摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
文献综述 | 第14-33页 |
第一章 生殖细胞的发生与体内分化 | 第14-23页 |
1.1 原始生殖细胞的形成 | 第14-17页 |
1.1.1 PGCs 的迁移 | 第14-16页 |
1.1.2 PGCs 迁移的机制 | 第16-17页 |
1.2 PGCS 的增殖与分化 | 第17页 |
1.3 与 PGCS 减数分裂相关的信号通路 | 第17-19页 |
1.3.1 RA-Stra8 在生殖细胞进入减数分裂中的作用 | 第17-18页 |
1.3.2 Nanos 2 抑制减数分裂启动 | 第18页 |
1.3.3 Dazl 对生殖细胞减数分裂的作用 | 第18-19页 |
1.4 与 PGCS 分化相关的基因 | 第19-23页 |
1.4.1 减数分裂前的基因 | 第19-21页 |
1.4.2 减数分裂及其分裂后生殖细胞特异基因 | 第21-23页 |
第二章 人多能干细胞的研究进展 | 第23-30页 |
2.1 人成体干细胞 | 第23-25页 |
2.1.1 人羊水干细胞 | 第23-25页 |
2.1.2 人卵巢上皮干细胞 | 第25页 |
2.2 人胚胎干细胞 | 第25-28页 |
2.2.1 人胚胎干细胞的分离 | 第26页 |
2.2.2 人胚胎干细胞的培养体系 | 第26-27页 |
2.2.3 人胚胎干细胞的分化潜能及应用前景 | 第27-28页 |
2.3 人诱导多能干细胞 | 第28-30页 |
2.3.1 人诱导多能干细胞的产生 | 第28-29页 |
2.3.2 人诱导多能干细胞的应用 | 第29-30页 |
第三章 多能干细胞向雌性生殖细胞分化的研究 | 第30-33页 |
3.1 胚胎干细胞向生殖细胞的分化 | 第30-31页 |
3.1.1 胚胎干细胞体外分化为卵母细胞 | 第30-31页 |
3.1.2 胚胎干细胞体外分化为精子 | 第31页 |
3.2 成体干细胞向生殖细胞的分化 | 第31-33页 |
3.2.1 皮肤干细胞向卵母样细胞的分化 | 第32页 |
3.2.2 胰脏干细胞向卵母样细胞的分化 | 第32页 |
3.2.3 卵巢来源干细胞向卵母样细胞的分化 | 第32-33页 |
试验研究 | 第33-76页 |
前言 | 第33-34页 |
第四章 人羊水干细胞的培养及其鉴定 | 第34-44页 |
4.1 材料和方法 | 第34-38页 |
4.1.1 试验材料与耗材 | 第34-36页 |
4.1.2 试验方法 | 第36-38页 |
4.2 结果 | 第38-41页 |
4.2.1 人羊水干细胞的形态观察 | 第38页 |
4.2.2 半定量检测不同株 hAFSCs 的特异性基因的表达 | 第38-39页 |
4.2.3 流式细胞术检测不同株 hAFSCs 表面蛋白的表达情况 | 第39-41页 |
4.2.4 免疫荧光法检测 hAFSCs 多能性蛋白的表达情况 | 第41页 |
4.3 讨论 | 第41-43页 |
4.3.1 人羊水干细胞的生长特性 | 第41-42页 |
4.3.2 人羊水干细胞的来源与表面标记物 | 第42页 |
4.3.3 人羊水干细胞与人多能干细胞标记基因的比较 | 第42-43页 |
4.4 小结 | 第43-44页 |
第五章 人羊水干细胞向雌性生殖细胞诱导分化及其鉴定 | 第44-61页 |
5.1 材料和方法 | 第44-47页 |
5.1.1 材料与耗材 | 第44-45页 |
5.1.2 试验方法 | 第45-47页 |
5.2 结果 | 第47-57页 |
5.2.1 BMP15 蛋白在猪卵泡液中的检测 | 第47-48页 |
5.2.2 pBMP15-EGFP 质粒的鉴定 | 第48页 |
5.2.3 雌性生殖样细胞的形态学变化 | 第48-49页 |
5.2.4 雌性生殖样细胞的形态学特征 | 第49-51页 |
5.2.5 雌性生殖样细胞形成过程中特异性基因的表达 | 第51-53页 |
5.2.6 培养液上清中激素的检测 | 第53页 |
5.2.7 单倍体细胞形成检测 | 第53页 |
5.2.8 pBMP15-EGFP 动态监测雌性生殖样细胞形成特征 | 第53-55页 |
5.2.9 雌性生殖样细胞特异性蛋白质表达的检测 | 第55页 |
5.2.10 孤雌胚胎样细胞的形态学特征及其检测 | 第55-56页 |
5.2.11 雌性生殖样细胞体内分化能力 | 第56-57页 |
5.3 讨论 | 第57-59页 |
5.3.1 卵泡液成分对雌性生殖细胞产生的影响 | 第57-58页 |
5.3.2 人羊水干细胞特异性标记基因与生殖细胞的形成 | 第58-59页 |
5.3.3 生殖细胞基因的表达与雌性生殖样细胞的形成 | 第59页 |
5.4 小结 | 第59-61页 |
第六章 人胚胎干细胞的培养与鉴定 | 第61-70页 |
6.1 材料和方法 | 第62-65页 |
6.1.1 试验材料与耗材 | 第62页 |
6.1.2 试验方法 | 第62-65页 |
6.2 结果 | 第65-68页 |
6.2.1 人胚胎干细胞在 feeder-dependent 和 feeder-free 培养体系下的形态 | 第65-66页 |
6.2.2 人胚胎干细胞在多能性标记分子的检测 | 第66-68页 |
6.2.3 人胚胎干细胞体外形成类胚体的能力 | 第68页 |
6.3 讨论 | 第68-69页 |
6.3.1 人胚胎干细胞在不同培养体系下的形态学比较 | 第68页 |
6.3.2 人胚胎干细胞的形态与多能性标记的比较 | 第68-69页 |
6.3.3 人胚胎干细胞的类胚体形成能力 | 第69页 |
6.4 小结 | 第69-70页 |
第七章 人胚胎干细胞向雌性生殖细胞诱导分化及其鉴定 | 第70-76页 |
7.1 材料和方法 | 第70-71页 |
7.1.1 试验材料与耗材 | 第70页 |
7.1.2 试验方法 | 第70-71页 |
7.2 结果 | 第71-74页 |
7.2.1 人胚胎干细胞生殖基因的检测 | 第71页 |
7.2.2 单层人胚胎干细胞进行诱导分化后的形态学特征 | 第71-72页 |
7.2.3 EB 诱导分化后的形态学特征 | 第72-73页 |
7.2.4 单层诱导分化后的分子检测 | 第73页 |
7.2.5 人胚胎干细胞向雌性生殖细胞诱导分化后的检测 | 第73-74页 |
7.3 讨论 | 第74-75页 |
7.3.1 单层 hESCs 和 EB 向雌性生殖细胞诱导的形态学比较 | 第74页 |
7.3.2 特异性标记分子的比较 | 第74-75页 |
7.4 小结 | 第75-76页 |
结论 | 第76-77页 |
论文创新点及下一步研究方向 | 第77-78页 |
创新点 | 第77页 |
下一步研究方向 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-88页 |
缩略词 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
作者简介 | 第90-91页 |