| 摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 1. 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 硒与硒蛋白 | 第13-17页 |
| 1.1.1 硒的概述 | 第13页 |
| 1.1.2 硒蛋白合成 | 第13-14页 |
| 1.1.3 硒蛋白家族的功能 | 第14-17页 |
| 1.2 硒与脑 | 第17-18页 |
| 1.2.1 脑中的硒 | 第17页 |
| 1.2.2 脑中的硒蛋白 | 第17-18页 |
| 1.3 硒、硒蛋白与神经系统疾病 | 第18-19页 |
| 1.3.1 硒与神经系统疾病 | 第18页 |
| 1.3.2 硒蛋白与神经系统疾病 | 第18-19页 |
| 1.4 SepSecS与硒蛋白合成 | 第19-20页 |
| 1.4.1 SepSecS概述 | 第19页 |
| 1.4.2 SepSecS的作用机制 | 第19-20页 |
| 1.5 试验的目的与意义 | 第20-22页 |
| 2. 材料与方法 | 第22-33页 |
| 2.1 主要仪器与试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.2 试验动物与处理 | 第23-24页 |
| 2.3 鸡SepSecS生物信息学分析 | 第24-25页 |
| 2.4 鸡SepSecS多克隆抗体的制备 | 第25-26页 |
| 2.4.1 鸡SepSec S抗原多肽的制备 | 第25页 |
| 2.4.2 鸡SepSec S多肽抗体的制备 | 第25页 |
| 2.4.3 鸡SepSec S多克隆抗体效价的测定 | 第25页 |
| 2.4.4 鸡SepSec S多克隆抗体特异性的测定 | 第25-26页 |
| 2.5 鸡SepSecS中枢神经系统表达谱 | 第26页 |
| 2.6 鸡胚神经元细胞的分离培养与鉴定 | 第26-27页 |
| 2.6.1 鸡胚神经元细胞的分离培养 | 第26页 |
| 2.6.2 鸡胚神经元细胞的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.7 鸡胚神经元细胞形态观察 | 第27页 |
| 2.8 鸡胚神经元细胞活性的测定 | 第27页 |
| 2.9 鸡胚神经元细胞SepSecS沉默模型的建立 | 第27-28页 |
| 2.9.1 SepSecS RNAi条件的建立 | 第27页 |
| 2.9.2 Stealth RNA转染条件的优化 | 第27-28页 |
| 2.9.3 鸡胚神经元细胞SepSecS干扰引物的筛选 | 第28页 |
| 2.10 鸡胚神经元细胞SepSecS RNAi试验 | 第28-31页 |
| 2.10.1 Gpx活性的测定 | 第28页 |
| 2.10.2 硒蛋白转录组及其转录因子基因表达的测定 | 第28-31页 |
| 2.11 SepSecS沉默对鸡胚神经元细胞活性影响的检测 | 第31页 |
| 2.12 数据统计与分析 | 第31-33页 |
| 3. 结果 | 第33-61页 |
| 3.1 鸡胚神经元细胞的分离与鉴定 | 第33-34页 |
| 3.2 鸡SepSecS生物信息学分析 | 第34-39页 |
| 3.2.1 鸡SepSec S蛋白理化性质的预测结果 | 第34页 |
| 3.2.2 鸡SepSec S蛋白疏水性的预测结果 | 第34-35页 |
| 3.2.3 鸡SepSec S蛋白跨膜区域的预测结果 | 第35-36页 |
| 3.2.4 鸡SepSec S蛋白信号肽的预测结果 | 第36-37页 |
| 3.2.5 鸡SepSec S蛋白二级结构的预测结果 | 第37-38页 |
| 3.2.6 鸡SepSec S蛋白结构域的预测结果 | 第38页 |
| 3.2.7 鸡SepSec S蛋白空间结构的预测结果 | 第38-39页 |
| 3.2.8 鸡SepSec S蛋白功能的预测结果 | 第39页 |
