| 中文摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略语 | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-17页 |
| 1 结核病 | 第9-11页 |
| 1.1 流行病学 | 第9页 |
| 1.2 传染 | 第9-10页 |
| 1.3 传染 | 第10页 |
| 1.4 肺结核治疗 | 第10-11页 |
| 2 结核分枝杆菌 | 第11-12页 |
| 2.1 生理学 | 第11-12页 |
| 2.2 基因组 | 第12页 |
| 3 Lsr2 | 第12-16页 |
| 4 课题研究的目的意义与目标 | 第16页 |
| 5 课题研究主要内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-29页 |
| 1 试验材料 | 第17-22页 |
| 1.1 供试菌株 | 第17页 |
| 1.2 实验引物 | 第17页 |
| 1.3 供试质粒 | 第17-18页 |
| 1.4 供试抗生素 | 第18页 |
| 1.5 培养基 | 第18-19页 |
| 1.5.1 LB(Luria-Bertani)培养基 | 第18-19页 |
| 1.5.2 细菌双杂交筛选培养基 | 第19页 |
| 1.5.3 7H9培养基 | 第19页 |
| 1.6 试剂、缓冲液配制 | 第19-22页 |
| 1.6.1 TEN缓冲液 | 第20页 |
| 1.6.2 5×TBE缓冲液 | 第20页 |
| 1.6.3 Ni~(2+)亲和纯化缓冲液 | 第20页 |
| 1.6.4 GST亲和纯化缓冲液 | 第20-21页 |
| 1.6.5 Western blotting缓冲液 | 第21页 |
| 1.6.6 双杂交培养基用试剂 | 第21-22页 |
| 1.6.7 免疫共沉淀实验缓冲液 | 第22页 |
| 1.7 酶、Markers和其他材料 | 第22页 |
| 2 方法 | 第22-29页 |
| 2.1 分子生物学基本操作 | 第22-23页 |
| 2.2 细菌双杂交实验 | 第23-24页 |
| 2.2.1 双杂交筛选培养基的配制 | 第23页 |
| 2.2.2 细菌双杂交质粒的构建 | 第23页 |
| 2.2.3 互作筛选 | 第23-24页 |
| 2.3 融合蛋白的亲和纯化 | 第24-25页 |
| 2.3.1 表达质粒的构建与转化 | 第24页 |
| 2.3.2 诱导表达、纯化、透析 | 第24-25页 |
| 2.3.3 Bradford测定蛋白质浓度 | 第25页 |
| 2.4 大分子相互作用检测 | 第25-27页 |
| 2.4.1 蛋白Pull-Down | 第25-26页 |
| 2.4.2 Western blotting检测 | 第26页 |
| 2.4.3 免疫共沉淀检测 | 第26-27页 |
| 2.4.4 质粒DNA松弛超螺旋测定 | 第27页 |
| 2.4.5 琼脂糖凝胶阻滞迁移分析(EMSA) | 第27页 |
| 2.5 随机突变 | 第27-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-45页 |
| 1 细菌双杂交筛库与蛋白相互作用分析 | 第29-34页 |
| 1.1 细菌双杂交筛库结果 | 第29-30页 |
| 1.2 筛选结果及分析 | 第30-31页 |
| 1.3 Rv2250A,Rv2251,Rv3463, Rv3597c基因的克隆 | 第31-32页 |
| 1.4 M.tb蛋白相互作用的双杂交验证 | 第32-34页 |
| 2 M.tb Lsr2蛋白相互作用研究 | 第34-37页 |
| 2.1 松弛螺旋酶作用研究 | 第34-35页 |
| 2.2 琼脂糖凝胶迁移实验研究 | 第35-36页 |
| 2.3 Pull-down实验 | 第36-37页 |
| 3 M.sm Lsr2蛋白相互作用研究 | 第37-45页 |
| 3.1 MSMEG_1514, MSMEG_4334, MSMEG_6092基因的克隆 | 第37-38页 |
| 3.2 细菌双杂交验证 | 第38-40页 |
| 3.3 松弛螺旋酶作用研究 | 第40-41页 |
| 3.4 免疫共沉淀 | 第41-42页 |
| 3.4 随机突变 | 第42-45页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第45-47页 |
| 1 总结 | 第45页 |
| 2 讨论 | 第45-46页 |
| 2.1 相互作用蛋白对Lsr2功能的影响 | 第45-46页 |
| 2.2 Rv2250A&Rv2251黄素蛋白 | 第46页 |
| 2.3 Rv3463是一个未知蛋白 | 第46页 |
| 3 研究展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
