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鱼类抗病毒基因TRIM和IFN基因克隆及功能研究

中文摘要第5-8页
英文摘要第8-10页
第1章 绪论第14-28页
    1.1 TRIM蛋白第14-21页
        1.1.1 TRIM蛋白的结构与功能第14-17页
        1.1.2 TRIM蛋白的晶体结构模型第17-18页
        1.1.3 TRIM蛋白在先天免疫中的功能第18-20页
        1.1.4 鱼类TRIM蛋白的研究现状第20-21页
    1.2 干扰素的研究第21-28页
        1.2.1 Ⅰ型IFN第22-24页
        1.2.2 Ⅱ型IFN第24-25页
        1.2.3 Ⅲ型IFN第25-28页
第二章 草鱼finTRIM基因生物信息分析与表达第28-45页
    2.1 前言第28页
    2.2 材料与方法第28-33页
        2.2.1 主要仪器设备第28-29页
        2.2.2 试剂盒与试剂溶液第29页
        2.2.3 实验菌株与载体第29页
        2.2.4 试验材料第29页
        2.2.5 主要溶液配置第29-30页
        2.2.6 基因序列分析第30-31页
        2.2.7 系统进化树构建和蛋白序列相似率第31页
        2.2.8 内含子时相和蛋白质结构预测第31页
        2.2.9 草鱼组织DNA的提取第31页
        2.2.10 序列的验证第31-32页
        2.2.11 总RNA的提取第32页
        2.2.12 反转录第32页
        2.2.13 荧光定量PCR检测第32-33页
    2.3 结果第33-43页
        2.3.1 系统进化与蛋白相似率分析第33-35页
        2.3.2 序列比对、蛋白质结构预测和内含子时相分析第35-41页
        2.3.3 组织表达结果第41-43页
    2.4 讨论第43-45页
第三章 斑马鱼finTRIM基因的表达特征分析第45-52页
    3.1 前言第45页
    3.2 材料与方法第45-47页
        3.2.1 细胞、病毒和斑马鱼样品第45页
        3.2.2 主要仪器设备试剂盒与试剂溶液第45页
        3.2.3 细胞的复苏第45-46页
        3.2.4 细胞的培养与传代第46页
        3.2.5 细胞的冻存第46页
        3.2.6 GCRV和SVCV的培养第46页
        3.2.7 病毒滴度测定第46页
        3.2.8 病毒刺激试验第46-47页
        3.2.9 总RNA的提取第47页
        3.2.10 反转录第47页
        3.2.11 荧光定量PCR检测第47页
        3.2.12 数据分析第47页
    3.3 结果第47-50页
        3.3.1 胚胎发育表达结果第47-48页
        3.3.2 组织表达结果第48-49页
        3.3.3 斑马鱼ZF4细胞GCRV和SVCV病毒诱导表达第49-50页
    3.4 讨论第50-52页
第四章 达氏鲟比较转录组分析第52-74页
    4.1 前言第52页
    4.2 材料与方法第52-54页
        4.2.1 试验鱼的获取与处理第52-53页
        4.2.2 主要一起设备、试剂盒与试剂第53页
        4.2.3 总RNA的提取和cDNA文库的构建第53页
        4.2.4 测序数据加工与组装第53页
        4.2.5 功能注释与聚类第53-54页
        4.2.6 差异表达基因分析、GO和KEGG富集分析第54页
        4.2.7 系统进化树的构建与结构域预测第54页
        4.2.8 SSRs和SNPs检测第54页
    4.3 结果与讨论第54-73页
        4.3.1 转录组组装、注释与分析第54-56页
        4.3.2 公共数据库的比对和unigenes注释第56-58页
        4.3.3 GO、KOG和KEGG功能注释与聚类第58-62页
        4.3.4 免疫相关差异表达基因和信号通路第62-66页
        4.3.5 Toll-like受体信号通路第66-70页
        4.3.6 趋化因子信号通路第70-71页
        4.3.7 补体和凝血级联反应第71页
        4.3.8 RIG-I-like和NOD-like受体信号通路第71页
        4.3.9 SSRs和SNPs分析第71-73页
    4.4 总结第73-74页
第五章 达氏鲟IFN-γ、IFN-e1、IFN-e2和IFN-e3的表达分析第74-87页
    5.1 前言第74页
    5.2 材料与方法第74-79页
        5.2.1 样品的收集第74-75页
        5.2.2 RACE和序列验证第75-76页
        5.2.3 基因结构的扩增第76页
        5.2.4 系统进化树的构建第76页
        5.2.5 原代细胞的分离与培养第76-77页
        5.2.6 polyI:C和LPS的诱导第77页
        5.2.7 总RNA的提取第77页
        5.2.8 反转录第77页
        5.2.9 荧光定量检测第77页
        5.2.10 数据分析第77页
        5.2.11 序列登录号第77-79页
    5.3 结果第79-84页
        5.3.1 系统进化树和基因结构分析第79-80页
        5.3.2 胚胎发育表达结果第80-81页
        5.3.3 组织表达结构第81-82页
        5.3.4 polyI:C和LPS诱导表达结果第82-84页
    5.4 讨论第84-87页
致谢第87-88页
参考文献第88-117页
个人简介第117-118页

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