| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-27页 |
| 1.1 转氨酶 | 第12-14页 |
| 1.1.1 命名与分类 | 第12页 |
| 1.1.2 催化机制 | 第12-14页 |
| 1.1.3 谷草转氨酶 | 第14页 |
| 1.2 癌细胞代谢理论 | 第14-18页 |
| 1.2.1 Warburg效应 | 第14-16页 |
| 1.2.2 谷氨酰胺成瘾性 | 第16-17页 |
| 1.2.3 谷草转氨酶在癌症通路上的意义 | 第17-18页 |
| 1.3 蛋白质晶体学 | 第18-25页 |
| 1.3.1 蛋白质晶体生长过程 | 第18页 |
| 1.3.2 蛋白质结晶的影响因素 | 第18-24页 |
| 1.3.3 蛋白质结晶的制备方法 | 第24-25页 |
| 1.4 选题依据和研究内容 | 第25-27页 |
| 1.4.1 选题依据 | 第25-26页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第26-27页 |
| 2 人细胞质谷草转氨酶的高纯度重组表达与性质分析 | 第27-38页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 材料方法 | 第27-32页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.2.2 pET22b-gotl表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3) | 第28-29页 |
| 2.2.3 菌落PCR | 第29页 |
| 2.2.4 重组蛋白表达温度的优化 | 第29-30页 |
| 2.2.5 重组人细胞质谷草转氨酶的表达 | 第30页 |
| 2.2.6 重组人细胞质谷草转氨酶的分离纯化 | 第30页 |
| 2.2.7 Western Blotting | 第30-31页 |
| 2.2.8 凝胶色谱法对重组蛋白分子量的分析 | 第31-32页 |
| 2.2.9 重组人细胞质谷草转氨酶的性质表征 | 第32页 |
| 2.3 结果与分析 | 第32-36页 |
| 2.3.1 重组人细胞质谷草转氨酶的表达载体构建及阳性克隆的筛选 | 第32-33页 |
| 2.3.2 重组人细胞质谷草转氨酶的分离纯化 | 第33-35页 |
| 2.3.3 凝胶色谱法对人细胞质重组谷草转氨酶分子量的分析 | 第35页 |
| 2.3.4 重组人细胞质谷草转氨酶的性质表征 | 第35-36页 |
| 2.4 小结 | 第36-38页 |
| 3 人细胞质谷草转氨酶的的结晶条件筛选及晶体数据解析 | 第38-49页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 材料方法 | 第38-42页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.2.2 蛋白结晶的预处理 | 第39-40页 |
| 3.2.3 结晶条件的初步筛选 | 第40-41页 |
| 3.2.4 结晶条件的优化 | 第41页 |
| 3.2.5 晶体保护液的制备 | 第41-42页 |
| 3.2.6 X-射线衍射数据收集 | 第42页 |
| 3.2.7 人细胞质谷草转氨酶晶体结构解析 | 第42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-47页 |
| 3.3.1 结晶条件初筛的晶体生长情况 | 第42-43页 |
| 3.3.2 结晶条件复筛的晶体生长情况 | 第43-45页 |
| 3.3.3 晶体衍射数据收集 | 第45-47页 |
| 3.3.4 人细胞质谷草转氨酶整体结构分析 | 第47页 |
| 3.4 小结 | 第47-49页 |
| 4 谷草转氨酶的生物信息学分析 | 第49-65页 |
| 4.1 引言 | 第49-50页 |
| 4.2 材料与方法 | 第50-52页 |
| 4.2.1 两种人来源的细胞质谷草转氨酶晶体解析数据及结构比较 | 第50页 |
| 4.2.2 人细胞质和线粒体来源的谷草转氨酶的结构比较 | 第50页 |
| 4.2.3 人细胞质来源与其他来源的谷草转氨酶基于结构的序列比对 | 第50-51页 |
| 4.2.4 不同来源谷草转氨酶多重序列比对与进化树分析 | 第51页 |
| 4.2.5 人细胞质来源谷草转氨酶与氨基酸底物的分子对接 | 第51-52页 |
| 4.3 结果与分析 | 第52-63页 |
| 4.3.1 两种人来源的细胞质谷草转氨酶晶体解析数据及结构比较结果 | 第52-56页 |
| 4.3.2 人细胞质和线粒体来源的谷草转氨酶结构的比较结果 | 第56-58页 |
| 4.3.3 人细胞质来源与其他来源的谷草转氨酶基于结构的序列比对 | 第58-60页 |
| 4.3.4 不同来源谷草转氨酶多重序列比对与进化树分析 | 第60-61页 |
| 4.3.5 人细胞质来源谷草转氨酶与氨基酸底物的分子对接 | 第61-63页 |
| 4.4 小结 | 第63-65页 |
| 结论 | 第65-67页 |
| 附录A 附录内容名称 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
