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人多能干细胞向雌性生殖细胞诱导分化的研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
文献综述第14-33页
    第一章 生殖细胞的发生与体内分化第14-23页
        1.1 原始生殖细胞的形成第14-17页
            1.1.1 PGCs 的迁移第14-16页
            1.1.2 PGCs 迁移的机制第16-17页
        1.2 PGCS 的增殖与分化第17页
        1.3 与 PGCS 减数分裂相关的信号通路第17-19页
            1.3.1 RA-Stra8 在生殖细胞进入减数分裂中的作用第17-18页
            1.3.2 Nanos 2 抑制减数分裂启动第18页
            1.3.3 Dazl 对生殖细胞减数分裂的作用第18-19页
        1.4 与 PGCS 分化相关的基因第19-23页
            1.4.1 减数分裂前的基因第19-21页
            1.4.2 减数分裂及其分裂后生殖细胞特异基因第21-23页
    第二章 人多能干细胞的研究进展第23-30页
        2.1 人成体干细胞第23-25页
            2.1.1 人羊水干细胞第23-25页
            2.1.2 人卵巢上皮干细胞第25页
        2.2 人胚胎干细胞第25-28页
            2.2.1 人胚胎干细胞的分离第26页
            2.2.2 人胚胎干细胞的培养体系第26-27页
            2.2.3 人胚胎干细胞的分化潜能及应用前景第27-28页
        2.3 人诱导多能干细胞第28-30页
            2.3.1 人诱导多能干细胞的产生第28-29页
            2.3.2 人诱导多能干细胞的应用第29-30页
    第三章 多能干细胞向雌性生殖细胞分化的研究第30-33页
        3.1 胚胎干细胞向生殖细胞的分化第30-31页
            3.1.1 胚胎干细胞体外分化为卵母细胞第30-31页
            3.1.2 胚胎干细胞体外分化为精子第31页
        3.2 成体干细胞向生殖细胞的分化第31-33页
            3.2.1 皮肤干细胞向卵母样细胞的分化第32页
            3.2.2 胰脏干细胞向卵母样细胞的分化第32页
            3.2.3 卵巢来源干细胞向卵母样细胞的分化第32-33页
试验研究第33-76页
    前言第33-34页
    第四章 人羊水干细胞的培养及其鉴定第34-44页
        4.1 材料和方法第34-38页
            4.1.1 试验材料与耗材第34-36页
            4.1.2 试验方法第36-38页
        4.2 结果第38-41页
            4.2.1 人羊水干细胞的形态观察第38页
            4.2.2 半定量检测不同株 hAFSCs 的特异性基因的表达第38-39页
            4.2.3 流式细胞术检测不同株 hAFSCs 表面蛋白的表达情况第39-41页
            4.2.4 免疫荧光法检测 hAFSCs 多能性蛋白的表达情况第41页
        4.3 讨论第41-43页
            4.3.1 人羊水干细胞的生长特性第41-42页
            4.3.2 人羊水干细胞的来源与表面标记物第42页
            4.3.3 人羊水干细胞与人多能干细胞标记基因的比较第42-43页
        4.4 小结第43-44页
    第五章 人羊水干细胞向雌性生殖细胞诱导分化及其鉴定第44-61页
        5.1 材料和方法第44-47页
            5.1.1 材料与耗材第44-45页
            5.1.2 试验方法第45-47页
        5.2 结果第47-57页
            5.2.1 BMP15 蛋白在猪卵泡液中的检测第47-48页
            5.2.2 pBMP15-EGFP 质粒的鉴定第48页
            5.2.3 雌性生殖样细胞的形态学变化第48-49页
            5.2.4 雌性生殖样细胞的形态学特征第49-51页
            5.2.5 雌性生殖样细胞形成过程中特异性基因的表达第51-53页
            5.2.6 培养液上清中激素的检测第53页
            5.2.7 单倍体细胞形成检测第53页
            5.2.8 pBMP15-EGFP 动态监测雌性生殖样细胞形成特征第53-55页
            5.2.9 雌性生殖样细胞特异性蛋白质表达的检测第55页
            5.2.10 孤雌胚胎样细胞的形态学特征及其检测第55-56页
            5.2.11 雌性生殖样细胞体内分化能力第56-57页
        5.3 讨论第57-59页
            5.3.1 卵泡液成分对雌性生殖细胞产生的影响第57-58页
            5.3.2 人羊水干细胞特异性标记基因与生殖细胞的形成第58-59页
            5.3.3 生殖细胞基因的表达与雌性生殖样细胞的形成第59页
        5.4 小结第59-61页
    第六章 人胚胎干细胞的培养与鉴定第61-70页
        6.1 材料和方法第62-65页
            6.1.1 试验材料与耗材第62页
            6.1.2 试验方法第62-65页
        6.2 结果第65-68页
            6.2.1 人胚胎干细胞在 feeder-dependent 和 feeder-free 培养体系下的形态第65-66页
            6.2.2 人胚胎干细胞在多能性标记分子的检测第66-68页
            6.2.3 人胚胎干细胞体外形成类胚体的能力第68页
        6.3 讨论第68-69页
            6.3.1 人胚胎干细胞在不同培养体系下的形态学比较第68页
            6.3.2 人胚胎干细胞的形态与多能性标记的比较第68-69页
            6.3.3 人胚胎干细胞的类胚体形成能力第69页
        6.4 小结第69-70页
    第七章 人胚胎干细胞向雌性生殖细胞诱导分化及其鉴定第70-76页
        7.1 材料和方法第70-71页
            7.1.1 试验材料与耗材第70页
            7.1.2 试验方法第70-71页
        7.2 结果第71-74页
            7.2.1 人胚胎干细胞生殖基因的检测第71页
            7.2.2 单层人胚胎干细胞进行诱导分化后的形态学特征第71-72页
            7.2.3 EB 诱导分化后的形态学特征第72-73页
            7.2.4 单层诱导分化后的分子检测第73页
            7.2.5 人胚胎干细胞向雌性生殖细胞诱导分化后的检测第73-74页
        7.3 讨论第74-75页
            7.3.1 单层 hESCs 和 EB 向雌性生殖细胞诱导的形态学比较第74页
            7.3.2 特异性标记分子的比较第74-75页
        7.4 小结第75-76页
结论第76-77页
论文创新点及下一步研究方向第77-78页
    创新点第77页
    下一步研究方向第77-78页
参考文献第78-88页
缩略词第88-89页
致谢第89-90页
作者简介第90-91页

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