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理想株型IPA1基因转化籼稻的分子育种研究

摘要第10-11页
Abstract第11-12页
第一章 前言第13-21页
    1.1 本项目的研究背景及立题依据第13页
    1.2 水稻理想株型的概念及其研究现状第13-15页
        1.2.1 理想株型概念的提出第14页
        1.2.2 影响水稻株型的因素第14-15页
        1.2.3 水稻株型的研究现状第15页
    1.3 国内外水稻抗倒伏性研究进展第15-19页
        1.3.1 株高与倒伏第16页
        1.3.2 茎秆性状与倒伏第16-19页
            1.3.2.1 茎秆的农艺性状与倒伏关系第16-17页
            1.3.2.2 茎秆解剖结构与倒伏关系第17-18页
            1.3.2.3 茎秆化学成分与倒伏关系第18-19页
    1.4 水稻愈伤组织快速诱导的研究第19-20页
    1.5 本研究的目的和意义第20-21页
第二章 实验材料与方法第21-33页
    2.1 实验材料第21页
        2.1.1 植物材料第21页
        2.1.2 质粒与菌株第21页
        2.1.3 主要试剂第21页
    2.2 实验方法第21-33页
        2.2.1 转基因水稻苗的产生第22-23页
            2.2.1.1 培养基第22页
            2.2.1.2 愈伤组织的诱导与继代第22页
            2.2.1.3 农杆菌介导的水稻遗传转化第22-23页
                2.2.1.3.1 菌株活化第22-23页
                2.2.1.3.2 农杆菌侵染第23页
                2.2.1.3.3 洗菌第23页
                2.2.1.3.4 抗性愈伤组织的筛选与分化第23页
                2.2.1.3.5 炼苗第23页
        2.2.2 转基因植株的分子鉴定第23-29页
            2.2.2.1 转基因植株后代的抗性筛选第23-24页
                2.2.2.1.1 PHIMES-Ubi-IPA1转化明恢86(T1代)PPT抗性筛选第24页
                2.2.2.1.2 EHA-1300-IPA1转化明恢86(T2代)Hyg抗性筛选第24页
            2.2.2.2 PCR检测第24-25页
                2.2.2.2.1 CTAB法微量提取转基因水稻总DNA第24页
                2.2.2.2.2 标记基因Hyg/Bar的PCR分析第24-25页
            2.2.2.3 RT-PCR检测第25-27页
                2.2.2.3.1 水稻组织(根、茎、叶)总RNA的提取第25-26页
                2.2.2.3.2 RT-PCR第26-27页
            2.2.2.4 Southern blotting检测第27-29页
                2.2.2.4.1 配制Southern杂交专用试剂第27页
                2.2.2.4.2 Southern blotting杂交第27-29页
        2.2.3 荧光定量PCR分析第29-31页
            2.2.3.1 IPA1基因在籼稻明恢86组织表达特异性分析第29-30页
                2.2.3.1.1 水稻幼苗的培养第29页
                2.2.3.1.2 幼苗的根、茎、叶RNA的提取第29页
                2.2.3.1.3 引物设计第29-30页
            2.2.3.2 荧光定量PCR反应第30页
            2.2.3.3 荧光定量PCR数据处理第30-31页
        2.2.4 PHIMES-Ubi-IPA1转化明恢86(T1代)转基因植株生理学指标测定第31-33页
            2.2.4.1 株高测定第31页
            2.2.4.2 分蘖数测定第31页
            2.2.4.3 节间长度测定第31页
            2.2.4.4 叶绿素含量测定第31页
            2.2.4.5 茎秆横切面电镜扫描第31页
            2.2.4.6 茎秆化学成分的测定第31-33页
                2.2.4.6.1 细胞壁组分含量的测定第31-32页
                2.2.4.6.2 钾元素含量测定第32页
                2.2.4.6.3 硅含量的测定第32-33页
第三章. 实验结果与分析第33-47页
    3.1 研究光照条件对水稻愈伤组织诱导的影响第33页
    3.2 IPA1基因的遗传转化第33-34页
    3.3 转基因植株的PCR检测第34-36页
        3.3.1 PHIMES-Ubi-IPA1转化明恢86(T0代)PCR检测第34-35页
        3.3.2 转基因植株中IPA1基因的RT-PCR分析第35-36页
        3.3.3 Southern blot杂交分析第36页
    3.4 转基因植株后代的抗性筛选结果第36-38页
        3.4.1 PHIMES-Ubi-IPAl转化明恢86(T1代)PPT抗性筛选结果第36-37页
        3.4.2 EHA-1300-IPA1转化明恢86(T2代)Hyg抗性筛选结果第37-38页
    3.5 Real-time PCR第38-40页
        3.5.1 IPA1基因在籼稻明恢86的组织表达特异性分析第38-40页
    3.6 转基因植株生理学指标测定第40-47页
        3.6.1 转基因植株株高和分蘖数的测定第40-41页
        3.6.3 转基因植株节间长度的测定第41-42页
        3.6.4 转基因植株叶绿素含量的测定第42页
        3.6.5 茎秆横切面电镜扫描第42-43页
        3.6.6 茎秆化学成分的测定第43-47页
            3.6.6.1 细胞壁组分含量的测定第43-44页
            3.6.6.2 钾元素含量测定第44-45页
            3.6.6.3 硅元素含量测定第45-47页
第四章 讨论第47-50页
    4.1 提高水稻抗倒性的策略第47-48页
        4.1.1 材料的选择第47页
        4.1.2 栽培条件和措施对水稻倒伏的影响第47-48页
            4.1.2.1 土壤环境第47页
            4.1.2.2 栽培密度第47-48页
            4.1.2.3 肥水管理第48页
            4.1.2.4 病虫害防治第48页
    4.2 分子标记辅助育种技术的应用第48-49页
    4.3 工作的延续性第49-50页
参考文献第50-56页
附录1第56-58页
附录2第58-60页
致谢第60页

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