摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
1.1 高温胁迫对植物生理活动的影响 | 第12-13页 |
1.1.1 高温胁迫对植物细胞膜的伤害 | 第12页 |
1.1.2 高温胁迫对植物光合作用、呼吸作用和蒸腾作用的影响 | 第12-13页 |
1.2 植物热胁迫响应途径 | 第13-19页 |
1.2.1 热胁迫信号的感知 | 第13-15页 |
1.2.2 热激蛋白在热胁迫响应途径中的功能 | 第15-16页 |
1.2.3 转录因子在热胁迫响应途径中的功能 | 第16-18页 |
1.2.4 激素在热胁迫响应途径中的功能 | 第18-19页 |
1.2.5 活性氧类物质在热胁迫响应途径中的功能 | 第19页 |
1.3 内质网胁迫与未折叠蛋白响应(Unfolded Protein Response,UPR) | 第19-27页 |
1.3.1 内质网胁迫响应的概念 | 第19-20页 |
1.3.2 酵母中UPR途径的研究 | 第20-21页 |
1.3.3 动物中UPR途径的研究 | 第21页 |
1.3.4 拟南芥中UPR途径的研究 | 第21-25页 |
1.3.5 水稻中UPR途径的研究 | 第25-27页 |
1.4 立论依据和研究内容 | 第27-28页 |
1.4.1 立论依据 | 第27页 |
1.4.2 研究内容 | 第27-28页 |
第二章 小麦TabZIP60基因和TaIRE1基因的克隆及功能鉴定 | 第28-68页 |
2.1 材料和方法 | 第28-42页 |
2.1.1 供试材料 | 第28页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第28页 |
2.1.3 小麦TabZIP60基因和TaIRE1基因的克隆 | 第28-30页 |
2.1.4 TabZIP60基因被特异性剪切的证明 | 第30-31页 |
2.1.5 TabZIP60基因和TaIRE1基因在胁迫下的表达模式分析 | 第31页 |
2.1.6 超表达拟南芥载体的构建及转化 | 第31-35页 |
2.1.7 超表达拟南芥转基因株系的耐热性鉴定 | 第35页 |
2.1.8 超表达拟南芥转基因株系的内质网胁迫抗性鉴定 | 第35页 |
2.1.9 RNA-seq及数据分析 | 第35-37页 |
2.1.10 染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP) | 第37-39页 |
2.1.11 ChIP-PCR检测及引物 | 第39-40页 |
2.1.12 小麦RNAi载体的构建及转化 | 第40-41页 |
2.1.13 转基因小麦的分子检测 | 第41页 |
2.1.14 转基因小麦耐热性和内质网胁迫抗性的鉴定方法 | 第41-42页 |
2.2 结果分析 | 第42-65页 |
2.2.1 TabZIP60基因的克隆和序列分析 | 第42-44页 |
2.2.2 TabZIP60基因在胁迫下的表达模式分析 | 第44页 |
2.2.3 在内质网胁迫和热胁迫下TabZIP60基因会产生特异的剪切形式 | 第44-46页 |
2.2.4 剪切前的TabZIP60超表达转化拟南芥不能显著提高耐热性和内质网胁迫抗性 | 第46-48页 |
2.2.5 剪切后的TabZIP60(TabZIP60D)超表达转化拟南芥提高了耐热性和内质网胁迫抗性 | 第48-50页 |
2.2.6 35S::TabZIP60D-MYC拟南芥转基因株系和野生型在热胁迫前后的转录组差异分析 | 第50-55页 |
2.2.7 染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)验证TabZIP60D在热胁迫下调控的靶基因 | 第55-58页 |
2.2.8 TabZIP60的RNAi转基因小麦与对照相比抗内质网胁迫能力和耐热性降低 | 第58-60页 |
2.2.9 TabZIP60的上游调控基因TaIRE1的克隆及在胁迫条件下的表达模式分析 | 第60-63页 |
2.2.10 TaIRE1的RNAi转基因小麦的获得及对热胁迫和内质网胁迫的抗性分析 | 第63-65页 |
2.3 讨论 | 第65-68页 |
2.3.1 超表达TabZIP60剪切前的形式不能提高拟南芥对热胁迫、内质网胁迫的抗性的原因 | 第65-66页 |
2.3.2 在正常条件下AtIRE1蛋白可以剪切TabZIP60 | 第66页 |
2.3.3 在拟南芥中超表达TabZIP60D是如何提高其耐热性的 | 第66-67页 |
2.3.4 目前植物UPR途径中尚未解决的问题 | 第67-68页 |
第三章 小麦TabZIP28的克隆和功能鉴定 | 第68-78页 |
3.1 材料与方法 | 第68-71页 |
3.1.1 实验材料 | 第68页 |
3.1.2 菌株和载体 | 第68页 |
3.1.3 小麦材料的胁迫处理方法 | 第68-69页 |
3.1.4 基因克隆与同源进化分析 | 第69页 |
3.1.5 TabZIP28胁迫处理后的表达模式分析 | 第69-70页 |
3.1.6 TabZIP28启动子顺式作用元件分析 | 第70页 |
3.1.7 拟南芥超表达载体构建和转化 | 第70页 |
3.1.8 拟南芥超表达株系的耐热性鉴定 | 第70-71页 |
3.2 结果与分析 | 第71-76页 |
3.2.1 TabZIP28基因的克隆 | 第71-74页 |
3.2.2 TabZIP28基因在逆境胁迫下的表达模式分析 | 第74页 |
3.2.3 TabZIP28基因的启动子区域顺式作用元件分析 | 第74-75页 |
3.2.4 TabZIP28拟南芥超表达株系的表达量检测 | 第75页 |
3.2.5 TabZIP28拟南芥超表达株系的耐热性鉴定 | 第75-76页 |
3.3 讨论 | 第76-78页 |
第四章 结论 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-94页 |
致谢 | 第94-96页 |
附录 | 第96-98页 |
作者简介 | 第98页 |