| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-38页 |
| 1.1 前言 | 第15页 |
| 1.2 下丘脑-垂体-性腺轴研究进展 | 第15-26页 |
| 1.2.1 促性腺激素释放激素及其受体研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.2 促性腺激素及其受体研究进展 | 第20-23页 |
| 1.2.3 性类固醇激素及其受体研究进展 | 第23-26页 |
| 1.3 内分泌干扰物（EDCs）对 HPG 轴相关基因的影响 | 第26-30页 |
| 1.3.1 激素与环境激素 | 第26-27页 |
| 1.3.2 内分泌干扰物危害 | 第27-28页 |
| 1.3.3 内分泌干扰物与 HPG 轴关系 | 第28-29页 |
| 1.3.4 受试化合物的选择 | 第29-30页 |
| 1.4 实时定量 PCR | 第30-33页 |
| 1.4.1 传统内参基因 | 第31-32页 |
| 1.4.2 内参基因表达稳定性的评价 | 第32-33页 |
| 1.5 Illumina 测序技术在鱼类研究中的应用 | 第33-36页 |
| 1.5.1 Illumina/Solexa 测序技术 | 第33-34页 |
| 1.5.2 转录组测序的用途及在硬骨鱼类研究上的应用 | 第34-36页 |
| 1.6 实验材料的选择 | 第36-37页 |
| 1.6.1 鱼类在内分泌干扰实验中的研究应用 | 第36页 |
| 1.6.2 稀有鮈鲫作为内分泌干扰实验材料的优点 | 第36-37页 |
| 1.7 选题的目的和意义 | 第37-38页 |
| 第二章 稀有鮈鲫内参基因筛选 | 第38-53页 |
| 2.1 引言 | 第38页 |
| 2.2 材料与方法 | 第38-42页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 2.2.2 试验方法 | 第39-42页 |
| 2.2.3 数据分析 | 第42页 |
| 2.3 结果 | 第42-50页 |
| 2.3.1 稀有鮈鲫内参基因的克隆和实时定量引物检测 | 第42-44页 |
| 2.3.2 内参基因稳定性分析 | 第44-48页 |
| 2.3.3 cyp19a1b 基因表达的 qRT-PCR 分析 | 第48-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-52页 |
| 2.5 小结 | 第52-53页 |
| 第三章 稀有鮈鲫促性腺激素释放激素、促性腺激素及其受体的基因克隆和组织表达 | 第53-76页 |
| 3.1 前言 | 第53页 |
| 3.2 材料与方法 | 第53-57页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第53页 |
| 3.2.2 试验方法 | 第53-57页 |
| 3.2.3 生物信息学分析及数据分析 | 第57页 |
| 3.3 结果 | 第57-73页 |
| 3.3.1 总 RNA 的检测 | 第57-58页 |
| 3.3.2 稀有鮈鲫 GnRH2、GnRH3、GnRHR1A、GnRHR1B、FSHβ、LHβ、FSHR和 LHR 基因全长 cDNA 分子克隆 | 第58页 |
| 3.3.3 稀有鮈鲫 GnRH2、GnRH3、GnRHR1A、GnRHR1B、FSHβ、LHβ、FSHR和 LHR 序列特征分析 | 第58-63页 |
| 3.3.4 稀有鮈鲫 GnRHs、GnRHRs、GtHβs 和 GtHRs 氨基酸序列相似性分析 | 第63-66页 |
| 3.3.5 稀有鮈鲫 GnRHs 和 GnRHR1s 基因系统发育分析 | 第66-69页 |
| 3.3.6 GnRH2、GnRH3、GnRHR1A、GnRHR1B、FSHβ、LHβ、FSHR 和 LHR 的组织表达分析 | 第69-73页 |
| 3.4 讨论 | 第73-75页 |
| 3.4.1 GnRH 基因的结构与功能 | 第73-74页 |
| 3.4.2 GnRHR 基因的结构与功能 | 第74页 |
| 3.4.3 GtH 基因的结构与功能 | 第74-75页 |
| 3.4.4 GtHR 基因的结构与功能 | 第75页 |
| 3.5 小结 | 第75-76页 |
| 第四章 双酚 A 对稀有鮈鲫 GnRH 系统和 GtH 系统基因表达的影响 | 第76-90页 |
| 4.1 引言 | 第76页 |
| 4.2 材料与方法 | 第76-78页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第76-77页 |
| 4.2.2 试验方法 | 第77-78页 |
| 4.2.3 统计学分析及启动子区分析 | 第78页 |
