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小麦热胁迫响应转录因子TabZIP60和TabZIP28的克隆及功能鉴定

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 文献综述第12-28页
    1.1 高温胁迫对植物生理活动的影响第12-13页
        1.1.1 高温胁迫对植物细胞膜的伤害第12页
        1.1.2 高温胁迫对植物光合作用、呼吸作用和蒸腾作用的影响第12-13页
    1.2 植物热胁迫响应途径第13-19页
        1.2.1 热胁迫信号的感知第13-15页
        1.2.2 热激蛋白在热胁迫响应途径中的功能第15-16页
        1.2.3 转录因子在热胁迫响应途径中的功能第16-18页
        1.2.4 激素在热胁迫响应途径中的功能第18-19页
        1.2.5 活性氧类物质在热胁迫响应途径中的功能第19页
    1.3 内质网胁迫与未折叠蛋白响应(Unfolded Protein Response,UPR)第19-27页
        1.3.1 内质网胁迫响应的概念第19-20页
        1.3.2 酵母中UPR途径的研究第20-21页
        1.3.3 动物中UPR途径的研究第21页
        1.3.4 拟南芥中UPR途径的研究第21-25页
        1.3.5 水稻中UPR途径的研究第25-27页
    1.4 立论依据和研究内容第27-28页
        1.4.1 立论依据第27页
        1.4.2 研究内容第27-28页
第二章 小麦TabZIP60基因和TaIRE1基因的克隆及功能鉴定第28-68页
    2.1 材料和方法第28-42页
        2.1.1 供试材料第28页
        2.1.2 菌株和载体第28页
        2.1.3 小麦TabZIP60基因和TaIRE1基因的克隆第28-30页
        2.1.4 TabZIP60基因被特异性剪切的证明第30-31页
        2.1.5 TabZIP60基因和TaIRE1基因在胁迫下的表达模式分析第31页
        2.1.6 超表达拟南芥载体的构建及转化第31-35页
        2.1.7 超表达拟南芥转基因株系的耐热性鉴定第35页
        2.1.8 超表达拟南芥转基因株系的内质网胁迫抗性鉴定第35页
        2.1.9 RNA-seq及数据分析第35-37页
        2.1.10 染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)第37-39页
        2.1.11 ChIP-PCR检测及引物第39-40页
        2.1.12 小麦RNAi载体的构建及转化第40-41页
        2.1.13 转基因小麦的分子检测第41页
        2.1.14 转基因小麦耐热性和内质网胁迫抗性的鉴定方法第41-42页
    2.2 结果分析第42-65页
        2.2.1 TabZIP60基因的克隆和序列分析第42-44页
        2.2.2 TabZIP60基因在胁迫下的表达模式分析第44页
        2.2.3 在内质网胁迫和热胁迫下TabZIP60基因会产生特异的剪切形式第44-46页
        2.2.4 剪切前的TabZIP60超表达转化拟南芥不能显著提高耐热性和内质网胁迫抗性第46-48页
        2.2.5 剪切后的TabZIP60(TabZIP60D)超表达转化拟南芥提高了耐热性和内质网胁迫抗性第48-50页
        2.2.6 35S::TabZIP60D-MYC拟南芥转基因株系和野生型在热胁迫前后的转录组差异分析第50-55页
        2.2.7 染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)验证TabZIP60D在热胁迫下调控的靶基因第55-58页
        2.2.8 TabZIP60的RNAi转基因小麦与对照相比抗内质网胁迫能力和耐热性降低第58-60页
        2.2.9 TabZIP60的上游调控基因TaIRE1的克隆及在胁迫条件下的表达模式分析第60-63页
        2.2.10 TaIRE1的RNAi转基因小麦的获得及对热胁迫和内质网胁迫的抗性分析第63-65页
    2.3 讨论第65-68页
        2.3.1 超表达TabZIP60剪切前的形式不能提高拟南芥对热胁迫、内质网胁迫的抗性的原因第65-66页
        2.3.2 在正常条件下AtIRE1蛋白可以剪切TabZIP60第66页
        2.3.3 在拟南芥中超表达TabZIP60D是如何提高其耐热性的第66-67页
        2.3.4 目前植物UPR途径中尚未解决的问题第67-68页
第三章 小麦TabZIP28的克隆和功能鉴定第68-78页
    3.1 材料与方法第68-71页
        3.1.1 实验材料第68页
        3.1.2 菌株和载体第68页
        3.1.3 小麦材料的胁迫处理方法第68-69页
        3.1.4 基因克隆与同源进化分析第69页
        3.1.5 TabZIP28胁迫处理后的表达模式分析第69-70页
        3.1.6 TabZIP28启动子顺式作用元件分析第70页
        3.1.7 拟南芥超表达载体构建和转化第70页
        3.1.8 拟南芥超表达株系的耐热性鉴定第70-71页
    3.2 结果与分析第71-76页
        3.2.1 TabZIP28基因的克隆第71-74页
        3.2.2 TabZIP28基因在逆境胁迫下的表达模式分析第74页
        3.2.3 TabZIP28基因的启动子区域顺式作用元件分析第74-75页
        3.2.4 TabZIP28拟南芥超表达株系的表达量检测第75页
        3.2.5 TabZIP28拟南芥超表达株系的耐热性鉴定第75-76页
    3.3 讨论第76-78页
第四章 结论第78-80页
参考文献第80-94页
致谢第94-96页
附录第96-98页
作者简介第98页

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