| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 水稻新型组织特异表达合成启动子的构建及顺式调控元件的筛选和功能分析 | 第14-41页 |
| 1 前言 | 第14-19页 |
| 1.1 合成生物学研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2 合成启动子研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3 顺式调控元件研究进展 | 第16-19页 |
| 2 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-27页 |
| 3.1 水稻材料 | 第20页 |
| 3.2 载体及菌株 | 第20页 |
| 3.3 组织特异表达合成启动子的构建 | 第20-22页 |
| 3.4 T_0代转基因植株的PCR阳性检测 | 第22-23页 |
| 3.5 GUS组织化学染色 | 第23页 |
| 3.6 GUS活性定量分析 | 第23-26页 |
| 3.7 绿色组织表达相关顺式调控元件的筛选 | 第26页 |
| 3.8 顺式调控元件侧翼序列的预测、功能鉴定和定点突变 | 第26-27页 |
| 4 结果与分析 | 第27-37页 |
| 4.1 获得五个新的绿色组织特异表达合成启动子 | 第27-30页 |
| 4.2 组织特异表达相关调控序列在合成启动子中的贡献 | 第30-31页 |
| 4.3 绿色组织表达相关顺式调控元件的筛选 | 第31-33页 |
| 4.4 GEAT侧翼序列分析、功能鉴定和突变试验 | 第33-37页 |
| 5 讨论 | 第37-41页 |
| 5.1 绿色组织特异表达合成启动子的设计原则 | 第37-38页 |
| 5.2 合成启动子GSSP3、GSSP5和GSSP2的应用前景 | 第38页 |
| 5.3 生物信息学方法寻找和预测顺式调控元件及其侧翼序列的可行性 | 第38-39页 |
| 5.4 合成启动子手段鉴定顺式调控元件及其侧翼序列的优势 | 第39-41页 |
| 第二章 水稻内源双向启动子的分离鉴定和功能分析 | 第41-57页 |
| 1 前言 | 第41-44页 |
| 1.1 双向启动子的结构特征 | 第41-42页 |
| 1.2 双向启动子与共表达 | 第42页 |
| 1.3 双向启动子的保守性 | 第42-43页 |
| 1.4 双向启动子的鉴定 | 第43页 |
| 1.5 双向启动子与顺式调控元件 | 第43-44页 |
| 2 本研究的目的和意义 | 第44页 |
| 3 材料与方法 | 第44-48页 |
| 3.1 水稻材料 | 第44页 |
| 3.2 载体及菌株 | 第44页 |
| 3.3 候选双向启动子的选取 | 第44-45页 |
| 3.4 BIP1，BIP2，BIP3和BIP4的分离克隆及表达载体构建 | 第45-46页 |
| 3.5 GUS组织化学染色 | 第46页 |
| 3.6 GUS活性定量分析 | 第46页 |
| 3.7 GFP组织学及定量分析 | 第46-47页 |
| 3.8 BIP1的 5’和 3’缺失分析 | 第47-48页 |
| 3.9 BIP1，BIP2，BIP3和BIP4在禾本科植物中的保守性分析 | 第48页 |
| 3.10 BIP1，BIP2，BIP3和BIP4中保守序列的生物信息学鉴定 | 第48页 |
| 4 结果与分析 | 第48-55页 |
| 4.1 水稻中四个新的双向启动子的分离以及它们在转基因植株中的功能分析 | 第48-51页 |
| 4.2 BIP1关键表达调控区段的鉴定 | 第51-53页 |
| 4.3 四个双向启动子调控的基因对在不同物种间的保守排列 | 第53-54页 |
| 4.4 两个可能与双向表达相关的顺式序列的生物信息学鉴定 | 第54-55页 |
| 5 讨论 | 第55-57页 |
| 5.1 双向启动子BIP1和BIP4的应用前景 | 第55页 |
| 5.2 双向启动子的保守性与其调控基因对的功能相关性 | 第55页 |
| 5.3 可能与双向表达相关的两个新的顺式序列 | 第55-57页 |
| 第三章 OsPGIP1基因在水稻抗纹枯病中的功能研究 | 第57-78页 |
| 1 前言 | 第57-60页 |
| 2 本研究的目的和意义 | 第60-61页 |
| 3 材料与方法 | 第61-69页 |
| 3.1 水稻材料 | 第61页 |
| 3.2 载体及菌株 | 第61页 |
| 3.3 OsPGIP1的原核表达、蛋白纯化和Western blot | 第61-62页 |
| 3.4 OsPGIP1的酶活检测 | 第62页 |
| 3.5 OsPGIP1的亚细胞定位 | 第62-66页 |
| 3.6 OsPGIP1基因超表达纯合株系的qRT-PCR表达量检测 | 第66页 |
| 3.7 OsPGIP1基因超表达纯合植株的田间纹枯病抗性鉴定 | 第66-69页 |
| 4 结果与分析 | 第69-76页 |
| 4.1 OsPGIP1的原核表达、蛋白纯化和Western blot | 第69-70页 |
| 4.2 OsPGIP1的酶活检测 | 第70-71页 |
| 4.3 OsPGIP1的亚细胞定位 | 第71-72页 |
| 4.4 OsPGIP1基因超表达纯合株系的qRT-PCR表达量检测 | 第72-73页 |
| 4.5 OsPGIP1基因超表达纯合植株的田间纹枯病抗性鉴定 | 第73-76页 |
| 5 结果与分析 | 第76-78页 |
| 5.1 OsPGIP1原核表达及PG酶活抑制试验的突破 | 第76页 |
| 5.2 OsPGIP1在水稻抗纹枯病育种中具有很好的应用前景 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-94页 |
| 附录1 启动子BIP1的核苷酸序列 | 第94-96页 |
| 附录2 启动子BIP2的核苷酸序列 | 第96-97页 |
| 附录3 启动子BIP3的核苷酸序列 | 第97-98页 |
| 附录4 启动子BIP4的核苷酸序列 | 第98-99页 |
| 附录5 启动子功能分析载体示意图 | 第99-100页 |
| 作者简介 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
