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乙酰胆碱酯酶(AChE)缺失对年龄相关性黄斑变性疾病(AMD)的保护作用

摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
中英文缩略词表第8-9页
第1章 引言第9-12页
    1.1 概述第9-12页
        1.1.1 年龄相关性黄斑变性(AMD)第9页
        1.1.2 乙酰胆碱酯酶诱导细胞凋亡第9-10页
        1.1.3 氧化应激(Oxidative Stress)造成细胞凋亡第10-11页
        1.1.4 乙酰胆碱酯酶(ACh E)与氧化应激(Oxidative Stress)第11-12页
第2章 材料与方法第12-23页
    2.1 材料第12-16页
        2.1.1 细胞及动物分组第12页
        2.1.2 PCR所需第12页
        2.1.3 试剂第12-13页
        2.1.4 免疫荧光染色所需第13页
        2.1.5 溶液配制第13-15页
        2.1.6 实验仪器第15-16页
    2.2 实验方法第16-22页
        2.2.1 细胞培养第16-17页
        2.2.2 细胞爬片制作第17页
        2.2.3 MTT测定法第17页
        2.2.4 细胞沉默ACh E基因(细胞转染)第17-18页
        2.2.5 细胞ROS测定第18页
        2.2.6 PCR法第18-19页
        2.2.7 冰冻切片第19页
        2.2.8 免疫荧光染色第19-20页
        2.2.9 TUNEL标记第20-21页
        2.2.10蛋白印迹第21-22页
    2.3 统计学分析第22-23页
第3章 结果第23-33页
    3.1 碘酸钠(Na IO3)诱导ARPE19细胞凋亡第23页
        3.1.1 MTT法显示碘酸钠能诱导ARPE19细胞凋亡第23页
    3.2 碘酸钠诱导的ARPE19细胞凋亡模型中,ACh E过表达第23-25页
        3.2.1 细胞免疫荧光法检测ACh E显示细胞凋亡中,ACh E表达增高第23-24页
        3.2.2 蛋白印迹法检测细胞凋亡中ACh E表达量也增高。第24-25页
    3.3 加入ACh E抑制剂(多奈哌齐)后,通过抑制氧化应激通路来减少碘酸钠诱导的ARPE19细胞凋亡第25-27页
        3.3.1 细胞TUNEL法显示,加入多奈哌齐后,细胞凋亡数量低于未加抑制剂组第25页
        3.3.2 加入多奈哌齐后,氧化指标低于未加抑制剂组第25-27页
    3.4 细胞沉默ACh E基因后,通过抑制氧化应激通路来减少碘酸钠诱导的ARPE19细胞凋亡第27-29页
        3.4.1 免疫荧光检测,沉默ACh E基因后,ACh E表达减少第27页
        3.4.2 TUNEL法检测,细胞沉默ACh E基因后,细胞凋亡数量低于正常细胞组第27-28页
        3.4.3 蛋白印迹法检测,细胞沉默ACh E基因后,氧化指标NOX2表达量低于正常细胞组第28-29页
    3.5 ACh E-/+老鼠能减少碘酸钠诱导的视网膜色素上皮细胞及光感受器细胞的凋亡第29-33页
        3.5.1 PCR法鉴定老鼠基因型及免疫荧光检测ACh E表达第29-30页
        3.5.2 冰冻切片TUNEL法计算,ACh E基因敲除小鼠细胞凋亡数量低于正常小鼠组第30-31页
        3.5.3 冰冻切片免疫荧光法检测,ACh E基因敲除小鼠的NOX2含量低于正常小鼠组第31-33页
第4章 讨论第33-37页
第5章 结论第37-38页
致谢第38-39页
参考文献第39-43页
综述第43-50页
    参考文献第47-50页

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