| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-25页 |
| 1 鳗弧菌的研究进展 | 第13-20页 |
| 1.1 鳗弧菌的生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.1.1 鳗弧菌的形态学特征 | 第13页 |
| 1.1.2 鳗弧菌的生化特性与培养特性 | 第13-14页 |
| 1.2 鳗弧菌病的临床症状、病理变化及宿主 | 第14-15页 |
| 1.3 鳗弧菌病的感染途径 | 第15页 |
| 1.4 鳗弧菌的血清型与分类 | 第15页 |
| 1.5 鳗弧菌主要致病因子的研究 | 第15-18页 |
| 1.5.1 鞭毛 | 第15-16页 |
| 1.5.2 铁元素摄取系统 | 第16-17页 |
| 1.5.3 溶血素 | 第17页 |
| 1.5.4 脂多糖 | 第17-18页 |
| 1.5.5 外膜蛋白 | 第18页 |
| 1.6 鳗弧菌病诊断技术的研究 | 第18-19页 |
| 1.6.1 荧光抗体技术 | 第18页 |
| 1.6.2 酶联免疫吸附技术 | 第18-19页 |
| 1.6.3 核酸杂交技术 | 第19页 |
| 1.6.4 聚合酶链式反应反应技术 | 第19页 |
| 1.7 鳗弧菌病的防治 | 第19-20页 |
| 2 抗体技术在水产养殖中的应用 | 第20-23页 |
| 2.1 多克隆抗体技术的特点 | 第20-21页 |
| 2.2 多克隆抗体技术在水产养殖中的应用 | 第21页 |
| 2.2.1 多克隆抗体技术在鳗弧菌病中的应用 | 第21页 |
| 2.2.2 多克隆克隆抗体在其他水产细菌病中的应用 | 第21页 |
| 2.3 单克隆抗体技术的特点 | 第21-22页 |
| 2.4 单克隆抗体的制备原理 | 第22页 |
| 2.5 单克隆抗体水产养殖常见细菌性疾病中的研究背景 | 第22-23页 |
| 2.5.1 鳗弧菌单克隆抗体的研究 | 第22页 |
| 2.5.2 副溶血弧菌单克隆抗体的研究 | 第22-23页 |
| 2.5.3 溶藻弧菌单克隆抗体的研究 | 第23页 |
| 2.5.4 哈维氏弧菌单克隆抗体的研究 | 第23页 |
| 2.5.5 爱德华氏菌单克隆抗体的研究 | 第23页 |
| 3 本论文的研究意义 | 第23-25页 |
| 第二章 鳗弧菌多克隆抗体的制备及特性分析 | 第25-35页 |
| 1 材料与方法 | 第25-26页 |
| 1.1 菌株与试验动物 | 第25页 |
| 1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-28页 |
| 2.1 抗原的制备 | 第26页 |
| 2.2 抗原的灭活及其效果试验 | 第26-27页 |
| 2.3 新西兰兔的免疫 | 第27页 |
| 2.4 多克隆抗体的纯化 | 第27页 |
| 2.5 兔多克隆抗体的效价检测 | 第27页 |
| 2.6 抗原最佳包被浓度的确定 | 第27-28页 |
| 2.7 兔多克隆抗体的灵敏度测试 | 第28页 |
| 2.8 兔多克隆抗体的交叉反应 | 第28页 |
| 2.9 兔多克隆抗体的western-blot分析 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-33页 |
| 3.1 鳗弧菌抗原灭活效果 | 第28-29页 |
| 3.2 抗原细菌计数结果 | 第29页 |
| 3.3 多克隆抗体的纯化 | 第29页 |
| 3.4 多克隆抗体的效价检测 | 第29-30页 |
| 3.5 最佳包被抗原浓度的确定 | 第30页 |
| 3.6 灵敏度试验 | 第30-31页 |
| 3.7 多克隆抗体交叉反应 | 第31-32页 |
| 3.8 兔多克隆抗体的western-bolt结果 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 鳗弧菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及特性分析 | 第35-49页 |
| 1 试验材料 | 第35-36页 |
| 1.1 试验菌株 | 第35页 |
| 1.2 试验动物 | 第35页 |
| 1.3 试验主要试剂 | 第35页 |
| 1.4 试验主要仪器 | 第35-36页 |
| 2 试验方法 | 第36-41页 |
| 2.1 鳗弧菌抗原的制备 | 第36页 |
| 2.2 鳗弧菌抗原的灭活及其效果试验 | 第36页 |
| 2.3 Balb/C小鼠免疫程序 | 第36页 |
| 2.4 SP2/0骨髓瘤细胞的准备 | 第36-37页 |
| 2.5 饲养细胞的制备 | 第37页 |
| 2.6 细胞融合 | 第37-38页 |
| 2.7 阳性细胞株间接ELISA方法的建立 | 第38-39页 |
| 2.8 阳性细胞株的筛选 | 第39页 |
| 2.9 融合率和细胞融合阳性率 | 第39页 |
| 2.10 杂交瘤细胞的克隆化 | 第39-40页 |
| 2.11 杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第40页 |
| 2.12 上清效价的检测 | 第40页 |
| 2.13 IgG亚类鉴定 | 第40页 |
| 2.14 交叉反应 | 第40-41页 |
| 2.15 灵敏度的检测 | 第41页 |
| 2.16 杂交瘤细胞系分泌单克隆抗体的稳定性检测 | 第41页 |
| 2.17 腹水的制备及其效价检测 | 第41页 |
| 3 试验结果 | 第41-46页 |
| 3.1 鳗弧菌抗原细菌的计数结果 | 第41页 |
| 3.2 免疫Balb/C小鼠血清的效果 | 第41-42页 |
| 3.3 间接ELISA方法的建立 | 第42页 |
| 3.4 细胞融合的效果 | 第42页 |
| 3.5 细胞融合的阳性率 | 第42-43页 |
| 3.6 单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立 | 第43页 |
| 3.7 细胞培养上清的效价 | 第43页 |
| 3.8 IgG亚类的鉴定 | 第43-44页 |
| 3.9 交叉反应 | 第44-45页 |
| 3.10 灵敏度的检测 | 第45页 |
| 3.11 杂交瘤细胞系分泌单克隆抗体的稳定性 | 第45-46页 |
| 3.12 腹水的制备及其效价检测 | 第46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 4.1 动物的免疫 | 第46-47页 |
| 4.2 单克隆抗体的制备 | 第47页 |
| 4.3 鳗弧菌单克隆抗体的性质分析 | 第47-49页 |
| 全文小结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 符号说明 | 第57-58页 |
| 附录一 | 第58-60页 |
| 附录二 | 第60-62页 |
| 论文发表情况 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 经费支持 | 第64页 |
