摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第13-20页 |
1 动脉粥样硬化 | 第13-15页 |
1.1 动脉粥样硬化简介 | 第13页 |
1.2 动脉粥样硬化易患部位 | 第13页 |
1.3 动脉粥样硬化致病机理 | 第13-14页 |
1.4 动脉粥样硬化致病因素 | 第14-15页 |
2 动脉粥样硬化动物模型研究的进展 | 第15-16页 |
3 动脉粥样硬化相关基因的研究进展 | 第16-19页 |
3.1 单核细胞趋化蛋白1(Monocyte chemotactic protein 1,MCP-1) | 第16-17页 |
3.2 基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinases 9,MMP-9) | 第17-19页 |
4 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 实验研究 | 第20-23页 |
1. 实验材料 | 第20-22页 |
1.1 材料来源 | 第20页 |
1.2 主要试剂与酶类 | 第20页 |
1.3 抗体来源 | 第20-21页 |
1.4 溶液试剂及培养基的配置 | 第21-22页 |
2. 实验仪器 | 第22-23页 |
实验一 广西巴马小型猪动脉粥样硬化模型的制作 | 第23-38页 |
1. 方法 | 第23-25页 |
1.1 实验动物的选择 | 第23页 |
1.2 动脉粥样硬化模型的制作 | 第23-24页 |
1.3 血管组织切片的制作 | 第24-25页 |
1.4 数据处理 | 第25页 |
2. 结果 | 第25-35页 |
2.1 体重变化 | 第25-26页 |
2.2 血液生化指标及AI值 | 第26-29页 |
2.3 个体动脉粥样硬化病理切片及其与个体AI指数值的关联分析 | 第29-35页 |
3 讨论 | 第35-38页 |
实验二 广西巴马小型猪MCP-1的克隆及分析 | 第38-47页 |
1 实验材料 | 第38页 |
2 实验方法 | 第38-42页 |
2.1 总RNA的提取 | 第38页 |
2.2 反转录 | 第38-39页 |
2.3 引物设计 | 第39-40页 |
2.4 目的片段合成 | 第40页 |
2.5 PCR产物纯化回收 | 第40-41页 |
2.6 目的片段与PMD-18T载体的连接 | 第41页 |
2.7 重组质粒转化感受态细菌及阳性质粒筛选 | 第41-42页 |
2.8 广西巴马小型猪MCP-1蛋白预测 | 第42页 |
3 结果与分析 | 第42-45页 |
3.1 总RNA的提取 | 第42页 |
3.2 MCP-1基因PCR扩增电泳及菌液PCR电泳 | 第42-43页 |
3.3 MCP-1基因目的片段测序结果 | 第43-44页 |
3.4 广西巴马小型猪MCP-1蛋白一级结构 | 第44页 |
3.5 广西巴马小型猪MCP-1蛋白预测 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
实验三 广西巴马小型猪AS相关基因的表达检测 | 第47-65页 |
1. 实验材料 | 第47页 |
2. 实验方法 | 第47-51页 |
2.1 免疫组化切片的制作 | 第47页 |
2.2 免疫组化阳性率统计 | 第47-48页 |
2.3 血管及肝脏组织RNA的提取 | 第48页 |
2.4 反转录 | 第48-49页 |
2.5 引物设计与合成 | 第49页 |
2.6 MMP-9,MCP-1和内参18s的标准曲线的建立 | 第49-50页 |
2.7 MMP-9基因和MCP-1基因相对表达量 | 第50页 |
2.8 数据统计分析 | 第50-51页 |
3 结果 | 第51-61页 |
3.1 实验组3和对照组免疫组化结果 | 第51-57页 |
3.2 RNA完整性检测 | 第57页 |
3.3 MMP-9,MCP-1和18s基因标准曲线的建立结果 | 第57-58页 |
3.4 MCP-1和MMP-9的相对表达结果 | 第58-61页 |
4 讨论 | 第61-65页 |
4.1 实验组3和对照组免疫组化 | 第61-62页 |
4.2 实时荧光定量PCR | 第62页 |
4.3 MCP-1与MMP-9基因表达分析 | 第62-65页 |
结论 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-71页 |
致谢 | 第71-73页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第73页 |