| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 细胞内基于核受体PXR及CYP3A4启动子双荧光报告基因平台的建立及活性中药单体筛选 | 第13-34页 |
| 摘要 | 第13-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 1 研究背景 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-29页 |
| 2.1 试剂和设备 | 第17-19页 |
| 2.2 工作液配制 | 第19-20页 |
| 2.3 细胞培养 | 第20-21页 |
| 2.4 感受态细菌制备及转化 | 第21页 |
| 2.5 质粒提取 | 第21-23页 |
| 2.6 CYP3A4启动子双荧光报告基因质粒和PXR cDNA表达质粒的鉴定 | 第23-26页 |
| 2.7 基于报告基因平台的中药单体筛选 | 第26-28页 |
| 2.8 多剂量活性单体对CYP3A4启动子活性的影响 | 第28-29页 |
| 2.9 统计学分析 | 第29页 |
| 3 实验结果 | 第29-32页 |
| 3.1 测序验证实验结果 | 第29页 |
| 3.2 Westren Blot验证实验结果 | 第29-30页 |
| 3.3 基于报告基因平台的中药单体筛选实验结果 | 第30-31页 |
| 3.4 多剂量活性单体对CYP3A4启动子活性的影响 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| 5 本章小结 | 第33-34页 |
| 第二章 冬凌草甲素对人源化hPXR小鼠肝脏CYP450酶mRNA表达及活性的影响 | 第34-55页 |
| 摘要 | 第34-36页 |
| Abstract | 第36-38页 |
| 1 研究背景 | 第38-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-50页 |
| 2.1 试剂和设备 | 第39-41页 |
| 2.2 工作液配制 | 第41-42页 |
| 2.3 动物饲养 | 第42页 |
| 2.4 组织病理学 | 第42页 |
| 2.5 血清生化学 | 第42页 |
| 2.6 Real time PCR法检测人源化hPXR小鼠Cyp基因mRNA表达水平 | 第42-47页 |
| 2.7 差速离心法制作人源化hPXR小鼠肝微粒体 | 第47-48页 |
| 2.8 人源化hPXR肝微粒体CYPs酶活性检测 | 第48-50页 |
| 2.9 统计学分析 | 第50页 |
| 3 实验结果 | 第50-53页 |
| 3.1 组织病理学结果 | 第50-51页 |
| 3.2 血清学检测结果 | 第51页 |
| 3.3 普通PCR法探索最佳退火温度 | 第51页 |
| 3.4 Real time PCR法检测人源化hPXR小鼠Cyp和POR基因mRNA表达水平 | 第51-52页 |
| 3.5 HPLC-MS/MS法检测源化hPXR小鼠Cyp基因活性 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 5 本章小结 | 第54-55页 |
| 第三章 冬凌草甲素在LS174T细胞系中对CYP450酶的影响 | 第55-75页 |
| 摘要 | 第55-57页 |
| Abstract | 第57-59页 |
| 1 研究背景 | 第59-60页 |
| 2 材料与方法 | 第60-69页 |
| 2.1 试剂和设备 | 第60-62页 |
| 2.2 工作液配制 | 第62页 |
| 2.3 细胞培养 | 第62页 |
| 2.4 Real time PCR法检测CYP基因mRNA表达水平 | 第62-66页 |
| 2.5 Western Blot法检测参与CYP蛋白的表达水平 | 第66-67页 |
| 2.6 HPLC-MS/MS法检测CYP的功能活性 | 第67-68页 |
| 2.7 统计学分析 | 第68-69页 |
| 3 实验结果 | 第69-72页 |
| 3.1 普通PCR法最佳退火温度探索 | 第69页 |
| 3.2 Real Time PCR检测LS174T细胞中CYP和POR基因mRNA表达水平 | 第69-71页 |
| 3.3 Western Blot法检测各CYP酶及POR蛋白的表达水平 | 第71页 |
| 3.4 HPLC-MS/MS法检测CYP的功能活性 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-73页 |
| 5 本章小结 | 第73-75页 |
| 第四章 冬凌草甲素对C57BL/6小鼠肝脏CYP450酶mRNA表达及活性的影响 | 第75-94页 |
| 摘要 | 第75-76页 |
| Abstract | 第76-78页 |
| 1 研究背景 | 第78-79页 |
| 2 材料与方法 | 第79-86页 |
| 2.1 试剂和设备 | 第79-81页 |
| 2.2 工作液配制 | 第81页 |
| 2.3 实验动物 | 第81页 |
| 2.4 组织病理学 | 第81页 |
| 2.5 血清生化学 | 第81页 |
| 2.6 Real time PCR法检测小鼠Cyp基因mRNA表达水平 | 第81-84页 |
| 2.7 差速离心法制作小鼠肝微粒体 | 第84页 |
| 2.8 肝微粒体CYPs酶活性检测 | 第84-86页 |
| 2.9 HPLC-MS/MS法检测代谢产物浓度 | 第86页 |
| 2.10 统计学分析 | 第86页 |
| 3 实验结果 | 第86-91页 |
| 3.1 组织病理学结果 | 第86-87页 |
| 3.2 血清学检测结果 | 第87-88页 |
| 3.3 普通PCR法探索最佳退火温度 | 第88页 |
| 3.4 Real time PCR法检测小鼠Cyp基因mRNA表达水平 | 第88-89页 |
| 3.5 Real time PCR法检测小鼠CAR、PXR和POR基因mRNA表达水平 | 第89-90页 |
| 3.6 HPLC-MS/MS法检测小鼠Cyp基因活性 | 第90-91页 |
| 4 讨论 | 第91-92页 |
| 5 本章小结 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-104页 |
| 综述一 | 第104-116页 |
| 参考文献 | 第112-116页 |
| 综述二 | 第116-126页 |
| 参考文献 | 第122-126页 |
| 攻读学位期间主要成果 | 第126-128页 |
| 致谢 | 第128页 |
