| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略语 | 第11-14页 |
| 第一部分：构建和优化表达HIV特异性抗体的乳酸杆菌递呈系统 | 第14-31页 |
| 1 前言 | 第14-17页 |
| 2 材料和方法 | 第17-24页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第17-19页 |
| 2.2 仪器和耗材 | 第19页 |
| 2.3 方法 | 第19-24页 |
| 2.3.1 细菌培养条件 | 第19页 |
| 2.3.2 构建双抗性筛选的乳酸杆菌表达质粒 | 第19-21页 |
| 2.3.3 构建同源启动子和信号肽的乳酸杆菌表达质粒 | 第21-22页 |
| 2.3.4 构建含HIV各单链抗体基因的乳酸杆菌高效表达质粒 | 第22-23页 |
| 2.3.5 电转化乳酸杆菌并筛选表达HIV单链抗体的重组乳酸杆菌 | 第23-24页 |
| 3 结果 | 第24-27页 |
| 3.1 构建双抗性乳酸杆菌表达质粒plp0373_Amy A（Em/Amp） | 第24-25页 |
| 3.2 构建同源启动子和同源信号肽的乳酸杆菌表达质粒 | 第25-26页 |
| 3.3 构建表达HIV-1 单链抗体的乳酸杆菌质粒 | 第26-27页 |
| 3.4 筛选阳性重组菌 | 第27页 |
| 4 讨论 | 第27-30页 |
| 5 结论 | 第30-31页 |
| 第二部分：鉴定重组菌分泌单链抗体的表型和抗病毒活性 | 第31-42页 |
| 1 前言 | 第31-32页 |
| 2 材料和方法 | 第32-36页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第32-33页 |
| 2.2 仪器和耗材 | 第33页 |
| 2.3 方法 | 第33-36页 |
| 2.3.1 重组菌分泌上清的浓缩、纯化和BCA蛋白定量检测 | 第33-34页 |
| 2.3.2 ELISA检测HIV单链抗体的特异性 | 第34-35页 |
| 2.3.3 Western Blot检测上清中HIV特异性单链抗体 | 第35页 |
| 2.3.4 检测分泌上清对假病毒的中和能力 | 第35-36页 |
| 2.3.5 检测重组菌生长状况 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-40页 |
| 3.1 ELISA检测重组菌上清中分泌的各单链抗体与HIV-1 包膜蛋白及CD4分子结合情况 | 第36-37页 |
| 3.2 Western Blot鉴定重组菌表达的各单链抗体 | 第37-38页 |
| 3.3 假病毒中和实验检测重组菌分泌上清的抗病毒能力 | 第38-39页 |
| 3.4 重组菌与野生菌生长状况比较分析 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 第三部分：评价重组菌作为HIV抗体递呈活载体的安全性和稳定性 | 第42-49页 |
| 1 前言 | 第42页 |
| 2 材料和方法 | 第42-44页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第42-43页 |
| 2.2 方法 | 第43-44页 |
| 2.2.1 FHC细胞的复苏、培养与传代 | 第43页 |
| 2.2.2 乳酸杆菌黏膜定植能力、细胞凋亡和细胞因子检测 | 第43-44页 |
| 3 结果 | 第44-47页 |
| 3.1 比较野生菌和重组菌在直肠黏膜上的定植能力 | 第44页 |
| 3.2 乳酸杆菌定植黏膜后诱导细胞凋亡情况 | 第44-45页 |
| 3.3 乳酸杆菌定植黏膜后上皮细胞分泌细胞因子的水平 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 综述 | 第58-69页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 个人简介 | 第72页 |
