中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第7-10页 |
前言 | 第10-11页 |
一、材料与方法 | 第11-25页 |
1.1 主要仪器设备 | 第11-12页 |
1.2 主要实验材料 | 第12-13页 |
1.3 主要试剂配置 | 第13-16页 |
1.3.1 蛋白SDS-PAGE电泳相关试剂配制 | 第13-14页 |
1.3.2 蛋白纯化相关试剂配制 | 第14-15页 |
1.3.3 核酸电泳相关试剂的配制 | 第15页 |
1.3.4 感受态细胞的制备 | 第15-16页 |
1.3.5 其他试剂的配置 | 第16页 |
1.4 实验方法 | 第16-25页 |
1.4.1 主要技术路线 | 第16-18页 |
1.4.2 CCP_1-CCP_2-SP,CCP_2-SP和SP的原核表达 | 第18-20页 |
1.4.3 分别构建pYr-adshuttle-1-CCP_1-CCP_2-SP,pYr-adshuttle-1-CCP_2-SP和pYr-adshuttle-1-SP腺病毒穿梭质粒 | 第20-24页 |
1.4.4 通过LR体外同源重组将目的片段CCP_1-CCP_2-SP,CCP_2-SP和SP构建至pAd/PL-DEST腺病毒骨架载体 | 第24-25页 |
二、结果 | 第25-30页 |
2.1 CCP_1-CCP_2-SP,CCP_2-SP和SP的原核表达 | 第25-26页 |
2.1.1 目的蛋白CCP_1-CCP_2-SP,CCP_2-SP和SP的诱导表达 | 第25-26页 |
2.1.2 目的蛋白CCP_1-CCP_2-SP,CCP_2-SP和SP的纯化 | 第26页 |
2.2 腺病毒穿梭质粒pYr-adshuttle-1-CCP_1-CCP_2-SP,pYr-adshuttle-1-CCP_2-SP和pYr-adshuttle-1-SP的构建 | 第26-29页 |
2.2.1 CCP_1-CCP_2-SP,CCP_2-SP和SP目的基因PCR,PCR产物双酶切及其双酶切产物纯化 | 第26-27页 |
2.2.2 pYr-adshuttle-1质粒的双酶切及其双酶切产物的胶回收 | 第27-28页 |
2.2.3 重组腺病毒穿梭质粒pYr-adshuttle-1-CCP_1-CCP_2-SP,pYr-adshuttle-1-CCP_2-SP和pYr-adshuttle-1-SP的鉴定 | 第28-29页 |
2.3 通过LR体外同源重组将目的片段CCP_1-CCP_2-SP,CCP_2-SP和SP构建至pAd/PL-DEST腺病毒骨架载体 | 第29-30页 |
三、讨论 | 第30-32页 |
四、结论 | 第32-33页 |
综述:MASP-2的研究进展 | 第33-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
附录:酵母展示表面蛋白ELISA检测方法的建立 | 第43-52页 |
相关试剂的配置 | 第44-46页 |
利用SPF小鼠血清进行抗原筛选 | 第46-47页 |
利用结核病人血清进行抗原筛选 | 第47-50页 |
关于方案优化 | 第50-52页 |
攻读硕士学位期间发表的论文和成果 | 第52-53页 |
致谢 | 第53页 |