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砂梨对高温胁迫的响应及耐热机理研究

致谢第6-7页
摘要第7-10页
Abstract第10-12页
缩略语表第13-20页
1 引言第20-39页
    1.1 高温胁迫对植物叶片光合作用的影响第20-22页
        1.1.1 高温胁迫对光合作用原初反应的影响第20-21页
        1.1.2 高温胁迫对光合作用碳同化过程的影响第21-22页
        1.1.3 高温胁迫对光合器官结构的影响第22页
    1.2 高温胁迫对植物体内活性氧清除系统的影响第22-32页
        1.2.1 植物体内活性氧的产生第22-24页
        1.2.2 活性氧的作用第24-25页
        1.2.3 植物体内活性氧清除系统第25-26页
        1.2.4 抗坏血酸-谷胱甘肽循环在活性氧清除系统中的作用第26-32页
            1.2.4.1 抗坏血酸的生物合成第27-29页
            1.2.4.2 抗坏血酸-谷胱甘肽循环清除过氧化氢的过程第29页
            1.2.4.3 抗坏血酸过氧化物酶的细胞分布及酶学特性第29页
            1.2.4.4 植物细胞质型APX同工酶的表达调控第29-31页
            1.2.4.5 植物叶绿体APX同工酶的表达调控第31-32页
    1.3 热激转录因子在植物高温逆境中的作用第32-35页
        1.3.1 热激转录因子的种类及结构第32-33页
        1.3.2 热激转录因子的功能第33页
        1.3.3 组成型表达的热激转录因子在高温胁迫下的作用第33-34页
        1.3.4 诱导型表达的热激转录因子在高温胁迫下的作用第34-35页
    1.4 热激转录因子在活性氧信号传导中的作用第35页
    1.5 环境条件对果树源库关系及果实品质的影响第35-38页
        1.5.1 源库概念第35-36页
        1.5.2 源库关系及影响因素第36-37页
        1.5.3 果实品质形成第37-38页
    1.6 立题意义及研究内容第38-39页
2 高温胁迫对砂梨叶肉细胞超微结构及光系统活性的影响第39-53页
    2.1 材料与处理第40页
    2.2 试验方法第40-41页
        2.2.1 叶肉细胞超微结构观察第41页
        2.2.2 叶绿素相对含量的测定第41页
        2.2.3 净光合速率的测定第41页
        2.2.4 叶绿素荧光参数的测定第41页
    2.3 结果与分析第41-51页
        2.3.1 短期持续高温胁迫对砂梨叶肉细胞超微结构的影响第42-45页
        23.2 短期持续高温胁迫对砂梨叶片叶绿素相对含量的影响第45-46页
        2.3.3 短期持续高温胁迫对光系统Ⅱ最大光化学效率的影响第46-47页
        2.3.4 长时间高温胁迫对砂梨叶肉细胞超微结构的影响第47-49页
        2.3.5 长时间高温胁迫对砂梨叶片净光合速率的影响第49-50页
        2.3.6 长时间高温胁迫对光系统Ⅱ最大光化学效率的影响第50-51页
    2.4 讨论第51-53页
3 高温胁迫对砂梨叶片抗坏血酸过氧化物酶活性及基因表达的影响第53-76页
    3.1 材料与处理第53页
    3.2 试验方法第53-59页
        3.2.1 丙二醛含量的测定第53-54页
        3.2.2 砂梨叶片中过氧化氢的观测第54页
        3.2.3 抗坏血酸过氧化物酶活性测定第54页
        3.2.4 抗坏血酸过氧化物酶基因成员的克隆第54-56页
            3.2.4.1 总RNA的提取第54页
            3.2.4.2 cDNA合成第54-55页
            3.2.4.3 抗坏血酸过氧化物酶基因中间片段扩增第55页
            3.2.4.4 抗坏血酸过氧化物酶基因3’RACE扩增第55页
            3.2.4.5 抗坏血酸过氧化物酶基因5’RACE扩增第55页
            3.2.4.6 抗坏血酸过氧化物酶基因全长扩增第55-56页
        3.2.5 抗坏血酸过氧化物酶基因启动子的克隆第56-57页
        3.2.6 抗坏血酸过氧化物酶的亚细胞定位第57-58页
            3.2.6.1 开放阅读框的扩增第57页
            3.2.6.2 重组质粒双酶切第57-58页
            3.2.6.3 植物表达载体的构建第58页
            3.2.6.4 烟草瞬时表达第58页
        3.2.7 抗坏血酸过氧化物酶基因成员的表达分析第58-59页
    3.3 结果与分析第59-73页
        3.3.1 高温胁迫对砂梨叶片中丙二醛含量的影响第59-60页
        3.3.2 高温胁迫对砂梨叶片中过氧化氢积累的影响第60-61页