| 3.3 鸡SepSecS多克隆抗体的制备 | 第39-43页 |
| 3.3.1 鸡SepSec S多肽抗原的设计与合成 | 第39-41页 |
| 3.3.2 鸡SepSec S蛋白抗体效价的检测结果 | 第41-42页 |
| 3.3.3 鸡SepSec S蛋白多克隆抗体特异性的检测结果 | 第42页 |
| 3.3.4 鸡中枢神经系统SepSecS蛋白表达谱 | 第42-43页 |
| 3.4 硒对鸡中枢神经系统中硒蛋白转录组表达的影响 | 第43-52页 |
| 3.4.1 硒对鸡脑中硒蛋白表达谱的影响 | 第43-44页 |
| 3.4.2 硒对鸡脑中硒蛋白转录组表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.4.3 硒对鸡大脑硒蛋白组转录的影响 | 第45-47页 |
| 3.4.4 硒对鸡嗅球硒蛋白组转录的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.5 硒对鸡小脑硒蛋白组转录的影响 | 第48-50页 |
| 3.4.6 硒对鸡丘脑硒蛋白组转录的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.7 硒对鸡脊髓硒蛋白组转录的影响 | 第51-52页 |
| 3.5 硒对鸡脑中Gpx活性的影响 | 第52-53页 |
| 3.6 硒对鸡脑中硒蛋白合成相关因子基因表达的影响 | 第53-55页 |
| 3.6.1 硒对鸡脑中硒蛋白合成相关因子基因表达的影响 | 第53-54页 |
| 3.6.2 硒对鸡脑中SepSecS基因表达的影响 | 第54-55页 |
| 3.7 鸡胚神经元细胞SepSecS沉默模型的建立 | 第55-56页 |
| 3.7.1 鸡胚神经元细胞转染效率的测定 | 第55-56页 |
| 3.7.2 SepSecS stealth RNA干扰引物的筛选 | 第56页 |
| 3.8 鸡SepSecS沉默对硒致鸡胚神经元SepSecS表达的影响 | 第56-57页 |
| 3.9 鸡SepSecS沉默对硒致鸡胚神经元Gpx的影响 | 第57-58页 |
| 3.10 鸡SepSec S沉默对鸡胚神经元细胞活性的检测 | 第58页 |
| 3.11 鸡SepSecS沉默对硒调控鸡胚神经元细胞中硒蛋白转录组表达的影响 | 第58-61页 |
| 4. 讨论 | 第61-68页 |
| 4.1 鸡胚神经元细胞的分离与鉴定 | 第61页 |
| 4.2 鸡SepSecS蛋白结构功能分析及多克隆抗体制备 | 第61-62页 |
| 4.2.1 鸡SepSec S蛋白结构功能分析 | 第61-62页 |
| 4.2.2 鸡SepSec S蛋白多克隆抗体的制备 | 第62页 |
| 4.3 硒对鸡脑组织及鸡胚神经元中含硒酶Gpx的影响 | 第62页 |
| 4.4 硒对鸡神经系统中硒蛋白组转录水平的影响 | 第62-65页 |
| 4.4.1 硒对鸡神经系统中Txnrds家族的影响 | 第62-63页 |
| 4.4.2 硒对鸡神经系统中Dios家族的影响 | 第63页 |
| 4.4.3 硒对鸡神经系统中ER相关硒蛋白的影响 | 第63-64页 |
| 4.4.4 硒对鸡神经系统中Sepp1的影响 | 第64-65页 |
| 4.4.5 硒对鸡神经系统中其他硒蛋白的影响 | 第65页 |
| 4.5 硒对鸡神经系统中硒蛋白合成相关因子表达水平的影响 | 第65-66页 |
| 4.6 鸡胚神经元细胞SepSecS沉默模型的建立 | 第66页 |
| 4.7 SepSecS在硒调控鸡胚神经元硒蛋白转录组中的作用 | 第66-68页 |
| 5. 结论 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 附录 | 第81-82页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第82页 |
