摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-20页 |
1.1 植物非生物胁迫和信号转导 | 第14页 |
1.2 蛋白激酶与信号传导 | 第14-15页 |
1.3 植物MAPK级联途径 | 第15-17页 |
1.4 植物MAPK级联途径的功能 | 第17-20页 |
1.4.1 MAPK与植物激素信号传递 | 第18页 |
1.4.2 MAPK与干旱、高盐、高温和低温胁迫信号传递 | 第18-19页 |
1.4.3 MAPK与植物病原信号传递 | 第19页 |
1.4.4 桑树抗性基因相关研究 | 第19-20页 |
第二章 引言 | 第20-24页 |
2.1 研究背景及意义 | 第20页 |
2.2 主要研究内容 | 第20-22页 |
2.3 技术路线 | 第22-24页 |
第三章 川桑MAPK基因家族生物信息学分析和克隆 | 第24-40页 |
3.1 材料和试剂 | 第24-26页 |
3.1.1 实验材料 | 第24页 |
3.1.2 主要试剂 | 第24页 |
3.1.3 主要试剂和缓冲液配方 | 第24-25页 |
3.1.4 主要仪器 | 第25-26页 |
3.2 方法 | 第26-31页 |
3.2.1 川桑MAPK家族蛋白序列的获得 | 第26页 |
3.2.2 RNA的提取与检测 | 第26-27页 |
3.2.3 第一链cDNA的合成 | 第27-28页 |
3.2.4 川桑MAPK基因家族的克隆与序列鉴定 | 第28-31页 |
3.2.5 川桑MAPK基因家族的保守结构域和系统发育分析 | 第31页 |
3.3 结果与分析 | 第31-38页 |
3.3.1 川桑MAPK家族基因的分离与克隆鉴定 | 第31-36页 |
3.3.2 MnMAPK系统发育树和结构域分析 | 第36-38页 |
3.4 小结与讨论 | 第38-40页 |
第四章 桑树MAPK基因非生物胁迫诱导表达分析 | 第40-48页 |
4.1 材料和试剂仪器 | 第40-41页 |
4.1.1 实验材料 | 第40页 |
4.1.2 主要试剂 | 第40页 |
4.1.3 主要仪器 | 第40-41页 |
4.2 实验方法 | 第41-42页 |
4.2.1 桑树幼苗的培养和胁迫处理 | 第41页 |
4.2.2 RNA的提取与检测 | 第41页 |
4.2.3 cDNA第一链的合成 | 第41页 |
4.2.4 桑树MAPK基因定量引物设计 | 第41-42页 |
4.2.5 桑树MAPK基因荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第42页 |
4.3 结果与分析 | 第42-46页 |
4.3.1 桑树MAPK基因胁迫诱导表达分析 | 第42-46页 |
4.4 小结与讨论 | 第46-48页 |
第五章 川桑MnMAPK6基因亚细胞定位与遗传转化 | 第48-76页 |
5.1 实验材料和试剂 | 第48-52页 |
5.1.1 实验材料 | 第48页 |
5.1.2 主要试剂 | 第48-49页 |
5.1.3 主要试剂和缓冲液配方 | 第49-52页 |
5.1.4 主要仪器 | 第52页 |
5.2 方法 | 第52-62页 |
5.2.1 桑树幼苗的培养和胁迫诱导处理 | 第52-53页 |
5.2.2 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第53页 |
5.2.3 MnMAPK6亚细胞定位载体构建洋葱表皮亚细胞定位 | 第53-56页 |
5.2.4 洋葱表皮亚细胞定位瞬时表达转化 | 第56-57页 |
5.2.5 植物超量表达载体的构建 | 第57-58页 |
5.2.6 农杆菌介导浸花法转化拟南芥 | 第58-59页 |
5.2.7 转基因拟南芥鉴定 | 第59-61页 |
5.2.8 转基因拟南芥非生物胁迫处理 | 第61-62页 |
5.3 结果与分析 | 第62-74页 |
5.3.1 MnMAPK6在桑树中的胁迫表达分析 | 第62-65页 |
5.3.2 MnMAPK6亚细胞定位 | 第65页 |
5.3.3 MnMAPK6植物转基因载体的构建 | 第65-66页 |
5.3.4 MnMAPK6转基因拟南芥的获得与鉴定 | 第66-68页 |
5.3.5 MnMAPK6转基因植株对非生物胁迫的响应情况 | 第68-74页 |
5.4 小结与讨论 | 第74-76页 |
第六章 综合与讨论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-84页 |
附录 | 第84-86页 |
在读期间发表论文及参研课题 | 第86-88页 |
致谢 | 第88页 |