摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-26页 |
1.1 长链非编码RNA介绍 | 第10-11页 |
1.2 LNCRNA的分类、起源和功能 | 第11-13页 |
1.2.1 LNCRNA的分类 | 第11-12页 |
1.2.2 LNCRNA的起源 | 第12页 |
1.2.3 LNCRNA的功能 | 第12-13页 |
1.3 LNCRNA作用机制 | 第13-17页 |
1.3.1 LNCRNAs调节染色质重塑 | 第15页 |
1.3.2 LNCRNAS调节转录控制 | 第15页 |
1.3.3 LNCRNAS调节转录后处理 | 第15-16页 |
1.3.4 LNCRNAS调节蛋白质功能与定位 | 第16-17页 |
1.4 LNCRNA的筛选 | 第17-19页 |
1.5 LNCRNA与脂质代谢 | 第19-22页 |
1.5.1 LNCRNAS调节肝脏中的脂质代谢 | 第19-20页 |
1.5.2 LNCRNAS调节脂肪形成 | 第20-21页 |
1.5.3 LNCRNA与动脉粥样硬化 | 第21页 |
1.5.4 LNCRNA与胰岛素抵抗 | 第21-22页 |
1.6 LNCRNA的研究展望 | 第22-24页 |
1.7 胆固醇代谢与代谢性疾病 | 第24-26页 |
2 实验材料 | 第26-27页 |
2.1 试剂 | 第26页 |
2.2 菌株与质粒 | 第26页 |
2.3 抗体 | 第26页 |
2.4 细胞培养 | 第26页 |
2.5 相关试剂盒 | 第26页 |
2.6 小鼠 | 第26-27页 |
3 实验方法 | 第27-39页 |
3.1 LNCRNA的筛选 | 第27页 |
3.2 构建质粒 | 第27-28页 |
3.2.1 引物设计 | 第27页 |
3.2.2 质粒的构建 | 第27-28页 |
3.3 质粒中抽 | 第28-29页 |
3.4 细胞培养 | 第29-30页 |
3.5 细胞转染 | 第30页 |
3.6 蛋白抽提 | 第30-31页 |
3.7 蛋白免疫印迹杂交( WESTERN BLOT) | 第31页 |
3.8 免疫荧光染色 | 第31-32页 |
3.9 RNA抽提 | 第32页 |
3.10 逆转录反应 | 第32页 |
3.11 实时定量PCR | 第32-33页 |
3.12 稳定表达细胞株的建立 | 第33页 |
3.13 MTT检测 | 第33-34页 |
3.14 线粒体膜电位检测 | 第34页 |
3.15 ATP检测 | 第34-35页 |
3.16 活性氧检测 | 第35页 |
3.17 电镜样品制备 | 第35-36页 |
3.18 腺相关病毒包装 | 第36-37页 |
3.18.1 腺相关病毒的质粒构建 | 第36页 |
3.18.2 腺相关病毒的包装 | 第36页 |
3.18.3 腺相关病毒的纯化 | 第36-37页 |
3.19 葡萄糖耐量(GTT)和胰岛素耐量(ITT)试验 | 第37页 |
3.20 代谢笼试验 | 第37页 |
3.21 血液和肝脏化学分析 | 第37页 |
3.22 H&E染色 | 第37-38页 |
3.23 ORO染色 | 第38页 |
3.24 冰冻切片 | 第38-39页 |
4 实验结果 | 第39-52页 |
4.1 LNCRNA的筛选 | 第39-40页 |
4.2 LNCRNA在细胞上的功能 | 第40-44页 |
4.2.1 P5.3对线粒体功能的影响 | 第41-43页 |
4.2.2 P5.3对细胞代谢的影响 | 第43-44页 |
4.3 LNCRNA在动物上的功能 | 第44-52页 |
4.3.1 P5.3对小鼠代谢的影响 | 第44-47页 |
4.3.2 P5.3可抑制饮食诱导的胰岛素抵抗 | 第47-52页 |
5 总结讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-66页 |
附录 缩略词表 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |