| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-30页 |
| 1.1 逆转录病毒 | 第11-12页 |
| 1.2 外源绵羊肺腺瘤病毒 | 第12-14页 |
| 1.2.1 JSRV基因表达产物与功能 | 第12-13页 |
| 1.2.2 JSRV生活史 | 第13-14页 |
| 1.3 绵羊肺腺瘤病概况 | 第14-17页 |
| 1.4 绵羊肺腺瘤的检测 | 第17-18页 |
| 1.5 原核表达概述 | 第18-27页 |
| 1.5.1 大肠杆菌表达系统的优缺点 | 第19页 |
| 1.5.2 大肠杆菌表达系统的基本概念 | 第19-23页 |
| 1.5.3 表达菌的选择 | 第23-24页 |
| 1.5.4 pET表达系统原理 | 第24-27页 |
| 1.6 WesternBlot技术概述 | 第27-28页 |
| 1.6.1 WesternBlot试验的应用和原理 | 第27页 |
| 1.6.2 WesternBlot试验的流程 | 第27-28页 |
| 1.7 研究目的及意义 | 第28-30页 |
| 2 实验一绵羊肺腺瘤病毒囊膜基因获取与原核表达质粒构建 | 第30-45页 |
| 2.1 材料 | 第30-32页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第30页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第31-32页 |
| 2.2 方法 | 第32-39页 |
| 2.2.1 引物设计合成及目的片段PCR扩增 | 第32页 |
| 2.2.2 pEGFP-C1/exJSRV-env的获取与鉴定 | 第32-34页 |
| 2.2.3 目的基因的扩增 | 第34-35页 |
| 2.2.4 pET-32a载体质粒的制备 | 第35页 |
| 2.2.5 原核表达质粒的构建 | 第35-37页 |
| 2.2.6 重组原核表达质粒的鉴定 | 第37-39页 |
| 2.3 结果 | 第39-44页 |
| 2.3.1 pEGFP-C1/exJSRV-env菌落PCR鉴定结果 | 第39页 |
| 2.3.2 重组pEGFP-C1/exJSRV-env质粒酶切鉴定结果 | 第39-40页 |
| 2.3.3 重组质粒pET-32a/exJSRV-env菌落PCR鉴定结果 | 第40页 |
| 2.3.4 重组质粒pET-32a/exJSRV-env酶切鉴定结果 | 第40-41页 |
| 2.3.5 重组质粒pET-32a/exJSRV-env测序结果 | 第41-44页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第44-45页 |
| 3 实验二绵羊肺腺瘤病毒重组囊膜蛋白原核表达 | 第45-52页 |
| 3.1 材料 | 第45-47页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第45-47页 |
| 3.2 方法 | 第47-49页 |
| 3.2.1 绵羊肺腺瘤病毒重组囊膜蛋白的表达 | 第47页 |
| 3.2.2 IPTG最佳诱导浓度的确定 | 第47-48页 |
| 3.2.3 重组蛋白可溶性鉴定 | 第48-49页 |
| 3.3 结果 | 第49-50页 |
| 3.3.1 IPTG最佳诱导浓度的SDS-PAGE确定 | 第49页 |
| 3.3.2 重组蛋白可溶性鉴定结果 | 第49-50页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第50-52页 |
| 4 实验三绵羊肺腺瘤病毒重组囊膜蛋白WesternBlot检测 | 第52-55页 |
| 4.1 材料 | 第52-53页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第52页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第52页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第52-53页 |
| 4.2 方法 | 第53-54页 |
| 4.3 结果 | 第54-55页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
