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ABCC2(1249G>A)基因多态性对索拉菲尼转运的影响及分子机制研究

摘要第7-8页
Abstract第8-9页
中英文名词对照第10-11页
引言第11-14页
第1章 构建表达目的基因的重组细胞第14-28页
    1.1 材料第14-15页
        1.1.1 仪器与设备第14-15页
        1.1.2 材料与试剂第15页
    1.2 实验方法第15-23页
        1.2.1 溶液的配制与储存第15-16页
        1.2.2 重组质粒的构建第16-17页
        1.2.3 重组慢病毒的包装与转染第17-18页
        1.2.4 鉴定稳定表达ABCC2-1249G细胞株和ABCC2-1249A细胞株第18-23页
        1.2.5 数据统计方法第23页
    1.3 实验结果第23-27页
        1.3.1 重组慢病毒质粒的鉴定第23-24页
        1.3.2 重组质粒mRNA表达水平的检测第24-25页
        1.3.3 Western blot检测ABCC2蛋白表达水平第25-26页
        1.3.4 流式细胞实验验证不同组细胞中MRP-2的表达第26-27页
    1.4 讨论第27-28页
第2章 索拉菲尼对重组细胞的毒性考察第28-32页
    2.1 材料第28页
        2.1.1 仪器与设备第28页
        2.1.2 材料与试剂第28页
    2.2 实验方法第28-29页
        2.2.1 接种培养细胞第29页
        2.2.2 加药孵育第29页
        2.2.3 加入cck-8试剂,检测吸光度第29页
        2.2.4 计算各药物的半数抑制率IC_(50)第29页
    2.3 实验结果第29-30页
    2.4 讨论第30-32页
第3章 索拉菲尼在不同基因型ABCC2细胞中转运差异第32-39页
    3.1 材料第32-33页
        3.1.1 仪器与设备第32页
        3.1.2 材料与试剂第32-33页
    3.2 实验方法第33-34页
        3.2.1 索拉菲尼在不同组实验细胞内的累积第33页
        3.2.2 索拉菲尼在不同组实验细胞的排放效率第33-34页
        3.2.3 索拉菲尼的萃取第34页
        3.2.4 高效液相色谱法测定索拉菲尼的含量第34页
        3.2.5 数据的统计和分析第34页
    3.3 实验结果第34-37页
        3.3.1 索拉菲尼的HPLC方法学评价第34-36页
        3.3.2 索拉菲尼在不同细胞中的累积和排放结果第36-37页
    3.4 讨论第37-39页
第4章 转运蛋白的ATPase活性测定第39-43页
    4.1 材料第39-40页
        4.1.1 仪器与设备第39页
        4.1.2 材料与试剂第39-40页
    4.2 实验方法第40-41页
        4.2.1 活性膜蛋白提取第40页
        4.2.2 膜蛋白浓度测定第40页
        4.2.3 转运蛋白ATPase活性测定第40-41页
    4.3 实验结果第41页
    4.4 讨论第41-43页
全文小结第43-44页
参考文献第44-48页
综述第48-56页
    参考文献第53-56页
攻读硕士期间发表论文第56-57页
致谢第57页

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