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基质金属蛋白酶-3催化区域的克隆、表达及纯化

内容提要第1-9页
第一章 前言第9-24页
 1. 基质金属蛋白酶(MMP)第9-21页
   ·细胞外基质(ECM) 概述第9页
   ·基质金属蛋白酶(MMPs)简介第9-10页
   ·MMP 家族第10-13页
   ·MMP 的分类第13-16页
   ·MMP 的3D 结构第16-17页
   ·MMPs 病理生理学第17-21页
   ·MMP-3 的简介第21页
 2. pET 表达系统第21页
 3. 包涵体复性第21-23页
   ·包涵体的形成第21-22页
   ·包涵体的分离和洗涤第22页
   ·包涵体的溶解第22-23页
   ·复性包涵体蛋白第23页
 4. 本论文的研究目的和策略第23-24页
第二章 间充质溶解素-1(MMP-3)催化域基因的克隆第24-40页
 1 仪器与材料第24-26页
   ·主要仪器第24页
   ·实验材料第24-26页
   ·溶液配制第26页
 2 实验方法第26-40页
   ·MMP-3 引物设计第26-27页
   ·从人乳腺癌细胞中提取总RNA第27-28页
   ·RT-PCR第28-30页
   ·重组质粒的构建第30-33页
   ·结果与讨论第33-39页
   ·本章小结第39-40页
第三章 MMP-3 催化域基因的表达及包涵体蛋白的分离与纯化第40-48页
 1 仪器与材料第40-44页
   ·主要仪器第40-41页
   ·实验材料第41-42页
   ·实验菌株第42页
   ·溶液配制第42-44页
 2 实验方法第44-45页
 3 结果和讨论第45-48页
   ·MMP-3 的诱导表达第45-46页
   ·包涵体的分离、洗涤及溶解第46页
   ·包涵体蛋白的纯化第46-47页
   ·结论第47页
   ·本章小结第47-48页
第四章 间质溶解素(MMP-3)包涵体的复性第48-57页
 1. 仪器与材料第48-53页
   ·主要仪器第48-49页
   ·实验材料第49-50页
   ·溶液配制第50-53页
 2. 实验方法第53-54页
   ·包涵体的复性第53-54页
   ·酶活力检测第54页
 3. 结果与讨论第54-56页
   ·包涵体的复性第54-55页
   ·透析复性第55-56页
 4. 本章小结第56-57页
第五章 展望第57-58页
附录第58-59页
参考文献第59-64页
中文摘要第64-65页
Abstract第65-66页
致谢第66页

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