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猪肝组织中喹赛多作用基因的发现与鉴定

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略语表第13-15页
1 前言第15-20页
    1.1 喹赛多研究进展第15-16页
    1.2 mRNA差异显示技术第16-18页
    1.3 研究内容和目的意义第18-20页
2 材料与方法第20-36页
    2.1 药品与试剂第20-22页
    2.2 仪器设备第22-23页
    2.3 引物序列第23-24页
    2.4 动物第24页
    2.5 统计分析第24页
    2.6 猪肝脏组织总RNA提取第24-25页
    2.7 DNase Ⅰ处理第25-26页
    2.8 RNA质量纯度鉴定与浓度测定第26页
    2.9 cDNA第一链的合成第26页
    2.10 cDNA质量鉴定第26-27页
    2.11 差异显示PCR第27页
    2.12 聚丙烯酰胺凝胶电泳第27-28页
    2.13 银染第28页
    2.14 从PAGE胶回收DNA第28页
    2.15 二次扩增第28-29页
    2.16 回收纯化DNA第29页
    2.17 目的基因克隆与鉴定第29-31页
        2.17.1 感受态细胞制备第29-30页
        2.17.2 基因克隆第30页
        2.17.3 阳性克隆鉴定第30-31页
    2.18 Northern杂交及软件分析第31-33页
    2.19 反向Northern杂交及软件分析第33-34页
    2.20 阳性差异基因片段同源性比对分析第34-36页
3 结果第36-54页
    3.1 喹赛多对猪生长性能的影响第36页
    3.2 总RNA提取第36页
    3.3 差异显示PCR结果第36-37页
    3.4 二次扩增第37页
    3.5 阳性克隆鉴定第37页
    3.6 Northern杂交第37-39页
        3.6.1 探针标记效率鉴定第38页
        3.6.2 杂交显色及软件分析第38-39页
    3.7 反向Northern杂交第39-42页
        3.7.1 探针标记效率检测第40页
        3.7.2 杂交显色及软件分析第40-42页
    3.8 差异基因鉴定第42-43页
    3.9 差异基因序列及分析第43-54页
        3.9.1 基因A-3-4序列及分析第43-45页
        3.9.2 基因A-4-4序列及分析第45-46页
        3.9.3 基因A-6-2序列及分析第46-47页
        3.9.4 基因G-1-1序列及分析第47-49页
        3.9.5 基因G-6-1序列及分析第49-50页
        3.9.6 基因C-3-2序列及分析第50-51页
        3.9.7 基因C-5-1序列及分析第51-52页
        3.9.8 基因C-7-1序列及分析第52-54页
4 讨论第54-71页
    4.1 总RNA的提取第54-55页
    4.3 差异显示PCR体系影响因素第55-56页
    4.4 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染方法第56-57页
    4.5 差异条带的回收和二次扩增第57-58页
    4.6 喹赛多相关基因第58-63页
    4.7 喹赛多作用机制的探讨第63-64页
    4.8 深入研究的思路第64-71页
        4.8.1 关于喹赛多作用机制的进一步研究第64-67页
        4.8.2 关于未知功能基因片段的深入研究第67-71页
5 小结第71-72页
6 文献综述:生物标志物及其在兽医药理学及毒理学的应用第72-79页
参考文献第79-88页
致谢第88-89页
作者简介第89-90页
附录第90-99页
对答辩委员意见的答复第99-101页

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