| 摘要 | 第3-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 第1章 绪论 | 第16-36页 |
| 1.1 蜕皮激素合成与信号级联 | 第17-23页 |
| 1.1.1 蜕皮激素生物合成 | 第17-19页 |
| 1.1.2 20E信号通路 | 第19-23页 |
| 1.2 热休克蛋白与20E信号的关联性 | 第23-24页 |
| 1.3 20E信号与昆虫生殖 | 第24-25页 |
| 1.4 20E与JH信号相互作用 | 第25-26页 |
| 1.5 蜕皮激素相关受体研究进展 | 第26-29页 |
| 1.5.1 ERR概述 | 第26-27页 |
| 1.5.2 EERγ与生理和疾病 | 第27-29页 |
| 1.6 昆虫生殖系统 | 第29-30页 |
| 1.7 RNA干扰 | 第30-31页 |
| 1.8 本研究的目的及意义 | 第31-32页 |
| 1.9 本研究的创新之处 | 第32-33页 |
| 1.10 研究内容 | 第33-36页 |
| 第2章 黄脸油葫芦TeERR和20E相关基因的克隆及其时空表达分析 | 第36-52页 |
| 2.1 前言 | 第36页 |
| 2.2 实验材料 | 第36-37页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第36-37页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第37页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第37页 |
| 2.3 实验方法 | 第37-43页 |
| 2.3.1 Total RNA提取 | 第37-38页 |
| 2.3.2 cDNA的合成 | 第38页 |
| 2.3.3 引物设计与合成 | 第38-39页 |
| 2.3.4 RT-PCR | 第39-40页 |
| 2.3.5 胶体纯化 | 第40页 |
| 2.3.6 载体构建 | 第40-41页 |
| 2.3.7 质粒提取 | 第41页 |
| 2.3.8 20E处理 | 第41-43页 |
| 2.3.9 TeERR和20E相关基因在性腺中的表达 | 第43页 |
| 2.3.10 数据处理 | 第43页 |
| 2.4 结果与分析 | 第43-49页 |
| 2.4.1 20E相关基因的克隆 | 第43-45页 |
| 2.4.2 20E处理后TeERR和20E相关基因的表达 | 第45-47页 |
| 2.4.3 TeERR和20E相关基因在精巢发育过程中的表达 | 第47-48页 |
| 2.4.4 TeERR和20E相关基因在卵巢发育过程中的表达 | 第48页 |
| 2.4.5 TeERR和20E相关基因的空间表达 | 第48-49页 |
| 2.5 讨论 | 第49-52页 |
| 第3章 黄脸油葫芦成体精巢中TeERR和TeEcR相关性分析 | 第52-70页 |
| 3.1 前言 | 第52页 |
| 3.2 实验材料 | 第52-53页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第52-53页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第53页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第53页 |
| 3.3 实验方法 | 第53-58页 |
| 3.3.1 EGFP,TeERR和TeEcR片段扩增 | 第53-54页 |
| 3.3.2 dsRNA合成 | 第54-55页 |
| 3.3.3 内参稳定性鉴定 | 第55-56页 |
| 3.3.4 左、右侧精巢中TeERR和TeEcR mRNA的表达 | 第56页 |
| 3.3.5 dsTeERR注射剂量与干扰时间的选择 | 第56页 |
| 3.3.6 dsTeEcR干扰时间的选择 | 第56页 |
| 3.3.7 dsTeERR/dsTeEcR干扰后TeEcR和TeERR mRNA和蛋白的表达 | 第56-58页 |
| 3.3.8 免疫组织化学 | 第58页 |
| 3.3.9 数据处理 | 第58页 |
| 3.4 结果与分析 | 第58-66页 |
| 3.4.1 EGFP,TeERR和TeEcR dsRNA合成 | 第58-60页 |
| 3.4.2 内参选择 | 第60页 |
| 3.4.3 dsTeERR和dsTeEcR干扰剂量与时间的选择 | 第60-62页 |
| 3.4.4 左、右侧精巢中TeERR和TeEcR mRNA的表达 | 第62-63页 |
| 3.4.5 dsTeERR干扰后TeERR和TeEcR mRNA的表达 | 第63页 |
| 3.4.6 dsTeEcR干扰后TeEcR和TeERR mRNA的表达 | 第63页 |
| 3.4.7 dsTeERR/dsTeEcR干扰后TeERR和TeEcR表达 | 第63-65页 |
