摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
目录 | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第8-14页 |
1.1 猪胰腺脂肪酶概述 | 第8-9页 |
1.1.1 猪胰腺脂肪酶简介 | 第8页 |
1.1.2 PPL的结构 | 第8页 |
1.1.3 PPL的分离纯化 | 第8-9页 |
1.2 PPL的应用 | 第9-10页 |
1.3 提高酶活性和稳定性传统技术 | 第10-12页 |
1.3.1 蛋白质工程改造 | 第10页 |
1.3.2 化学修饰 | 第10页 |
1.3.3 酶固定化 | 第10-12页 |
1.4 超高压技术在工业酶方面的应用 | 第12页 |
1.5 本课题研究的主要内容 | 第12-14页 |
1.5.1 立题意义 | 第12页 |
1.5.2 研究内容 | 第12-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-22页 |
2.1 实验材料 | 第14-15页 |
2.1.1 主要试剂 | 第14页 |
2.1.2 主要仪器 | 第14-15页 |
2.2 实验方法 | 第15-22页 |
2.2.1 脂肪酶水解酶活的测定 | 第15页 |
2.2.2 蛋白浓度测定方法 | 第15-16页 |
2.2.3 酯化活力的测定 | 第16页 |
2.2.4 环氧氯丙烷活化 | 第16-17页 |
2.2.5 氨基活化 | 第17页 |
2.2.6 酶固定化方法 | 第17-19页 |
2.2.7 PPL二级结构变化检测方法 | 第19页 |
2.2.8 固定化PPL结构表征方法 | 第19-20页 |
2.2.9 固定化PPL酶学性质分析方法 | 第20页 |
2.2.10 超高压下酶稳定性分析实验 | 第20页 |
2.2.11 超高压下酶促反应速率测定方法 | 第20-22页 |
第三章 结果与讨论 | 第22-50页 |
3.1 聚乙烯醇辅助PPL固定化研究 | 第22-35页 |
3.1.1 PPL固定化载体和固定化方法的确定 | 第22-24页 |
3.1.2 氨基化硅胶形貌表征、结构及最大静态酶吸附量 | 第24-25页 |
3.1.3 氨基化硅胶固定PPL条件优化 | 第25-29页 |
3.1.4 PVA辅助PPL固定化提高酶活性 | 第29-35页 |
3.2 固定化PPL结构探测及酶学性质比较 | 第35-42页 |
3.2.1 固定化PPL的扫描电镜图 | 第36页 |
3.2.2 傅立叶变换红外光谱表征固定化PPL | 第36-37页 |
3.2.3 最适反应条件 | 第37-39页 |
3.2.4 热稳定性比较 | 第39-40页 |
3.2.5 存储稳定性 | 第40页 |
3.2.6 固定化PPL重复利用次数考察 | 第40-41页 |
3.2.7 不同固定化方法所得固定化PPL性能比较 | 第41-42页 |
3.3 超高压对固定化和游离PPL稳定性及酶促反应的影响 | 第42-50页 |
3.3.1 超高压下固定化和游离PPL稳定性分析 | 第42-45页 |
3.3.2 PPL在超高压处理后的复原性分析 | 第45-46页 |
3.3.3 超高压下固定化和游离PPL的酶促反应 | 第46-48页 |
3.3.4 超高压和固定化对PPL酯化速率和稳定性影响比较 | 第48-50页 |
主要结论与展望 | 第50-51页 |
主要结论 | 第50页 |
展望 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第58页 |