摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
中英文名词对照 | 第10-11页 |
引言 | 第11-14页 |
第1章 构建表达目的基因的重组细胞 | 第14-28页 |
1.1 材料 | 第14-15页 |
1.1.1 仪器与设备 | 第14-15页 |
1.1.2 材料与试剂 | 第15页 |
1.2 实验方法 | 第15-23页 |
1.2.1 溶液的配制与储存 | 第15-16页 |
1.2.2 重组质粒的构建 | 第16-17页 |
1.2.3 重组慢病毒的包装与转染 | 第17-18页 |
1.2.4 鉴定稳定表达ABCC2-1249G细胞株和ABCC2-1249A细胞株 | 第18-23页 |
1.2.5 数据统计方法 | 第23页 |
1.3 实验结果 | 第23-27页 |
1.3.1 重组慢病毒质粒的鉴定 | 第23-24页 |
1.3.2 重组质粒mRNA表达水平的检测 | 第24-25页 |
1.3.3 Western blot检测ABCC2蛋白表达水平 | 第25-26页 |
1.3.4 流式细胞实验验证不同组细胞中MRP-2的表达 | 第26-27页 |
1.4 讨论 | 第27-28页 |
第2章 索拉菲尼对重组细胞的毒性考察 | 第28-32页 |
2.1 材料 | 第28页 |
2.1.1 仪器与设备 | 第28页 |
2.1.2 材料与试剂 | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-29页 |
2.2.1 接种培养细胞 | 第29页 |
2.2.2 加药孵育 | 第29页 |
2.2.3 加入cck-8试剂,检测吸光度 | 第29页 |
2.2.4 计算各药物的半数抑制率IC_(50) | 第29页 |
2.3 实验结果 | 第29-30页 |
2.4 讨论 | 第30-32页 |
第3章 索拉菲尼在不同基因型ABCC2细胞中转运差异 | 第32-39页 |
3.1 材料 | 第32-33页 |
3.1.1 仪器与设备 | 第32页 |
3.1.2 材料与试剂 | 第32-33页 |
3.2 实验方法 | 第33-34页 |
3.2.1 索拉菲尼在不同组实验细胞内的累积 | 第33页 |
3.2.2 索拉菲尼在不同组实验细胞的排放效率 | 第33-34页 |
3.2.3 索拉菲尼的萃取 | 第34页 |
3.2.4 高效液相色谱法测定索拉菲尼的含量 | 第34页 |
3.2.5 数据的统计和分析 | 第34页 |
3.3 实验结果 | 第34-37页 |
3.3.1 索拉菲尼的HPLC方法学评价 | 第34-36页 |
3.3.2 索拉菲尼在不同细胞中的累积和排放结果 | 第36-37页 |
3.4 讨论 | 第37-39页 |
第4章 转运蛋白的ATPase活性测定 | 第39-43页 |
4.1 材料 | 第39-40页 |
4.1.1 仪器与设备 | 第39页 |
4.1.2 材料与试剂 | 第39-40页 |
4.2 实验方法 | 第40-41页 |
4.2.1 活性膜蛋白提取 | 第40页 |
4.2.2 膜蛋白浓度测定 | 第40页 |
4.2.3 转运蛋白ATPase活性测定 | 第40-41页 |
4.3 实验结果 | 第41页 |
4.4 讨论 | 第41-43页 |
全文小结 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
综述 | 第48-56页 |
参考文献 | 第53-56页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |