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核辐射诱发水稻基因组变异的特征及定向选择技术研究

致谢第6-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略词第16-17页
第一章 文献综述第17-36页
    1.1 突变体产生的方式第17-21页
        1.1.1 自发突变第18页
        1.1.2 化学诱变第18-19页
            1.1.2.1 烷化剂第18-19页
            1.1.2.2 碱基类似物第19页
            1.1.2.3 抗生素第19页
            1.1.2.4 其它化学诱变剂第19页
        1.1.3 生物诱变第19-20页
            1.1.3.1 T-DNA插入第19页
            1.1.3.2 转座子第19-20页
            1.1.3.3 基因编辑技术第20页
        1.1.4 物理诱变第20-21页
            1.1.4.1 紫外线第21页
            1.1.4.2 快中子第21页
    1.2 伽玛射线第21-23页
        1.2.1 伽玛射线的生物学效应第21-22页
        1.2.2 伽玛射线在辐射育种中的应用第22-23页
    1.3 离子束诱变第23-25页
        1.3.1 离子束的生物学效应第23-24页
            1.3.1.1 传能线密度第23-24页
            1.3.1.2 突变的分子特征第24页
        1.3.2 离子束在辐射育种中的应用第24-25页
    1.4 高通量测序技术第25-29页
        1.4.1 测序技术的发展第25-26页
        1.4.2 高通量测序技术的应用第26-28页
            1.4.2.1 DNA水平第26-27页
            1.4.2.2 RNA水平第27-28页
            1.4.2.3 表观遗传学研究第28页
        1.4.3 基因组重测序在作物育种和功能基因研究中的应用第28-29页
    1.5 突变体筛选技术第29-35页
        1.5.1 定向选择突变技术第30-32页
            1.5.1.1 TILLING技术流程第30-31页
            1.5.1.2 TILLING技术的发展第31-32页
        1.5.2 Seq-TILLING技术第32-33页
        1.5.3 HRM技术第33-35页
            1.5.3.1 HRM的原理第33-34页
            1.5.3.2 HRM在植物中的应用第34-35页
    1.6 本研究的主要内容及目的意义第35-36页
第二章 伽玛射线诱发水稻基因组变异的研究第36-76页
    2.1 材料与方法第37-48页
        2.1.1 材料培育第37-38页
        2.1.2 DNA提取及质检第38-39页
            2.1.2.1 DNA提取第38-39页
            2.1.2.2 DNA质检第39页
        2.1.3 基因组重测序第39-41页
            2.1.3.1 DNA文库构建第39-40页
            2.1.3.2 簇生成第40页
            2.1.3.3 Illumina Hiseq2000测序第40-41页
        2.1.4 生物信息学分析第41-42页
            2.1.4.1 数据质控第41页
            2.1.4.2 比对统计第41页
            2.1.4.3 变异检测及注释第41-42页
        2.1.5 基因组变异来源分析第42-43页
        2.1.6 突变验证第43-48页
            2.1.6.1 SNPs和Indels第43-44页
            2.1.6.2 SVs第44页
            2.1.6.3 CNVs第44-45页
            2.1.6.4 用以HRM分型的PCR扩增第45-48页
    2.2 结果与分析第48-74页
        2.2.1 γ射线的辐射效应第48页
        2.2.2 测序数据量统计第48-49页
        2.2.3 突变分析第49-56页
            2.2.3.1 SNPs和Indels的染色体分布第49-52页
            2.2.3.2 SNPs和Indels的功能区域分布第52页
            2.2.3.3 SNPs和Indels突变类型第52-54页
            2.2.3.4 SV和CNV的突变分析第54-56页
        2.2.4 突变验证第56-72页
        2.2.5 突变频率估算第72-74页
    2.3 讨论第74-76页
第三章 C、Ne、Ar三种高能离子束的生物学与诱变效应第76-92页
    3.1 材料与方法第77-80页
        3.1.1 试验材料与高能离子辐射第77-78页
        3.1.2 M_1和M_2群体种植与观察第78页
        3.1.3 农艺性状考察和突变频率统计第78页
        3.1.4 重测序及生物信息学分析第78-80页
    3.2 结果与分析第80-89页
        3.2.1 辐射对M_1代的生物学效应第80-82页
            3.2.1.1 成活率第80页
            3.2.1.2 株高第80-81页
            3.2.1.3 结实率第81-82页
        3.2.2 M_2群体突变第82-86页
            3.2.2.1 苗期叶绿素缺失突变第82-83页
            3.2.2.2 突变体与野生型分离比第83-84页
            3.2.2.3 农艺和形态性状突变第84-85页
            3.2.2.4 同一M_1单株不同M_2穗行突变第85-86页
        3.2.3 重测序分析第86-89页
            3.2.3.1 测序数据量统计第86-87页
            3.2.3.2 SNPs和Indels的数量统计第87-88页
            3.2.3.3 SNPs和Indels的染色体分布第88-89页
    3.3 讨论第89-92页
第四章 基于NGS和HRM分析筛选缺失突变系的探索第92-113页
    4.1 材料和方法第93-100页
        4.1.1 试验材料第93-95页
        4.1.2 基因池构建与高通量测序第95-97页
            4.1.2.1 DNA提取与引物设计第95-97页
            4.1.2.2 基因池构建第97页
            4.1.2.3 混池测序检测缺失突变第97页
        4.1.3 生物信息学分析第97-98页
        4.1.4 HRM混池检测第98-100页
    4.2 结果与分析第100-111页
        4.2.1 三种比例混池测序数据量第100-102页
        4.2.2 不同混池比例的突变检出能力第102-103页
        4.2.3 混池测序效力的检测第103-107页
            4.2.3.1 测序数据量统计第103-104页
            4.2.3.2 突变检出能力第104-107页
        4.2.4 HRM的混池检测第107-111页
            4.2.4.1 小片段缺失突变混池检测第107-109页
            4.2.4.2 较大片段缺失的混池检测第109-111页
    4.3 讨论第111-113页
参考文献第113-124页
附表1第124-132页
作者简介第132页

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