| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第14-27页 |
| 第一章 毛囊周期性变化及其在绒山羊上的研究进展 | 第14-20页 |
| 1.1 毛囊周期性变化 | 第14-16页 |
| 1.2 毛囊周期性变化的分子调控 | 第16-17页 |
| 1.3 绒山羊毛囊周期性变化的研究 | 第17-20页 |
| 第二章 miRNA 的特征及在绒山羊上的研究进展 | 第20-27页 |
| 2.1 miRNA 生物合成 | 第20-21页 |
| 2.2 家畜中 miRNA 的研究 | 第21-23页 |
| 2.3 miRNA 在皮肤和毛囊发育中的研究 | 第23-25页 |
| 2.4 本研究的目的意义 | 第25-27页 |
| 试验研究 | 第27-77页 |
| 第三章 绒山羊次级毛囊周期性变化时期皮肤小 RNA 文库构建及序列分析 | 第27-39页 |
| 3.1 材料与方法 | 第27-31页 |
| 3.1.1 所用试剂与仪器 | 第27页 |
| 3.1.2 试验动物及皮肤组织的采集 | 第27-28页 |
| 3.1.3 总 RNA 的提取 | 第28页 |
| 3.1.4 小 RNA 文库的构建 | 第28-29页 |
| 3.1.5 高通量测序 | 第29-30页 |
| 3.1.6 小 RNA 序列分析 | 第30-31页 |
| 3.2 结果与分析 | 第31-37页 |
| 3.2.1 总 RNA 样品质量检测 | 第31-32页 |
| 3.2.2 小 RNA 的生物信息学分析 | 第32-37页 |
| 3.3 讨论 | 第37-38页 |
| 3.3.1 miRNA 的鉴定方法 | 第37-38页 |
| 3.3.2 小 RNA 测序分析 | 第38页 |
| 3.4 小结 | 第38-39页 |
| 第四章 绒山羊次级毛囊周期性变化相关 miRNA 的差异表达及其靶基因功能分析 | 第39-51页 |
| 4.1 材料与方法 | 第39-43页 |
| 4.1.1 所用试剂与仪器 | 第39页 |
| 4.1.2 皮肤组织的采集 | 第39页 |
| 4.1.3 总 RNA 的提取 | 第39页 |
| 4.1.4 保守 miRNA 的差异分析 | 第39-40页 |
| 4.1.5 新 miRNA 的预测 | 第40页 |
| 4.1.6 miRNA 的碱基编辑 | 第40-41页 |
| 4.1.7 miRNA 靶基因的预测及功能分析 | 第41页 |
| 4.1.8 实时定量 PCR | 第41-43页 |
| 4.2 结果与分析 | 第43-49页 |
| 4.2.1 保守 miRNA 的差异分析 | 第43-45页 |
| 4.2.2 新 miRNA 的预测 | 第45-46页 |
| 4.2.3 miRNA 的碱基编辑 | 第46页 |
| 4.2.4 miRNA 靶基因的预测及功能分析 | 第46-48页 |
| 4.2.5 miRNA 实时定量 PCR 分析 | 第48-49页 |
| 4.3 讨论 | 第49-50页 |
| 4.3.1 山羊 miRNA 的鉴定 | 第49页 |
| 4.3.2 miRNA 差异表达分析 | 第49-50页 |
| 4.3.3 miRNA 预测靶基因的功能分析 | 第50页 |
| 4.4 小结 | 第50-51页 |
| 第五章 miR-125b 靶基因预测与鉴定 | 第51-64页 |
| 5.1 材料与方法 | 第51-57页 |
| 5.1.1 所用试剂与仪器 | 第51页 |
| 5.1.2 miR-125b 靶基因预测 | 第51页 |
| 5.1.3 miR-125b 靶位点的扩增 | 第51-53页 |
| 5.1.4 序列比对 | 第53页 |
| 5.1.5 双荧光素酶载体的构建 | 第53-56页 |
| 5.1.6 293T 细胞的培养 | 第56-57页 |
| 5.1.7 双荧光素酶报告基因系统 | 第57页 |
| 5.2 结果与分析 | 第57-61页 |
| 5.2.1 miR-125b 靶基因预测 | 第57-58页 |
| 5.2.2 miR-125b 靶位点的扩增 | 第58-59页 |
| 5.2.3 双荧光素酶载体构建 | 第59-60页 |
| 5.2.4 细胞转染 | 第60页 |
| 5.2.5 双荧光素酶报告基因检测 | 第60-61页 |
| 5.3 讨论 | 第61-62页 |
| 5.3.1 miR-125b 靶基因的预测 | 第61-62页 |
| 5.3.2 miR-125b 靶基因的验证 | 第62页 |
| 5.4 小结 | 第62-64页 |
| 第六章 miR-125b 在绒山羊毛乳头细胞中的功能研究 | 第64-77页 |
| 6.1 材料与方法 | 第64-69页 |
| 6.1.1 所用试剂与仪器 | 第64页 |
| 6.1.2 绒山羊毛乳头细胞的培养 | 第64-65页 |
| 6.1.3 绒山羊次级毛囊毛乳头细胞的鉴定 | 第65页 |
| 6.1.4 miR-125b 组织表达谱的构建 | 第65页 |
| 6.1.5 腺病毒载体构建及包装 | 第65-68页 |
| 6.1.6 腺病毒滴度测定 | 第68页 |
| 6.1.7 重组腺病毒的转染与表达检测 | 第68-69页 |
| 6.2 结果与分析 | 第69-75页 |
| 6.2.1 绒山羊毛乳头细胞体外培养 | 第69-70页 |
| 6.2.2 绒山羊次级毛囊毛乳头细胞的鉴定 | 第70-71页 |
| 6.2.3 miR-125b 组织表达谱 | 第71页 |
| 6.2.4 miR-125b 腺病毒载体的构建 | 第71-73页 |
| 6.2.5 腺病毒包装及病毒滴度测定 | 第73页 |
| 6.2.6 腺病毒感染毛乳头细胞最佳感染浓度的测定 | 第73-74页 |
| 6.2.7 腺病毒感染毛乳头细胞中 miR-125b 表达量的检测 | 第74页 |
| 6.2.8 病毒感染毛乳头细胞后毛囊周期性变化相关基因的检测 | 第74-75页 |
| 6.3 讨论 | 第75-76页 |
| 6.3.1 绒山羊次级毛囊毛乳头细胞的培养与鉴定 | 第75页 |
| 6.3.2 病毒感染毛乳头细胞后毛囊周期性变化相关基因的检测 | 第75-76页 |
| 6.4 小结 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-78页 |
| 创新点 | 第78-79页 |
| 还需进一步深入研究的问题 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 附录 | 第88-115页 |
| 缩略词表 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 作者简介及博士期间所发表的论文 | 第117页 |
