| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-33页 |
| 1.1 胞浆脂滴与乳脂 | 第13-24页 |
| 1.1.1 脂滴的发现与研究历史 | 第13-14页 |
| 1.1.2 脂滴的大小、数量与结构 | 第14-15页 |
| 1.1.3 脂滴在细胞中的功能 | 第15-16页 |
| 1.1.4 脂滴的形成与生长 | 第16-19页 |
| 1.1.5 脂滴的蛋白 | 第19-20页 |
| 1.1.6 脂滴与其他细胞器的相互作用 | 第20-21页 |
| 1.1.7 脂滴内脂质的动员 | 第21页 |
| 1.1.8 脂滴相关的生理和疾病 | 第21-23页 |
| 1.1.9 乳脂与山羊乳 | 第23-24页 |
| 1.2 脂肪分化相关蛋白(perilipin2/ADRP/ adipophilin)与脂质代谢 | 第24-29页 |
| 1.2.1 脂肪分化相关蛋白的发现及其组织分布 | 第24页 |
| 1.2.2 ADRP 在组织细胞中对脂质代谢的影响 | 第24-29页 |
| 1.3 脂肪分化相关蛋白基因的表达调控 | 第29-31页 |
| 1.3.1 转录水平的调节 | 第29-30页 |
| 1.3.2 转录后水平的调节 | 第30-31页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第31-33页 |
| 第二章 奶山羊 ADRP 基因重组腺病毒载体的构建及鉴定 | 第33-48页 |
| 引言 | 第33页 |
| 2.1 材料与方法 | 第33-41页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第33页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第33-34页 |
| 2.1.3 pAdTrack-CMV-ADRP 腺病毒穿梭载体的构建与鉴定 | 第34-35页 |
| 2.1.4 pAdEasy-ADRP 重组腺病毒载体的构建与鉴定 | 第35-36页 |
| 2.1.5 重组腺病毒的包装与扩增 | 第36-38页 |
| 2.1.6 腺病毒滴度的测定 | 第38页 |
| 2.1.7 重组腺病毒感染乳腺上皮细胞最佳 MOI 值（最佳感染复数）的确定 | 第38-39页 |
| 2.1.8 重组腺病毒对奶山羊 ADRP 基因过表达和沉默效果检测 | 第39-41页 |
| 2.2 结果与分析 | 第41-45页 |
| 2.2.1 pAdTrack-CMV-ADRP 穿梭载体的构建与鉴定 | 第41页 |
| 2.2.2 pAdEasy-ADRP 重组腺病毒载体的构建与鉴定 | 第41页 |
| 2.2.3 Ad-ADRP 过表达腺病毒载体的包装、扩增与病毒滴度测定 | 第41-43页 |
| 2.2.4 腺病毒感染乳腺上皮细胞最佳 MOI 值的确定 | 第43页 |
| 2.2.5 重组腺病毒对奶山羊 ADRP 基因过表达和沉默效果检测 | 第43-45页 |
| 2.3 讨论 | 第45-47页 |
| 2.3.1 关于重组腺病毒载体的构建和病毒包装 | 第45-46页 |
| 2.3.2 关于基因过表达和沉默效率的检测 | 第46-47页 |
| 2.4 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 奶山羊 ADRP 基因对 GMEC 脂质含量和脂滴的影响 | 第48-62页 |
| 引言 | 第48页 |
| 3.1 材料与方法 | 第48-51页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第48页 |
| 3.1.2 主要实验仪器 | 第48页 |
| 3.1.3 油红 O 染色检测 ADRP 对 GMEC 脂滴生成和脂解的影响 | 第48-49页 |
| 3.1.4 GPO-Trider 法和铜试剂皂化法检测 ADRP 对细胞细胞内甘油三酯、总胆固醇和游离脂肪酸的含量的影响 | 第49-50页 |
| 3.1.5 气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术检测 ADRP 对细胞长链脂肪酸成分和外源油酸摄取的影响 | 第50页 |
| 3.1.6 激光共聚焦显微镜检测 ADRP 对细胞脂滴的影响 | 第50-51页 |
| 3.1.7 透射电子显微镜（TEM）检测 ADRP 对细胞中脂滴形态学的影响 | 第51页 |
| 3.2 结果与分析 | 第51-59页 |
| 3.2.1 ADRP 基因对乳腺上皮细胞脂滴生成的影响 | 第51-53页 |
| 3.2.2 ADRP 基因对乳腺上皮细胞脂质含量的影响 | 第53-54页 |
| 3.2.3 ADRP 基因对乳腺上皮细胞脂肪酸组成和外源油酸摄取的影响 | 第54页 |
| 3.2.4 ADRP 基因对乳腺上皮细胞 ATGL 介导的脂解的影响 | 第54-55页 |
| 3.2.5 ADRP 基因对乳腺上皮细胞内脂滴的形态学影响 | 第55-59页 |
| 3.3 讨论 | 第59-61页 |
| 3.3.1 关于 ADRP 基因对乳腺上皮细胞脂质积累的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.2 关于 ADRP 对乳腺上皮细胞脂滴大小和分泌的影响 | 第60-61页 |
| 3.4 小结 | 第61-62页 |
| 第四章 奶山羊 ADRP 基因的转录调控研究 | 第62-73页 |
| 引言 | 第62页 |
| 4.1 材料与方法 | 第62-66页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第62-63页 |
| 4.1.2 主要实验仪器 | 第63页 |
| 4.1.3 PPARG 及其激动剂对奶山羊 ADRP 基因表达的影响 | 第63页 |
| 4.1.4 奶山羊 ADRP 基因启动子的克隆与转录因子结合位点预测 | 第63-64页 |
| 4.1.5 双荧光素酶报告基因试验检测奶山羊 ADRP 基因启动子活性 | 第64-66页 |
| 4.1.6 凝胶电泳迁移试验（EMSA）检测 PPARG 与 ADRP 基因启动子 PPRE 的体外结合情况 | 第66页 |
| 4.2 结果与分析 | 第66-71页 |
| 4.2.1 PPARG 及其激动剂对 ADRP 基因表达的影响 | 第66-67页 |
| 4.2.2 ADRP 基因启动子的克隆与转录因子结合位点预测 | 第67-68页 |
| 4.2.3 奶山羊 ADRP 基因启动子活性的鉴定及 PPARG 对启动子活性的影响 | 第68-69页 |
| 4.2.4 PPRE 位点定点突变和缺失对 PPARG 诱导的 ADRP 基因启动子活性的影响 | 第69-70页 |
| 4.2.5 凝胶电泳迁移试验（EMSA）检测 PPARG 与 PPRE 体外结合情况 | 第70-71页 |
| 4.3 讨论 | 第71-72页 |
| 4.4 小结 | 第72-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-86页 |
| 附录 | 第86-98页 |
| 附录 1 | 第86-87页 |
| 附录 2 | 第87-88页 |
| 附录 3 | 第88-89页 |
| 附录 4 | 第89-90页 |
| 附录 5 | 第90-91页 |
| 附录 6 | 第91-93页 |
| 附录 7 | 第93-94页 |
| 附录 8 | 第94-95页 |
| 附录 9 | 第95-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 作者简介 | 第99页 |
