摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第1章 引言 | 第10-24页 |
1.1 丹参研究现状 | 第10-13页 |
1.1.1 丹参的化学成分 | 第10-11页 |
1.1.2 丹参生物技术研究现状 | 第11-12页 |
1.1.3 丹参功能基因的研究 | 第12-13页 |
1.2 迷迭香酸合成途径研究现状 | 第13-20页 |
1.2.1 迷迭香酸生物合成途径研究概况 | 第13-16页 |
1.2.2 迷迭香酸生物合成途径相关酶基因研究现状 | 第16-20页 |
1.3 RNAi在植物研究中的应用 | 第20-22页 |
1.4 本研究的目的意义 | 第22-24页 |
第2章 丹参迷迭香酸合成相关基因的克隆及序列分析 | 第24-54页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第24-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-36页 |
2.2.1 丹参迷迭香酸合成相关基因的克隆 | 第26-34页 |
2.2.2 丹参RAS-like基因及MYB4基因的序列分析 | 第34-35页 |
2.2.3 丹参RAS-like基因及MYB4基因的表达分析 | 第35-36页 |
2.3 实验结果及分析 | 第36-54页 |
2.3.1 丹参RAS-like基因的克隆及序列分析 | 第37-44页 |
2.3.2 丹参MYB4基因的克隆及序列分析 | 第44-54页 |
第3章 迷迭香酸合成相关基因表达与水溶性成分积累的关系 | 第54-78页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第54页 |
3.2 实验方法 | 第54-58页 |
3.2.1 丹参迷迭香酸合成相关酶基因5’侧翼序列的克隆及分析 | 第54-55页 |
3.2.2 丹参迷迭香酸合成相关酶基因的表达分析 | 第55-56页 |
3.2.3 丹参水溶性活性成分的测定 | 第56-57页 |
3.2.4 数据分析 | 第57-58页 |
3.3 实验结果及分析 | 第58-78页 |
3.3.1 丹参迷迭香酸合成相关酶基因5’侧翼序列的克隆及分析 | 第58-71页 |
3.3.2 丹参迷迭香酸合成相关酶基因的表达分析 | 第71-74页 |
3.3.3 丹参迷迭香酸及丹酚酸B含量的测定 | 第74-75页 |
3.3.4 水溶性活性成分含量与迷迭香酸合成相关酶基因表达的相关性分析 | 第75-78页 |
第4章 丹参迷迭香酸生物合成相关基因的功能分析 | 第78-100页 |
4.1 实验材料与试剂 | 第78-79页 |
4.2 实验方法 | 第79-88页 |
4.2.1 丹参迷迭香酸生物合成相关基因RNAi载体的构建 | 第79-83页 |
4.2.2 RNAi载体的转化 | 第83页 |
4.2.3 RNAi植株的分子鉴定 | 第83-86页 |
4.2.4 总酚含量的测定 | 第86-87页 |
4.2.5 总黄酮含量测定 | 第87页 |
4.2.6 抗氧化活性测定 | 第87页 |
4.2.7 丹参水溶性活性化合物含量测定 | 第87-88页 |
4.2.8 数据分析 | 第88页 |
4.3 实验结果及分析 | 第88-100页 |
4.3.1 RNAi载体的构建及抗性芽的获得 | 第88页 |
4.3.2 转基因植株的分子检测 | 第88-93页 |
4.3.3 总酚及总黄酮含量的测定 | 第93-95页 |
4.3.4 抗氧化活性测定 | 第95-96页 |
4.3.5 HPLC分析 | 第96-100页 |
第5章 讨论 | 第100-108页 |
5.1 丹参MYB4可能作为基因的负调控因子发挥作用 | 第100-101页 |
5.2 丹参RAS-like基因可能作为迷迭香酸合酶基因参与迷迭香酸的合成 | 第101-102页 |
5.3 光照、MeJA、ABA、MYB转录因子可以同时调节迷迭香酸途径相关酶基因的表达影响迷迭香酸的积累 | 第102-103页 |
5.4 迷迭香酸途径相关酶基因的表达存在相互影响 | 第103-104页 |
5.5 酪氨酸代谢途径在丹参酸酸类物质和黄酮类化合物的合成过程中起重要作用 | 第104-105页 |
5.6 丹参迷迭香酸合成关键基因的蹄选 | 第105-108页 |
结论 | 第108-112页 |
参考文献 | 第112-126页 |
致谢 | 第126-128页 |
攻读博士学位期间科研成果 | 第128页 |