| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第10-24页 |
| 1.1 细菌的群体感应概述 | 第10-18页 |
| 1.1.1 细菌群体感应的分类 | 第10-15页 |
| 1.1.2 细菌群体感应机制与致病菌致病力 | 第15-18页 |
| 1.2 AI-2 的研究进展 | 第18-23页 |
| 1.2.1 AI-2 的生物合成 | 第19-20页 |
| 1.2.2 AI-2 的生物学功能 | 第20-21页 |
| 1.2.3 AI-2 代谢过程 | 第21-23页 |
| 1.3 本课题的研究内容及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 菌种的鉴定检测和DPD的合成 | 第24-39页 |
| 2.1 材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 培养基、菌株 | 第24页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 Biolog法鉴定菌种 | 第25-26页 |
| 2.2.2 菌种165 RNA鉴定 | 第26-28页 |
| 2.2.3 AI-2 及DPD生物检测方法 | 第28-29页 |
| 2.2.4 化学合成DPD | 第29-30页 |
| 2.2.5 DPD的衍生化与HPLC检测 | 第30-31页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第31-38页 |
| 2.3.1 菌种鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.2 SM1 生长过程中AI-2 的浓度变化 | 第32-33页 |
| 2.3.3 DPD的检测 | 第33-38页 |
| 2.4 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 SM1 中lsrK基因的扩增及克隆 | 第39-62页 |
| 3.1 材料 | 第39-40页 |
| 3.1.1 实验用菌株及质粒 | 第39页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第39-40页 |
| 3.2 方法 | 第40-52页 |
| 3.2.1 PCR扩增lsrK基因保守区域 | 第40页 |
| 3.2.2 通过两步法半随机PCR扩增完整的lsrK基因序列 | 第40-45页 |
| 3.2.3 构建lsrK基因过表达质粒pGEX-OlsrK | 第45-48页 |
| 3.2.4 构建lsrK过表达菌株SM1-pGEX-OlsrK | 第48-49页 |
| 3.2.5 选择lsrK突变株的抗性片段 | 第49页 |
| 3.2.6 构建打靶片段 | 第49-51页 |
| 3.2.7 制备含有重组质粒的SM1 电转化感受态细胞 | 第51-52页 |
| 3.2.8 打靶敲除SM1 基因组中lsrK基因 | 第52页 |
| 3.2.9 lsrK基因突变株SM1-lsrK-Gm的筛选与验证 | 第52页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第52-61页 |
| 3.3.1 PCR扩增lsrK基因保守区域 | 第52-53页 |
| 3.3.2 lsrK保守区序列分析 | 第53页 |
| 3.3.3 两步法半随机PCR扩增lsrK基因非保守区域 | 第53-54页 |
| 3.3.4 lsrK基因非保守区域序列分析 | 第54页 |
| 3.3.5 PCR扩增SM1 中完整的lsrK基因 | 第54-55页 |
| 3.3.6 过表达质粒pGEX-OlsrK及过表达菌株的构建 | 第55-56页 |
| 3.3.7 抗性片段的筛选 | 第56-57页 |
| 3.3.8 打靶片段的构建 | 第57-60页 |
| 3.3.9 突变株验证 | 第60-61页 |
| 3.4 小结 | 第61-62页 |
| 第四章 SM1 中lsrK基因对DPD的降解影响研究 | 第62-68页 |
| 4.1 材料 | 第62-63页 |
| 4.1.1 菌株 | 第62页 |
| 4.1.2 培养基 | 第62-63页 |
| 4.2 方法 | 第63-64页 |
| 4.2.1 菌株生长曲线的测定 | 第63页 |
| 4.2.2 菌株生长过程中AI-2 浓度的变化 | 第63页 |
| 4.2.3 饥饿细胞的制备 | 第63页 |
| 4.2.4 菌株对DPD的降解 | 第63-64页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第64-67页 |
| 4.3.1 菌株生长过程中AI-2 浓度的变化 | 第64-65页 |
| 4.3.2 菌株对DPD的降解情况 | 第65-67页 |
| 4.4 小结 | 第67-68页 |
| 第五章 总结与展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 附录 肠道沙门氏菌SM1 中lsrK基因测序结果 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
