摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
第一章 引言 | 第9-19页 |
1.1 南极冰藻Chlamydomonassp.ICE-L概述 | 第9-12页 |
1.1.1 南极冰藻的生存环境 | 第9页 |
1.1.2 南极冰藻的生态学和应用意义 | 第9-10页 |
1.1.3 南极冰藻ICE-L的生物学特征 | 第10页 |
1.1.4 南极冰藻ICE-L的研究现状 | 第10-12页 |
1.2 植物耐热分子机制研究 | 第12-13页 |
1.3 热激蛋白简介 | 第13-16页 |
1.3.1 热激蛋白的发展 | 第13页 |
1.3.2 热激蛋白的分类及其生物学功能 | 第13-14页 |
1.3.3 Hsf | 第14页 |
1.3.4 Hsp70 | 第14-15页 |
1.3.5 Hsp90 | 第15页 |
1.3.6 藻类热激蛋白的研究 | 第15-16页 |
1.4 植物活性氧的产生、清除以及植物抗氧化系统 | 第16-18页 |
1.4.1 活性氧的产生及影响 | 第16-17页 |
1.4.2 抗氧化系统的防御机制 | 第17页 |
1.4.3 藻类抗氧化系统的研究 | 第17-18页 |
1.5 本论文的研究目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 热胁迫下南极冰藻ICE-L热激蛋白基因的表达分析 | 第19-31页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 实验藻种 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
2.1.3 主要仪器 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-24页 |
2.2.1 引物设计 | 第20-21页 |
2.2.2 藻种热胁迫处理 | 第21-22页 |
2.2.3 总RNA提取及反转录 | 第22-23页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR | 第23-24页 |
2.2.5 数据处理 | 第24页 |
2.3 结果与分析 | 第24-29页 |
2.3.1 总RNA质量检测 | 第24-25页 |
2.3.2 热胁迫下CiHsp70s表达量变化 | 第25-27页 |
2.3.3 热胁迫下CiHsp90s表达量变化 | 第27页 |
2.3.4 热胁迫下CiHsp22表达量变化 | 第27-28页 |
2.3.5 热胁迫下CiHsfs表达量变化 | 第28-29页 |
2.4 讨论 | 第29-30页 |
2.5 小结 | 第30-31页 |
第三章 南极冰藻ICE-LCiHsp70s序列分析及CiDnaK基因的克隆与真核表达 | 第31-48页 |
3.1 实验材料 | 第31-34页 |
3.1.1 实验藻种 | 第31页 |
3.1.2 主要试剂 | 第31-33页 |
3.1.3 主要仪器 | 第33-34页 |
3.2 实验方法 | 第34-39页 |
3.2.1 生物信息学分析 | 第34页 |
3.2.2 CiDnaK基因的克隆 | 第34-36页 |
3.2.3 pChlamy_3-CiDnaK的构建 | 第36-38页 |
3.2.4 转化莱茵衣藻 | 第38-39页 |
3.2.5 转CiDnaK莱茵衣藻抗高温能力检测 | 第39页 |
3.3 结果与分析 | 第39-46页 |
3.3.1 CiHsp70s生物信息学分析 | 第39-43页 |
3.3.2 CiDnaK基因的克隆以及pChlamy_3-CiDnaK的构建 | 第43页 |
3.3.3 阳性克隆筛选 | 第43-44页 |
3.3.4 转CiDnaK莱茵衣藻抗高温能力检测 | 第44-46页 |
3.4 讨论 | 第46-47页 |
3.5 小结 | 第47-48页 |
第四章 热胁迫下南极冰藻ICE-L抗氧化酶基因的表达及酶的活性变化分析 | 第48-59页 |
4.1 实验材料 | 第48-49页 |
4.1.1 实验藻种 | 第48页 |
4.1.2 主要试剂 | 第48页 |
4.1.3 主要仪器 | 第48-49页 |
4.2 实验方法 | 第49-51页 |
4.2.1 引物设计 | 第49-50页 |
4.2.2 藻种热胁迫处理 | 第50页 |
4.2.3 总RNA提取及反转录 | 第50页 |
4.2.4 实时荧光定量PCR | 第50页 |
4.2.5 粗酶液的提取 | 第50页 |
4.2.6 SOD、CAT、POD及MDA测定原理及活力计算 | 第50-51页 |
4.3 结果与分析 | 第51-56页 |
4.3.1 热胁迫下部分抗氧化酶基因表达分析 | 第51-53页 |
4.3.2 热胁迫下南极冰藻ICE-L超氧化物歧化酶(SOD)活性变化 | 第53-54页 |
4.3.3 热胁迫下南极冰藻ICE-L过氧化氢酶(CAT)活性变化 | 第54-55页 |
4.3.4 热胁迫下南极冰藻ICE-L过氧化物酶(POD)活性变化 | 第55页 |
4.3.5 热胁迫下南极冰藻ICE-L丙二醛(MDA)含量变化 | 第55-56页 |
4.4 讨论 | 第56-58页 |
4.5 小结 | 第58-59页 |
第五章 结论与展望 | 第59-61页 |
5.1 结论 | 第59-60页 |
5.2 展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |