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牛磺酸对STZ诱导糖尿病大鼠胰腺干细胞增殖作用的研究

中文摘要第12-15页
英文摘要第15-18页
第一章 文献综述第19-40页
    1.1 糖尿病概述第19-24页
        1.1.1 糖尿病分类第19-20页
        1.1.2 糖尿病发病机制第20-21页
        1.1.3 糖尿病临床表现及并发症第21-22页
        1.1.4 糖尿病治疗第22-24页
    1.2 胰腺干细胞治疗糖尿病研究进展第24-31页
        1.2.1 干细胞研究进展第24-29页
        1.2.2 胰腺干细胞研究进展第29-31页
    1.3 牛磺酸治疗糖尿病研究进展第31-37页
        1.3.1 牛磺酸的生物学活性第32-33页
        1.3.2 牛磺酸对胰岛素依赖型糖尿病的作用第33-34页
        1.3.3 牛磺酸对非胰岛素依赖型糖尿病的作用第34-35页
        1.3.4 牛磺酸对孕期和早期糖尿病的作用第35-37页
    1.4 本研究的目的意义与主要内容第37-40页
        1.4.1 立题依据第37-38页
        1.4.2 研究目的与意义第38页
        1.4.3 主要研究内容第38-39页
        1.4.4 技术路线第39-40页
第二章 STZ诱导糖尿病大鼠模型的建立及胰腺干细胞的体外培养第40-50页
    2.1 试验材料第40-42页
        2.1.1 试验动物第40页
        2.1.2 试验仪器第40-41页
        2.1.3 试验试剂第41页
        2.1.4 主要配置试剂及其配置方法第41-42页
    2.2 试验方法第42-43页
        2.2.1 STZ诱导糖尿病大鼠模型的建立第42页
        2.2.2 胰腺干细胞的体外培养第42页
        2.2.3 胰腺干细胞的鉴定第42-43页
    2.3 结果与分析第43-46页
        2.3.1 STZ诱导糖尿病大鼠模型的成模情况第43-44页
        2.3.2 倒置显微镜下观察胰腺干细胞形态第44-46页
        2.3.3 免疫细胞化学法鉴定胰腺干细胞表面标志物第46页
    2.4 讨论第46-49页
        2.4.1 STZ诱导糖尿病大鼠模型的制备第46-47页
        2.4.2 胰腺干细胞的体外培养技术第47-48页
        2.4.3 胰腺干细胞表面标志物第48-49页
    2.5 小结第49-50页
第三章 牛磺酸对STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞增殖活性的影响第50-69页
    3.1 试验材料第50-53页
        3.1.1 细胞来源与分组第50页
        3.1.2 试验仪器第50-51页
        3.1.3 试验试剂第51-52页
        3.1.4 主要配置试剂及其配置方法第52-53页
        3.1.5 引物序列及相关信息第53页
    3.2 试验方法第53-58页
        3.2.1 免疫荧光法鉴定胰腺干细胞表面标志物第53-54页
        3.2.2 MTT法检测胰腺干细胞增殖活性第54页
        3.2.3 流式细胞术检测胰腺干细胞周期第54-55页
        3.2.4 实时荧光定量PCR法检测胰腺干细胞PCNA和Ki67 mRNA的表达第55-56页
        3.2.5 Western Blot技术检测胰腺干细胞PCNA和Ki67蛋白的表达第56-58页
    3.3 结果与分析第58-66页
        3.3.1 STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞表面标志物的定性、定量结果第58-61页
        3.3.2 牛磺酸对STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞增殖活力的作用第61-62页
        3.3.3 牛磺酸对STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞S期百分比及增殖指数的作用第62-63页
        3.3.4 牛磺酸对STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞PCNA和Ki67 mRNA表达的作用第63-65页
        3.3.5 牛磺酸对STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞PCNA和Ki67蛋白表达的作用第65-66页
    3.4 讨论第66-68页
        3.4.1 牛磺酸对STZ诱导的糖尿病大鼠胰腺干细胞增殖活性的影响第66页
        3.4.2 细胞增殖相关抗原PCNA与Ki67第66-68页
    3.5 小结第68-69页
第四章 牛磺酸对糖尿病大鼠胰腺干细胞基因表达谱调控的研究第69-111页
    4.1 试验材料第69-71页
        4.1.1 细胞来源与分组第69页
        4.1.2 试验仪器第69-70页
        4.1.3 试验试剂第70页
        4.1.4 引物序列及相关信息第70-71页
    4.2 试验方法第71-75页
        4.2.1 总RNA的提取与纯化第71页
        4.2.2 总RNA的质控第71页
        4.2.3 cRNA合成、标记、杂交和洗脱第71-73页
        4.2.4 芯片扫描与原始信号值提取第73页
        4.2.5 芯片结果可靠性评估、原始数据标准化与探针过滤第73-74页
        4.2.6 差异基因筛选、绘制火山图与非监督层次聚类分析第74页
        4.2.7 差异基因GO富集分析第74-75页
        4.2.8 差异基因KEGG富集分析第75页
        4.2.9 实时荧光定量PCR法验证基因芯片数据第75页
    4.3 结果与分析第75-95页
        4.3.1 总RNA的质检结果第75-76页
        4.3.2 芯片结果可靠性的评估第76-80页
        4.3.3 差异性表达基因概况第80-84页
        4.3.4 差异基因GO富集分析第84-88页
        4.3.5 差异基因KEGG富集分析第88-91页
        4.3.6 实时荧光定量PCR法验证基因芯片数据第91-95页
    4.4 讨论第95-109页
        4.4.1 芯片质量控制第95-96页
        4.4.2 牛磺酸对糖尿病大鼠胰腺干细胞生物学功能的影响第96-97页
        4.4.3 牛磺酸促进糖尿病大鼠胰腺干细胞增殖的可能调控通路第97-109页
    4.5 小结第109-111页
第五章 结论与展望第111-114页
    5.1 结论第111-112页
    5.2 创新点第112页
    5.3 展望第112-114页
参考文献第114-130页
附录第130-132页
致谢第132-133页
攻读学位期间发表的学术论文目录第133-134页

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