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miR-21在宫颈鳞癌患者血清中的表达及对宫颈癌SiHa细胞生物学特性影响的研究

英文缩略词表第7-8页
摘要第8-11页
ABSTRACT第11-15页
第一章 综述:miRNA和宫颈癌的关系及其研究进展第16-51页
    1 miRNA的概述第16-28页
        1.1 miRNA的定义与产生第16-17页
        1.2 miRNA的作用机制第17-18页
        1.3 mRNA的特点第18-20页
            1.3.1 miRNA的高度保守性第19页
            1.3.2 miRNA的时序表达特异性第19页
            1.3.3 miRNA的组织表达特异性第19-20页
        1.4 miRNA的生物学功能第20页
        1.5 miRNA在恶性肿瘤中的作用第20-24页
            1.5.1 miRNA调控肿瘤细胞的凋亡第20-22页
            1.5.2 miRNA调控肿瘤细胞的增殖第22-23页
            1.5.3 miRNA调控肿瘤细胞的分化与发育第23页
            1.5.4 miRNA调控肿瘤细胞的侵袭与转移第23-24页
        1.6 miRNA的检测技术第24-26页
        1.7 miRNA在血液中的稳定性第26-28页
    2 miRNA与宫颈癌的相关研究第28-32页
    3 宫颈癌淋巴结转移的诊断及治疗进展第32-40页
        3.1 宫颈癌淋巴结转移的特点第32页
        3.2 宫颈癌淋巴结转移的高危因素第32-33页
        3.3 宫颈癌淋巴结转移的检查方法第33-37页
        3.4 宫颈癌淋巴结转移的治疗第37-40页
            3.4.1 手术治疗第37-38页
            3.4.2 非手术治疗第38-40页
    参考文献第40-51页
第二章 :miR-21在宫颈鳞癌淋巴结转移患者血清中的表达及其临床意第51-72页
    1 材料与方法第51-53页
        1.1 材料第51-53页
            1.1.1 基本资料第51页
            1.1.2 实验仪器第51-52页
            1.1.3 实验试剂第52页
            1.1.4 实验用具的处理第52-53页
    2 实验方法第53-63页
        2.1 血液样本的处理第53页
        2.2 清中miRNA的提取第53-54页
        2.3 实验步骤第54-55页
        2.4 miRNA的定量及纯度测定第55页
        2.5 琼脂糖凝胶电泳第55-57页
            2.5.1 电泳的基本原理第55-56页
            2.5.2 琼脂糖凝胶电泳有许多优点第56-57页
            2.5.3 试剂的配制第57页
            2.5.4 电泳步骤第57页
        2.6 逆转录反应合成cDNA第57-58页
            2.6.1 实验原理第57页
            2.6.2 实验步骤第57-58页
        2.7 荧光定量PCR第58-62页
            2.7.1 荧光定量PCR定义第58-59页
            2.7.2 荧光染料法第59页
            2.7.3 SYBR Green荧光染料法定量PCR的基本过程第59页
            2.7.4 SYBR Green Ⅰ的优点第59页
            2.7.5 SYBR Green Ⅰ的缺点第59页
            2.7.6 荧光定量PCR的几个基本概念第59-60页
            2.7.7 荧光定量PCR检测miRNA的原理第60-61页
            2.7.8 Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quatitation Assay步骤第61页
            2.7.9 实验方法第61-62页
        2.8 测序第62-63页
    3 数据分析第63页
    4 结果第63-68页
    5 讨论第68-71页
    6 小结第71-72页
第三章 :miR-21对宫颈鳞癌SiHa细胞生物学特性的影响第72-103页
    1 材料与方法第72-75页
        1.1 材料第72-73页
            1.1.1 细胞系第72页
            1.1.2 主要试剂第72-73页
            1.1.3 主要仪器第73页
        1.2 实验器材的处理第73-75页
    2 实验方法和步骤第75-82页
        2.1 细胞的复苏、换液、传代、冻存、计数第75-77页
        2.2 miR-21-mimic与miR-21-inhibitor转染宫颈癌SiHa细胞第77-81页
            2.2.1 转染实验原理第77-78页
            2.2.2 miR-21-mimic与miR-21-inhibitor的序列第78页
            2.2.3 实验步骤第78-80页
            2.2.4 转染12小时后用流式细胞仪检测转染效率第80页
            2.2.5 转染48h后的SiHa细胞提取miRNA的步骤第80-81页
        2.3 逆转录反应合成cDNA第81页
        2.4 荧光定量PCR第81-82页
    3 数据分析方法第82页
    4 miR-21对SiHa细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响第82-86页
        4.1 MTT增殖实验第82-84页
            4.1.1 MTT原理第82-83页
            4.1.2 MTT实验步骤第83-84页
        4.2 侵袭实验第84-85页
            4.2.1 实验原理第84-85页
            4.2.3 细胞侵袭实验步骤第85页
        4.3 迁移实验第85-86页
            4.3.1 细胞迁移实验步骤第85-86页
    5 统计分析第86页
    6 实验结果第86-99页
        6.1 细胞转染实验结果第86-93页
        6.2 MTT增殖实验结果第93-94页
        6.3 细胞迁移实验结果第94-96页
        6.4 细胞侵袭实验结果第96-99页
    7 讨论第99-101页
    8 小结第101-103页
参考文献第103-107页
致谢第107-108页
读硕士学位期间完成的论文第108页

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