摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第9-19页 |
第一节 蛋白多肽类药物 | 第9-14页 |
1.1.1 蛋白多肽类药物概念及种类 | 第9-10页 |
1.1.2 蛋白多肽类药物特点 | 第10页 |
1.1.3 发展蛋白多肽类药物的关键问题 | 第10-11页 |
1.1.4 蛋白多肽类药物的研究使用状况及展望 | 第11-14页 |
第二节 干扰素药物 | 第14-18页 |
1.2.1 干扰素药物作用机理 | 第14-15页 |
1.2.2 重组IFN效用的研究 | 第15-17页 |
1.2.3 重组干扰素的发展前景 | 第17-18页 |
第三节 本实验的目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 材料和方法 | 第19-27页 |
2.1 仪器与试剂 | 第19-21页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂、试剂盒 | 第19-20页 |
2.1.3 菌株 | 第20页 |
2.1.4 引物 | 第20-21页 |
2.2 相关软件 | 第21页 |
2.3 实验材料 | 第21页 |
2.4 实验方法 | 第21-27页 |
2.4.1 草鱼重组干扰素原核表达及纯化 | 第21-23页 |
2.4.2 RNA提取 | 第23-24页 |
2.4.3 反转录合成cDNA第一链 | 第24-25页 |
2.4.4 半定量RT-PCR检测草鱼干扰素系统基因的组织表达水平 | 第25页 |
2.4.5 荧光定量RT-PCR检测干扰素系统基因的组织表达水平 | 第25-27页 |
第三章 结果与分析 | 第27-35页 |
3.1 重组干扰素的体外表达和纯化 | 第27页 |
3.2 草鱼干扰素系统基因的组织表达(半定量RT-PCR检测) | 第27-32页 |
3.2.1 重组干扰素、Poly I:C注射诱导草鱼IFN的表达 | 第27-28页 |
3.2.2 重组干扰素、Poly I:C注射诱导草鱼1RF1的表达 | 第28页 |
3.2.3 重组干扰素、Poly I:C注射诱导草鱼IRF7的表达 | 第28-30页 |
3.2.4 重组干扰素、Poly I:C注射诱导草鱼STAT3的表达 | 第30页 |
3.2.5 重组干扰素、Poly I:C注射诱导草鱼MX1的表达 | 第30页 |
3.2.6 重组干扰素、Poly I:C注射诱导草鱼PKR的表达 | 第30-32页 |
3.2.7 重组干扰素拌料投喂诱导草鱼IFN的表达 | 第32页 |
3.3 荧光定量RT-PCR检测草鱼干扰素系统基因的组织表达水平 | 第32-35页 |
3.3.1 重组干扰素注射免疫后12h荧光定量检测干扰素系统基因组织表达情况 | 第32-33页 |
3.3.2 重组干扰素拌料投喂后12h荧光定量检测草鱼IFN的组织表达情况 | 第33-35页 |
第四章 讨论 | 第35-39页 |
4.1 鱼类干扰素系统基因的诱导表达 | 第35页 |
4.2 重组鱼类干扰素能够上调干扰素系统基因表达 | 第35-36页 |
4.3 重组干扰素在鱼类养殖中的应用前景和存在的问题 | 第36-39页 |
参考文献 | 第39-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
附录1:缩略语 | 第45-46页 |
附录2:攻读学位期间的研究成果 | 第46页 |