| 4.3 结果 | 第78-86页 |
| 4.3.1 性腺组织学 | 第78-79页 |
| 4.3.2 总 RNA 的提取与检测 | 第79-80页 |
| 4.3.3 BPA 对 cyp19a1a、GnRH2、GnRH3、GnRHR1A、GnRHR1B、FSHβ、LHβ、FSHR 和 LHR 基因表达模式的影响 | 第80-83页 |
| 4.3.4 GnRH2、GnRH3、FSHβ、LHβ 5’端调控序列的分子克隆及分析 | 第83-86页 |
| 4.4 讨论 | 第86-89页 |
| 4.4.1 BPA 暴露对稀有鲫性腺的影响 | 第87页 |
| 4.4.2 BPA 暴露对稀有鮈鲫 GnRH 系统和 GtH 系统的影响 | 第87-88页 |
| 4.4.3 5’端转录元件与 GnRH 表达的关系 | 第88-89页 |
| 4.5 小结 | 第89-90页 |
| 第五章 17α-乙炔雌二醇对稀有鮈鲫 GtH 系统基因表达的影响 | 第90-97页 |
| 5.1 引言 | 第90页 |
| 5.2 材料与方法 | 第90-91页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第90页 |
| 5.2.2 试验方法 | 第90页 |
| 5.2.3 数据分析 | 第90-91页 |
| 5.3 结果 | 第91-93页 |
| 5.3.1 总 RNA 的检测 | 第91页 |
| 5.3.2 EE2 对脑中雌激素受体和促性腺激素β亚基基因表达的影响 | 第91-92页 |
| 5.3.3 EE2 对性腺中 cyp19a1a 和促性腺激素受体基因表达的影响 | 第92页 |
| 5.3.4 EE2 暴露后目的基因相关性分析 | 第92-93页 |
| 5.4 讨论 | 第93-96页 |
| 5.4.1 EDCs 处理对脑中 FSHβ、LHβ和雌激素受体基因表达的影响 | 第93-95页 |
| 5.4.2 EDCs 暴露对稀有鮈鲫性腺中 cyp19a1a、FSHR 和 LHR 基因表达的影响 | 第95-96页 |
| 5.4.3 5’端转录元件与 GtHβ表达的关系 | 第96页 |
| 5.5 小结 | 第96-97页 |
| 第六章 高通量测序技术分析 EE2 对稀有鮈鲫脑组织转录组的影响 | 第97-127页 |
| 6.1 引言 | 第97页 |
| 6.2 材料与方法 | 第97-103页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第97-98页 |
| 6.2.2 试验方法 | 第98-100页 |
| 6.2.3 数据分析 | 第100-103页 |
| 6.3 结果 | 第103-120页 |
| 6.3.1 总 RNA 的检测 | 第103-104页 |
| 6.3.2 脑组织基因表达谱高通量测序数据 | 第104页 |
| 6.3.3 高通量测序序列分布规律 | 第104-105页 |
| 6.3.4 高通量测序序列映射比对分析 | 第105页 |
| 6.3.5 稀有鮈鲫脑组织差异表达基因筛选 | 第105-108页 |
| 6.3.6 EE2 诱导下脑组织差异基因 GO 富集分析 | 第108-111页 |
| 6.3.7 EE2 诱导下脑组织通路显著性富集分析 | 第111-118页 |
| 6.3.8 稀有鮈鲫脑中 DGE 测序结果可靠性验证 | 第118-120页 |
| 6.4 讨论 | 第120-125页 |
| 6.4.1 脑组织基因表达谱构建 | 第120页 |
| 6.4.2 脑组织基因表达谱高通量测序数据 | 第120-121页 |
| 6.4.3 EE2 诱导对稀有鮈鲫脑组织中生殖调控相关基因的影响 | 第121页 |
| 6.4.4 EE2 暴露对稀有鮈鲫脑组织氧化磷酸化通路的影响 | 第121-122页 |
| 6.4.5 EE2 暴露对稀有鮈鲫脑组织核糖体信号通路的影响 | 第122-123页 |
| 6.4.6 EE2 暴露对稀有鮈鲫脑组织总代谢通路的影响 | 第123-124页 |
| 6.4.7 EE2 暴露影响的能量代谢脑中 GnRH 神经元的影响 | 第124-125页 |
| 6.4.8 EE2 暴露对稀有鮈鲫脑组织性别差异 | 第125页 |
| 6.5 小结 | 第125-127页 |
| 结论、创新点与展望 | 第127-129页 |
| 结论 | 第127页 |
| 创新点 | 第127-128页 |
| 展望 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-153页 |
| 附录 | 第153-161页 |
| 缩略词 | 第161-164页 |
| 附表 | 第164-180页 |
| 附图 | 第180-182页 |
| 致谢 | 第182-183页 |
| 作者简介 | 第183页 |
