| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 文献综述 | 第11-21页 |
| 第一章 禽脑脊髓炎病毒研究进展 | 第11-19页 |
| 1.1 病原学 | 第11-12页 |
| 1.1.1 AEV 的形态学 | 第11页 |
| 1.1.2 病毒的增殖 | 第11-12页 |
| 1.2 分子生物学特性 | 第12-13页 |
| 1.2.1 AEV 基因组 | 第12页 |
| 1.2.2 VP1 基因及其编码的蛋白 | 第12-13页 |
| 1.2.3 AEV 与其他小 RNA 病毒的关系 | 第13页 |
| 1.3 AEV 的流行病学 | 第13-15页 |
| 1.3.1 传播方式 | 第13页 |
| 1.3.2 发病率和死亡率 | 第13-14页 |
| 1.3.3 潜伏期 | 第14页 |
| 1.3.4 临床症状 | 第14页 |
| 1.3.5 病理变化 | 第14页 |
| 1.3.6 发病机理 | 第14-15页 |
| 1.4 禽脑脊髓炎病毒的检测方法研究进展 | 第15-17页 |
| 1.4.1 病毒的分离 | 第15页 |
| 1.4.2 鸡胚易感性试验（ES） | 第15页 |
| 1.4.3 琼脂扩散试验（AGP） | 第15-16页 |
| 1.4.4 单克隆抗体技术（MAb） | 第16页 |
| 1.4.5 酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第16页 |
| 1.4.6 反转录聚合酶链反应（RT-PCR） | 第16-17页 |
| 1.4.7 核酸探针技术 | 第17页 |
| 1.4.8 环介导等温扩增技术（LAMP） | 第17页 |
| 1.5 鉴别诊断 | 第17-18页 |
| 1.6 防制措施 | 第18-19页 |
| 第二章 实时荧光定量 PCR 研究进展 | 第19-21页 |
| 2.1 实时荧光定量 PCR 技术的原理 | 第19页 |
| 2.2 实时荧光定量方法 | 第19页 |
| 2.3 荧光染料与荧光探针 | 第19-20页 |
| 2.4 产物特异性分析 | 第20页 |
| 2.5 动检领域的应用 | 第20-21页 |
| 试验研究 | 第21-38页 |
| 第三章 禽脑脊髓病毒荧光定量检测方法的建立 | 第21-34页 |
| 3.1 材料 | 第21-22页 |
| 3.1.1 AEV SX 毒株 | 第21页 |
| 3.1.2 SPF 鸡胚 | 第21页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第21-22页 |
| 3.1.5 常用试剂及培养基的配制 | 第22页 |
| 3.1.6 荧光定量用引物设计 | 第22页 |
| 3.2 方法 | 第22-26页 |
| 3.2.1 病毒增殖 | 第22页 |
| 3.2.2 RNA 的提取 | 第22-23页 |
| 3.2.3 质粒模板标准品的制备 | 第23-25页 |
| 3.2.4 实时荧光定量 PCR 方法的建立 | 第25-26页 |
| 3.2.5 荧光定量 PCR 方法的评价 | 第26页 |
| 3.3 结果 | 第26-32页 |
| 3.3.1 常规 PCR 扩增结果 | 第26-27页 |
| 3.3.2 质粒标准品的鉴定结果 | 第27页 |
| 3.3.3 标准品质粒的拷贝数计算 | 第27页 |
| 3.3.4 荧光定量 PCR 反应条件的优化结果 | 第27-28页 |
| 3.3.5 扩增曲线的建立 | 第28页 |
| 3.3.6 标准曲线的建立 | 第28-29页 |
| 3.3.7 熔解曲线分析 | 第29页 |
| 3.3.8 敏感性分析 | 第29-30页 |
| 3.3.9 重复性验证 | 第30-31页 |
| 3.3.10 特异性验证 | 第31-32页 |
| 3.4 讨论 | 第32-33页 |
| 3.5 小结 | 第33-34页 |
| 第四章 实时荧光定量 RT-PCR 的初步应用 | 第34-38页 |
| 4.1 材料 | 第34页 |
| 4.1.1 AEV 1143 毒株 | 第34页 |
| 4.1.2 SPF 鸡胚 | 第34页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第34页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第34页 |
| 4.2 方法 | 第34-36页 |
| 4.2.1 鸡胚毒的检测 | 第34-35页 |
| 4.2.2 临床样品检测 | 第35-36页 |
| 4.3 结果 | 第36页 |
| 4.3.1 鸡胚病毒检测结果 | 第36页 |
| 4.3.2 临床样品的 Real-time PCR 与常规 RT-PCR 检测 | 第36页 |
| 4.4 讨论 | 第36-37页 |
| 4.5 小结 | 第37-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 缩略词表 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 作者简介 | 第46页 |