中文摘要 | 第12-15页 |
英文摘要 | 第15-18页 |
第一章 文献综述 | 第19-40页 |
1.1 糖尿病概述 | 第19-24页 |
1.1.1 糖尿病分类 | 第19-20页 |
1.1.2 糖尿病发病机制 | 第20-21页 |
1.1.3 糖尿病临床表现及并发症 | 第21-22页 |
1.1.4 糖尿病治疗 | 第22-24页 |
1.2 胰腺干细胞治疗糖尿病研究进展 | 第24-31页 |
1.2.1 干细胞研究进展 | 第24-29页 |
1.2.2 胰腺干细胞研究进展 | 第29-31页 |
1.3 牛磺酸治疗糖尿病研究进展 | 第31-37页 |
1.3.1 牛磺酸的生物学活性 | 第32-33页 |
1.3.2 牛磺酸对胰岛素依赖型糖尿病的作用 | 第33-34页 |
1.3.3 牛磺酸对非胰岛素依赖型糖尿病的作用 | 第34-35页 |
1.3.4 牛磺酸对孕期和早期糖尿病的作用 | 第35-37页 |
1.4 本研究的目的意义与主要内容 | 第37-40页 |
1.4.1 立题依据 | 第37-38页 |
1.4.2 研究目的与意义 | 第38页 |
1.4.3 主要研究内容 | 第38-39页 |
1.4.4 技术路线 | 第39-40页 |
第二章 STZ诱导糖尿病大鼠模型的建立及胰腺干细胞的体外培养 | 第40-50页 |
2.1 试验材料 | 第40-42页 |
2.1.1 试验动物 | 第40页 |
2.1.2 试验仪器 | 第40-41页 |
2.1.3 试验试剂 | 第41页 |
2.1.4 主要配置试剂及其配置方法 | 第41-42页 |
2.2 试验方法 | 第42-43页 |
2.2.1 STZ诱导糖尿病大鼠模型的建立 | 第42页 |
2.2.2 胰腺干细胞的体外培养 | 第42页 |
2.2.3 胰腺干细胞的鉴定 | 第42-43页 |
2.3 结果与分析 | 第43-46页 |
2.3.1 STZ诱导糖尿病大鼠模型的成模情况 | 第43-44页 |
2.3.2 倒置显微镜下观察胰腺干细胞形态 | 第44-46页 |
2.3.3 免疫细胞化学法鉴定胰腺干细胞表面标志物 | 第46页 |
2.4 讨论 | 第46-49页 |
2.4.1 STZ诱导糖尿病大鼠模型的制备 | 第46-47页 |
2.4.2 胰腺干细胞的体外培养技术 | 第47-48页 |
2.4.3 胰腺干细胞表面标志物 | 第48-49页 |
2.5 小结 | 第49-50页 |
第三章 牛磺酸对STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞增殖活性的影响 | 第50-69页 |
3.1 试验材料 | 第50-53页 |
3.1.1 细胞来源与分组 | 第50页 |
3.1.2 试验仪器 | 第50-51页 |
3.1.3 试验试剂 | 第51-52页 |
3.1.4 主要配置试剂及其配置方法 | 第52-53页 |
3.1.5 引物序列及相关信息 | 第53页 |
3.2 试验方法 | 第53-58页 |
3.2.1 免疫荧光法鉴定胰腺干细胞表面标志物 | 第53-54页 |
3.2.2 MTT法检测胰腺干细胞增殖活性 | 第54页 |
3.2.3 流式细胞术检测胰腺干细胞周期 | 第54-55页 |
3.2.4 实时荧光定量PCR法检测胰腺干细胞PCNA和Ki67 mRNA的表达 | 第55-56页 |
3.2.5 Western Blot技术检测胰腺干细胞PCNA和Ki67蛋白的表达 | 第56-58页 |
3.3 结果与分析 | 第58-66页 |
3.3.1 STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞表面标志物的定性、定量结果 | 第58-61页 |
3.3.2 牛磺酸对STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞增殖活力的作用 | 第61-62页 |
3.3.3 牛磺酸对STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞S期百分比及增殖指数的作用 | 第62-63页 |
3.3.4 牛磺酸对STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞PCNA和Ki67 mRNA表达的作用 | 第63-65页 |
3.3.5 牛磺酸对STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞PCNA和Ki67蛋白表达的作用 | 第65-66页 |
3.4 讨论 | 第66-68页 |
3.4.1 牛磺酸对STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞增殖活性的影响 | 第66页 |
3.4.2 细胞增殖相关抗原PCNA与Ki67 | 第66-68页 |
3.5 小结 | 第68-69页 |
第四章 牛磺酸对糖尿病大鼠胰腺干细胞基因表达谱调控的研究 | 第69-111页 |
4.1 试验材料 | 第69-71页 |
4.1.1 细胞来源与分组 | 第69页 |
4.1.2 试验仪器 | 第69-70页 |
4.1.3 试验试剂 | 第70页 |
4.1.4 引物序列及相关信息 | 第70-71页 |
4.2 试验方法 | 第71-75页 |
4.2.1 总RNA的提取与纯化 | 第71页 |
4.2.2 总RNA的质控 | 第71页 |
4.2.3 cRNA合成、标记、杂交和洗脱 | 第71-73页 |
4.2.4 芯片扫描与原始信号值提取 | 第73页 |
4.2.5 芯片结果可靠性评估、原始数据标准化与探针过滤 | 第73-74页 |
4.2.6 差异基因筛选、绘制火山图与非监督层次聚类分析 | 第74页 |
4.2.7 差异基因GO富集分析 | 第74-75页 |
4.2.8 差异基因KEGG富集分析 | 第75页 |
4.2.9 实时荧光定量PCR法验证基因芯片数据 | 第75页 |
4.3 结果与分析 | 第75-95页 |
4.3.1 总RNA的质检结果 | 第75-76页 |
4.3.2 芯片结果可靠性的评估 | 第76-80页 |
4.3.3 差异性表达基因概况 | 第80-84页 |
4.3.4 差异基因GO富集分析 | 第84-88页 |
4.3.5 差异基因KEGG富集分析 | 第88-91页 |
4.3.6 实时荧光定量PCR法验证基因芯片数据 | 第91-95页 |
4.4 讨论 | 第95-109页 |
4.4.1 芯片质量控制 | 第95-96页 |
4.4.2 牛磺酸对糖尿病大鼠胰腺干细胞生物学功能的影响 | 第96-97页 |
4.4.3 牛磺酸促进糖尿病大鼠胰腺干细胞增殖的可能调控通路 | 第97-109页 |
4.5 小结 | 第109-111页 |
第五章 结论与展望 | 第111-114页 |
5.1 结论 | 第111-112页 |
5.2 创新点 | 第112页 |
5.3 展望 | 第112-114页 |
参考文献 | 第114-130页 |
附录 | 第130-132页 |
致谢 | 第132-133页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第133-134页 |