        3.3.3 高温胁迫抗坏血酸过氧化物酶活性的影响第61-62页
        3.3.4 抗坏血酸过氧化物酶基因的克隆第62-64页
        3.3.5 抗坏血酸过氧化物酶基因启动子的克隆第64-69页
        3.3.6 抗坏血酸过氧化物酶的亚细胞定位第69-70页
        3.3.7 高温胁迫对砂梨叶片抗坏血酸过氧化物酶基因表达的影响第70-73页
    3.4 讨论第73-76页
4 亚高温锻炼和过氧化氢处理诱导砂梨叶片耐热性的蛋白质组学研究第76-83页
    4.1 材料与处理第76页
    4.2 试验方法第76-77页
        4.2.1 蛋白质样品制备第76-77页
        4.2.2 双向电泳及凝胶成像第77页
        4.2.3 凝胶图像分析第77页
        4.2.4 质谱鉴定差异表达的蛋白质点第77页
        4.2.5 热激转录因子的克隆及表达分析第77页
    4.3 结果与分析第77-81页
        4.3.1 亚高温锻炼和过氧化氢处理对‘翠冠’叶片耐热性的影响第78-80页
        4.3.2 高温胁迫下‘翠冠’梨叶片中差异表达蛋白的功能分类第80页
        4.3.3 高温胁迫下‘翠冠’梨叶片中热激转录因子的表达分析第80-81页
    4.4 讨论第81-83页
5 果实膨大后期高温胁迫对‘园黄’梨叶片及果实中山梨醇代谢的影响第83-103页
    5.1 材料和处理第83-84页
    5.2 试验方法第84-87页
        5.2.1 叶片净光合速率的测定第84-85页
        5.2.2 果实大小、单果重和硬度的测定第85页
        5.2.3 叶片及果肉种可溶性糖的提取与测定第85页
        5.2.4 山梨醇代谢相关酶活性的测定第85-86页
        5.2.5 山梨醇代谢相关酶基因的克隆第86-87页
            5.2.5.1 总RNA的提取第86页
            5.2.5.2 cDNA合成第86-87页
            5.2.5.3 引物设计第87页
        5.2.6 山梨醇代谢相关酶基因的表达分析第87页
        5.2.7 数据分析第87页
    5.3 结果与分析第87-100页
        5.3.1 高温胁迫对‘园黄’梨果实生物量的影响第88页
        5.3.2 高温胁迫对‘园黄’梨果实硬度的影响第88-89页
        5.3.3 高温胁迫对‘园黄’梨叶片净光合速率的影响第89-90页
        5.3.4 高温胁迫对‘园黄’梨叶片蒸腾速率的影响第90-91页
        5.3.5 高温胁迫对‘园黄’梨叶片和果肉可溶性糖含量的影响第91-94页
        5.3.6 高温胁迫对山梨醇代谢相关酶活性的影响第94-96页
        5.3.7 山梨醇代谢相关酶及转运蛋白的基因克隆第96-97页
        5.3.8 高温胁迫对山梨醇代谢相关酶基因表达的影响第97-99页
        5.3.9 高温胁迫对山梨醇转运蛋白基因表达的影响第99-100页
    5.4 讨论第100-103页
6 果实膨大后期高温胁迫对‘园黄’梨叶片和果实蔗糖代谢的影响第103-113页
    6.1 材料与处理第103-104页
    6.2 试验方法第104-105页
        6.2.1 蔗糖代谢相关酶粗提液的制备第104页
        6.2.2 中性转化酶活性的测定第104页
        6.2.3 酸性转化酶活性的测定第104页
        6.2.4 蔗糖合成酶活性的测定第104-105页
        6.2.5 蔗糖磷酸合成酶活性的测定第105页
        6.2.6 蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶基因的电子克隆第105页
        6.2.7 实时定量PCR第105页
        6.2.8 数据分析第105页
    6.3 结果与分析第105-110页
        6.3.1 高温胁迫对叶片中蔗糖代谢相关酶活性的影响第105-106页
        6.3.2 高温胁迫对果肉中蔗糖代谢相关酶活性的影响第106-108页
        6.3.3 蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶基因的电子克隆第108页
        6.3.4 高温胁迫对叶片中蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶基因表达的影响第108-109页
        6.3.5 高温胁迫对果肉中蔗糖合成酶及蔗糖磷酸合成酶基因表达的影响第109-110页
    6.4 讨论第110-113页
7 小结与展望第113-115页
参考文献第115-131页
作者简历第131页
攻博期间科研成果第131页

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