| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| ·纤维素简介 | 第10-11页 |
| ·纤维素的分子结构 | 第10页 |
| ·植物秸秆纤维素的预处理 | 第10-11页 |
| ·纤维素酶的研究进展 | 第11-14页 |
| ·纤维素酶的组成及分类 | 第11页 |
| ·纤维素酶的结构及作用机理 | 第11-12页 |
| ·产纤维素酶的主要微生物群类 | 第12页 |
| ·产纤维素酶菌株的筛选 | 第12-13页 |
| ·纤维素酶在分子生物学中的研究进展 | 第13-14页 |
| ·纤维素预处理及纤维素酶研究的目的和意义 | 第14-17页 |
| ·纤维素预处理的目的和意义 | 第14-15页 |
| ·纤维素酶研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| ·纤维素酶对动物营养的影响 | 第15页 |
| ·纤维素酶对造纸工业的影响 | 第15-16页 |
| ·纤维素酶对洗涤工业的影响 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-36页 |
| ·实验材料 | 第17-22页 |
| ·样品采集与处理 | 第17页 |
| ·主要试剂与试剂盒 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·引物 | 第18页 |
| ·培养基配方 | 第18-19页 |
| ·主要溶液 | 第19-22页 |
| ·实验方法 | 第22-36页 |
| ·甜高粱秸秆的预处理 | 第22-23页 |
| ·机械处理 | 第22页 |
| ·高温处理 | 第22页 |
| ·超声波处理 | 第22页 |
| ·酸碱处理 | 第22页 |
| ·有机溶剂处理 | 第22-23页 |
| ·纤维素酶活的测定（DNS 法） | 第23-24页 |
| ·葡萄糖标准曲线的制作 | 第23页 |
| ·纤维素酶的活性测定采用DNS 法 | 第23-24页 |
| ·高效降解纤维素的细菌的筛选 | 第24页 |
| ·菌株的165 rDNA 分子鉴定 | 第24-29页 |
| ·细菌总DNA 的提取 | 第24-25页 |
| ·扩增165 rDNA 的PCR 反应 | 第25-26页 |
| ·凝胶回收PCR 产物 | 第26页 |
| ·目的片段的连接 | 第26-27页 |
| ·感受态E.Coli 细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·目的片段的转化 | 第28页 |
| ·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第28-29页 |
| ·Bacillus. sp. bs-1 内切葡聚糖酶基因的克隆 | 第29-31页 |
| ·扩增内切葡聚糖酶基因的PCR 反应 | 第29页 |
| ·PCR 产物的凝胶回收 | 第29-30页 |
| ·目的片段的连接 | 第30页 |
| ·目的片段的转化 | 第30页 |
| ·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第30-31页 |
| ·葡聚糖内切酶在大肠杆菌BL21（DE3）内的表达 | 第31-36页 |
| ·重组质粒的构建 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的转化 | 第32页 |
| ·重组质粒的提取 | 第32-33页 |
| ·双酶切检测连接状况 | 第33页 |
| ·重组质粒（表达载体pET-30a-C）的转化 | 第33页 |
| ·IPTG 的诱导表达 | 第33-34页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-48页 |
| ·甜高粱秸杆的预处理分析 | 第36-39页 |
| ·葡萄糖标准曲线的确定 | 第36页 |
| ·机械粉碎处理对酶降解的影响 | 第36-37页 |
| ·高温处理对酶降解的影响 | 第37页 |
| ·超声波处理对甜高粱秸秆酶解影响 | 第37-38页 |
| ·酸处理对甜高粱秸秆酶解影响 | 第38页 |
| ·碱处理对甜高粱秸秆酶解影响 | 第38-39页 |
| ·有机溶剂处理对甜高粱秸秆酶解影响 | 第39页 |
| ·细菌的筛选 | 第39-41页 |
| ·细菌的鉴定 | 第41-43页 |
| ·革兰氏染色鉴定 | 第41-42页 |
| ·16S rDNA 分子鉴定 | 第42页 |
| ·16S rDNA 序列的测定及分析 | 第42-43页 |
| ·内切葡聚糖酶的分子克隆 | 第43-45页 |
| ·内切葡聚糖酶基因的扩增 | 第43-45页 |
| ·带有内切葡聚糖酶基因的重组表达载体pET-30a(+)-C 的构建 | 第45页 |
| ·内切葡聚糖酶基因的表达 | 第45-48页 |
| ·内切葡聚糖酶氨基酸序列分析 | 第45-46页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第46-48页 |
| 4 结论与讨论 | 第48-50页 |
| ·秸秆纤维素预处理 | 第48页 |
| ·降解纤维素菌株的筛选 | 第48页 |
| ·Bacillus.sp.bs-1 内切葡聚糖酶的克隆 | 第48-49页 |
| ·内切葡聚糖酶在大肠杆菌BL21（DE3）中的表达 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
