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鳗弧菌多克隆抗体和单克隆抗体的制备及其特性分析

摘要第9-10页
Abstract第10-11页
引言第12-13页
第一章 综述第13-25页
    1 鳗弧菌的研究进展第13-20页
        1.1 鳗弧菌的生物学特性第13-14页
            1.1.1 鳗弧菌的形态学特征第13页
            1.1.2 鳗弧菌的生化特性与培养特性第13-14页
        1.2 鳗弧菌病的临床症状、病理变化及宿主第14-15页
        1.3 鳗弧菌病的感染途径第15页
        1.4 鳗弧菌的血清型与分类第15页
        1.5 鳗弧菌主要致病因子的研究第15-18页
            1.5.1 鞭毛第15-16页
            1.5.2 铁元素摄取系统第16-17页
            1.5.3 溶血素第17页
            1.5.4 脂多糖第17-18页
            1.5.5 外膜蛋白第18页
        1.6 鳗弧菌病诊断技术的研究第18-19页
            1.6.1 荧光抗体技术第18页
            1.6.2 酶联免疫吸附技术第18-19页
            1.6.3 核酸杂交技术第19页
            1.6.4 聚合酶链式反应反应技术第19页
        1.7 鳗弧菌病的防治第19-20页
    2 抗体技术在水产养殖中的应用第20-23页
        2.1 多克隆抗体技术的特点第20-21页
        2.2 多克隆抗体技术在水产养殖中的应用第21页
            2.2.1 多克隆抗体技术在鳗弧菌病中的应用第21页
            2.2.2 多克隆克隆抗体在其他水产细菌病中的应用第21页
        2.3 单克隆抗体技术的特点第21-22页
        2.4 单克隆抗体的制备原理第22页
        2.5 单克隆抗体水产养殖常见细菌性疾病中的研究背景第22-23页
            2.5.1 鳗弧菌单克隆抗体的研究第22页
            2.5.2 副溶血弧菌单克隆抗体的研究第22-23页
            2.5.3 溶藻弧菌单克隆抗体的研究第23页
            2.5.4 哈维氏弧菌单克隆抗体的研究第23页
            2.5.5 爱德华氏菌单克隆抗体的研究第23页
    3 本论文的研究意义第23-25页
第二章 鳗弧菌多克隆抗体的制备及特性分析第25-35页
    1 材料与方法第25-26页
        1.1 菌株与试验动物第25页
        1.2 主要试剂第25-26页
    2 实验方法第26-28页
        2.1 抗原的制备第26页
        2.2 抗原的灭活及其效果试验第26-27页
        2.3 新西兰兔的免疫第27页
        2.4 多克隆抗体的纯化第27页
        2.5 兔多克隆抗体的效价检测第27页
        2.6 抗原最佳包被浓度的确定第27-28页
        2.7 兔多克隆抗体的灵敏度测试第28页
        2.8 兔多克隆抗体的交叉反应第28页
        2.9 兔多克隆抗体的western-blot分析第28页
    3 结果第28-33页
        3.1 鳗弧菌抗原灭活效果第28-29页
        3.2 抗原细菌计数结果第29页
        3.3 多克隆抗体的纯化第29页
        3.4 多克隆抗体的效价检测第29-30页
        3.5 最佳包被抗原浓度的确定第30页
        3.6 灵敏度试验第30-31页
        3.7 多克隆抗体交叉反应第31-32页
        3.8 兔多克隆抗体的western-bolt结果第32-33页
    4 讨论第33-35页
第三章 鳗弧菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及特性分析第35-49页
    1 试验材料第35-36页
        1.1 试验菌株第35页
        1.2 试验动物第35页
        1.3 试验主要试剂第35页
        1.4 试验主要仪器第35-36页
    2 试验方法第36-41页
        2.1 鳗弧菌抗原的制备第36页
        2.2 鳗弧菌抗原的灭活及其效果试验第36页
        2.3 Balb/C小鼠免疫程序第36页
        2.4 SP2/0骨髓瘤细胞的准备第36-37页
        2.5 饲养细胞的制备第37页
        2.6 细胞融合第37-38页
        2.7 阳性细胞株间接ELISA方法的建立第38-39页
        2.8 阳性细胞株的筛选第39页
        2.9 融合率和细胞融合阳性率第39页
        2.10 杂交瘤细胞的克隆化第39-40页
        2.11 杂交瘤细胞的冻存与复苏第40页
        2.12 上清效价的检测第40页
        2.13 IgG亚类鉴定第40页
        2.14 交叉反应第40-41页
        2.15 灵敏度的检测第41页
        2.16 杂交瘤细胞系分泌单克隆抗体的稳定性检测第41页
        2.17 腹水的制备及其效价检测第41页
    3 试验结果第41-46页
        3.1 鳗弧菌抗原细菌的计数结果第41页
        3.2 免疫Balb/C小鼠血清的效果第41-42页
        3.3 间接ELISA方法的建立第42页
        3.4 细胞融合的效果第42页
        3.5 细胞融合的阳性率第42-43页
        3.6 单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立第43页
        3.7 细胞培养上清的效价第43页
        3.8 IgG亚类的鉴定第43-44页
        3.9 交叉反应第44-45页
        3.10 灵敏度的检测第45页
        3.11 杂交瘤细胞系分泌单克隆抗体的稳定性第45-46页
        3.12 腹水的制备及其效价检测第46页
    4 讨论第46-49页
        4.1 动物的免疫第46-47页
        4.2 单克隆抗体的制备第47页
        4.3 鳗弧菌单克隆抗体的性质分析第47-49页
全文小结第49-50页
参考文献第50-57页
符号说明第57-58页
附录一第58-60页
附录二第60-62页
论文发表情况第62-63页
致谢第63-64页
经费支持第64页

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