白表达的影响 | 第64-66页 |
| 4.2 CASE对miR-145低表达HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响及其作用机制 | 第66-74页 |
| 4.2.1 CASE对miR-145低表达的HepG2细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用 | 第67-68页 |
| 4.2.2 CASE对miR-145低表达的裸鼠移植瘤组织病理学的影响 | 第68页 |
| 4.2.3 CASE促进miR-145低表达的裸鼠移植瘤组织中miR-145的表达 | 第68-69页 |
| 4.2.4 CASE对miR-145低表达的裸鼠移植瘤组织中TGF-β/Smad信号通路相关蛋白表达的影响 | 第69-72页 |
| 4.2.5 CASE对miR-145低表达的裸鼠移植瘤组织中MAPK信号通路相关蛋白表达的影响 | 第72-74页 |
| 4.3 CASE对miR-21高表达的HepG2细胞生物学功能的影响及其作用机制 | 第74-83页 |
| 4.3.1 CASE对miR-21高表达的HepG2细胞增殖能力的抑制作用 | 第74-75页 |
| 4.3.2 CASE对miR-21高表达的HepG2细胞迁移能力的抑制作用 | 第75-76页 |
| 4.3.3 CASE促进miR-21高表达的HepG2细胞的凋亡 | 第76-78页 |
| 4.3.4 CASE抑制miR-21高表达的HepG2细胞内miR-21的表达 | 第78页 |
| 4.3.5 CASE对miR-21高表达的HepG2细胞内TGF-β/Smad信号通路相关蛋白表达的影响 | 第78-81页 |
| 4.3.6 CASE对miR-21高表达HepG2细胞内MAPK信号通路相关蛋白表达的影响 | 第81-83页 |
| 4.4 CASE对miR-21高表达HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响及其作用机制 | 第83-91页 |
| 4.4.1 CASE对miR-21高表达的HepG2细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用 | 第84-85页 |
| 4.4.2 CASE对miR-21高表达的裸鼠移植瘤组织病理学的影响 | 第85页 |
| 4.4.3 CASE抑制miR-21高表达的裸鼠移植瘤组织中miR-21的表达 | 第85-86页 |
| 4.4.4 CASE对miR-21高表达的裸鼠移植瘤组织中TGF-β/Smad信号通路相关蛋白表达的影响 | 第86-88页 |
| 4.4.5 CASE对miR-21高表达的裸鼠移植瘤组织中MAPK信号通路相关蛋白表达的影响 | 第88-91页 |
| 4.5 CASE对Smad3WT、Smad3EPSM、Smad33S-A三种质粒稳转HepG2细胞中miR-145和miR-21表达的影响 | 第91-93页 |
| 4.6 CASE对三种质粒稳转HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响及其作用机制 | 第93-98页 |
| 4.6.1 CASE对三种质粒稳转的HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响 | 第93-94页 |
| 4.6.2 HE染色法评估各组瘤块病理学特征 | 第94-95页 |
| 4.6.3 透射电镜下观察各组瘤块的细胞超微结构 | 第95页 |
| 4.6.4 CASE对各组移植瘤组织中miR-145和miR-21表达的影响 | 第95-96页 |
| 4.6.5 CASE对各组移植瘤组织中pSmad3C/pSmad3L蛋白表达水平的影响 | 第96-98页 |
| 5 讨论 | 第98-110页 |
| 5.1 CASE影响miR-145调控下的TGF-β信号通路发挥抗肝细胞癌作用 | 第98-103页 |
| 5.2 CASE经由miR-21调控TGF-β信号通路发挥抗肝细胞癌作用 | 第103-108页 |
| 5.3 TGF-β信号通路在CASE调节miR-145和miR-21表达中的作用 | 第108-110页 |
| 6 结论 | 第110-111页 |
| 7 不足及展望 | 第111页 |
| 参考文献 | 第111-124页 |
| 附录 | 第124-144页 |
| 附录一 个人简历 | 第124-125页 |
| 附录二 致谢 | 第125-126页 |
| 附录三 综述 | 第126-144页 |
| 参考文献 | 第137-144页 |