| 3.4.8 dsTeERR/dsTeEcR干扰后TeERR和TeEcR的定位与表达 | 第65-66页 |
| 3.4.9 dsTeERR/dsTeEcR干扰后精巢形态和重量的变化 | 第66页 |
| 3.5 讨论 | 第66-70页 |
| 第4章 黄脸油葫芦成体精巢中TeERR,TeEcR,TeHsc70和TeHsp90敲低对20E相关基因表达的影响 | 第70-84页 |
| 4.1 前言 | 第70页 |
| 4.2 实验材料 | 第70-71页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第70-71页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第71页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第71页 |
| 4.3 实验方法 | 第71-73页 |
| 4.3.1 TeHsc70和TeHsp90片段扩增 | 第71页 |
| 4.3.2 dsRNA合成 | 第71-72页 |
| 4.3.3 dsTeHsc70/dsTeHsp90干扰时间的选择 | 第72页 |
| 4.3.4 dsTeERR/dsTeEcR干扰后20E相关基因的表达 | 第72页 |
| 4.3.5 dsTeHsc70/dsTeHsp90干扰后20E相关基因的表达 | 第72-73页 |
| 4.3.6 数据处理 | 第73页 |
| 4.4 结果与分析 | 第73-80页 |
| 4.4.1 TeHsc70和TeHsp90 dsRNA合成 | 第73-74页 |
| 4.4.2 dsTeERR/dsTeEcR干扰后20E相关基因的表达 | 第74-76页 |
| 4.4.3 dsTeHsc70和dsTeHsp90干扰时间的选择 | 第76-78页 |
| 4.4.4 dsTeHsc70+dsTeHsp90干扰后20E相关基因的表达 | 第78-79页 |
| 4.4.5 dsTeHsc70干扰后20E相关基因的表达 | 第79-80页 |
| 4.4.6 dsTeHsp90干扰后20E相关基因的表达 | 第80页 |
| 4.5 讨论 | 第80-84页 |
| 第5章 黄脸油葫芦4和6龄若虫卵巢中TeERR和TeEcR敲低对20E相关基因表达的影响 | 第84-92页 |
| 5.1 前言 | 第84页 |
| 5.2 实验材料 | 第84-85页 |
| 5.2.1 实验动物 | 第84页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第84-85页 |
| 5.2.3 主要仪器 | 第85页 |
| 5.3 实验方法 | 第85-86页 |
| 5.3.1 20E处理 | 第85页 |
| 5.3.2 dsRNA合成 | 第85页 |
| 5.3.3 dsTeERR/dsTeEcR干扰后20E相关基因的表达 | 第85页 |
| 5.3.4 数据处理 | 第85-86页 |
| 5.4 结果与分析 | 第86-89页 |
| 5.4.1 20E处理后雌性4龄若虫中20E相关基因的表达 | 第86-88页 |
| 5.4.2 20E处理后雌性6龄若虫中20E相关基因的表达 | 第88页 |
| 5.4.3 dsTeERR/dsTeEcR干扰后雌性4龄若虫中20E相关基因的表达 | 第88页 |
| 5.4.4 dsTeERR/dsTeEcR干扰后雌性6龄若虫中20E相关基因的表达 | 第88-89页 |
| 5.5 讨论 | 第89-92页 |
| 第6章 黄脸油葫芦4龄若虫雌雄性腺中TeEcR敲低后20E相关基因表达差异分析 | 第92-98页 |
| 6.1 前言 | 第92页 |
| 6.2 实验材料 | 第92-93页 |
| 6.2.1 实验动物 | 第92页 |
| 6.2.2 主要试剂 | 第92-93页 |
| 6.2.3 主要仪器 | 第93页 |
| 6.3 实验方法 | 第93页 |
| 6.3.1 TeEcR dsRNA合成 | 第93页 |
| 6.3.2 dsTeEcR干扰后20E相关基因的表达 | 第93页 |
| 6.3.3 数据处理 | 第93页 |
| 6.4 结果与分析 | 第93-95页 |
| 6.4.1 dsTeEcR干扰效率检测 | 第93-94页 |
| 6.4.2 dsTeEcR干扰后4龄若虫精、卵巢中20E相关基因的表达 | 第94-95页 |
| 6.5 讨论 | 第95-98页 |
| 结论 | 第98-102页 |
| 参考文献 | 第102-128页 |
| 附录 | 第128-136页 |
| 附录一 20E相关基因部分cDNA序列 | 第128-133页 |
| 附录二 内参基因cDNA序列 | 第133-136页 |
| 致谢 | 第136-138页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第138页 |
