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宿主限制因子APOBEC3F抑制HIV-1病毒相关机制的研究

中文摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略语表第10-12页
第一部分 HIV-1宿主限制因子APOBEC3F包装进入病毒颗粒机制以及与APOBEC3G相关比较第12-38页
    前言第12-16页
    实验材料第16-19页
        1. 细胞系第16页
        3. 细胞培养基和生化试剂第16-17页
        4. 试剂盒第17页
        5. 抗体第17页
        6. 质粒第17-18页
        7. 主要实验仪器第18-19页
    实验方法第19-21页
        1. 细胞培养及转染第19页
        2. 病毒或病毒类似颗粒的超速离心分离第19页
        3. 免疫印迹(Western Blot)第19-20页
        4. 免疫共沉淀(Co-IP)第20-21页
    实验结果第21-34页
        1. 病毒颗粒及类病毒颗粒VLPs的APOBEC3F包装第21-22页
        2. APOBEC3F与Gag及其截短突变体相互作用研究第22-24页
        3. APOBEC3F与Gag NC突变体作用研究第24-25页
        4. APOBEC3F突变体对包装进入病毒颗粒的影响第25-27页
        5. 细胞或病毒RNA在APOBEC3F/G包装过程中辅助作用研究第27-28页
        6. APOBEC3F和APOBEC3G病毒包装机制比较第28-30页
        7. Gag NC结构域突变体对APOBEC3F和APOBEC3G包装的影响第30-34页
    讨论第34-38页
第二部分 APOBEC3F与HIV-1逆转录酶相互作用的抗病毒机制研究第38-60页
    前言第38-42页
    实验材料第42-45页
        1. 细胞系第42页
        2. 常用试剂第42页
        4. 试剂盒第42-43页
        5. 抗体第43页
        6. 质粒第43页
        7. 主要实验仪器第43-45页
    实验方法第45-50页
        1. 质粒构建第45-46页
        2. 细胞培养及转染第46页
        3. 细胞基因组提取第46页
        4. 免疫印迹(Western Blot)第46页
        5. 定量PCR(realtime PCR)检测第46-48页
        6. HIV假型病毒的生产以及感染细胞第48页
        7. 病毒p24抗体的定量检测第48页
        8. 病毒感染性测定第48-49页
        9. 免疫共沉淀(Co-IP)第49-50页
    实验结果第50-58页
        1. 定量PCR分析APOBEC3F抑制HIV-1病毒复制第50-51页
        2. 逆转录酶与APOBEC3F相互作用的研究第51-52页
        3. 确定逆转录酶和APOBEC3F作用的关键区域第52-53页
        4. APOBEC3F与RT作用关键区域的确定第53-55页
        5. APOBEC3F与RT作用关键区域抑制HIV-1活性研究第55-57页
        6. 核酸分子对APOBEC3F与RT作用的影响第57-58页
    讨论第58-60页
第三部分 APOBEC3F与HIV-1 Vif相互作用研究第60-72页
    实验材料第61-64页
        1. 细胞系第61-62页
        2. 常用生化试剂第62页
        4. 试剂盒第62页
        5. 抗体第62-63页
        6. 质粒第63页
        7. 主要实验仪器第63-64页
    实验方法第64-66页
        1. 质粒构建第64-65页
        2. 细胞培养及转染第65页
        3. 免疫印迹(Western Blot)第65页
        4. 免疫共沉淀(Co-IP)第65-66页
    实验结果第66-71页
        1. APOBEC3F与Vif作用模拟结构建立及关键位点预测第66-68页
        2. APOBEC3F点突变抗Vif降解作用验证第68-69页
        3. APOBEC3F点突变与Vif相互作用分析第69-71页
    讨论第71-72页
参考文献第72-78页
宿主功能因子对丙型肝炎病毒感染作用研究进展第78-95页
    参考文献第86-95页
致谢第95-96页

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