| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 1 材料、试剂和仪器 | 第15-23页 |
| 1.1 实验动物 | 第15页 |
| 1.2 主要试剂 | 第15-16页 |
| 1.3.主要试剂配制 | 第16-20页 |
| 1.3.1 肝脏灌流液(pH 7.4)的配方 | 第16-17页 |
| 1.3.2 肝脏消化液的配方 | 第17页 |
| 1.3.3 胶原酶溶液的配制 | 第17页 |
| 1.3.4 配制培养原代肝细胞的培养基 | 第17页 |
| 1.3.5 配制鼠尾胶原工作液 | 第17-18页 |
| 1.3.6 鼠尾胶原包被板的制作 | 第18页 |
| 1.3.7 SDS-PAGE电泳相关溶液的配制 | 第18-19页 |
| 1.3.8 免疫印迹相关溶液配制 | 第19-20页 |
| 1.4 实验仪器 | 第20-23页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第23-31页 |
| 2.1 原代小鼠肝细胞的分离 | 第23-24页 |
| 2.2 蛋白的提取 | 第24页 |
| 2.3 BCA法测定蛋白浓度 | 第24-25页 |
| 2.3.1 标准品的稀释 | 第24-25页 |
| 2.3.2 工作液配制 | 第25页 |
| 2.3.3 蛋白浓度的测量 | 第25页 |
| 2.3.4 孵育 | 第25页 |
| 2.3.5 蛋白浓度的计算 | 第25页 |
| 2.4 蛋白浓度的调节 | 第25页 |
| 2.5 蛋白质印迹 | 第25-27页 |
| 2.5.1 SDS-PAGE凝胶的制备 | 第26页 |
| 2.5.2 western blotting检测蛋白 | 第26-27页 |
| 2.6 RNA的提取 | 第27-29页 |
| 2.6.1 去除DNA | 第27-28页 |
| 2.6.2 纯化RNA | 第28页 |
| 2.6.3 RNA的质量检测 | 第28页 |
| 2.6.4 cDNA的反转录 | 第28-29页 |
| 2.6.5 实时定量PCR（qPCR） PCR：聚合酶链式反应 | 第29页 |
| 2.7 细胞水平ROS定量 | 第29页 |
| 2.8 油红O染色 | 第29-30页 |
| 2.9 脂肪酸的制备 | 第30页 |
| 2.10 统计学分析 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-43页 |
| 3.1 TSP1基因的缺失对肝细胞脂质代谢的影响 | 第31-37页 |
| 3.1.1 TSP1基因的缺失减少了由高脂饮食诱导肝脏的脂滴蓄积 | 第31页 |
| 3.1.2 TSP1基因的缺失减少了高脂饮食小鼠肝脏对脂肪酸的摄取和脂肪生成 | 第31-32页 |
| 3.1.3 TSP基因的缺失不能改变在高脂饮食小鼠肝脏中脂肪酸的氧化 | 第32-33页 |
| 3.1.4 TSP1基因的缺失减少了肝细胞内脂滴的蓄积 | 第33-34页 |
| 3.1.5 TSP1基因的缺失使小鼠肝细胞减少了对脂肪酸摄取 | 第34-35页 |
| 3.1.6 TSP1基因的敲除减少了肝细胞脂肪合成 | 第35-36页 |
| 3.1.7 TSP1基因的缺失对小鼠肝细胞脂肪氧化的影响 | 第36-37页 |
| 3.2．TSP1对胰岛素敏感性的影响 | 第37-43页 |
| 3.2.1.胰岛素刺激原代肝细胞的剂量和时间效应 | 第37-38页 |
| 3.2.2.TSP1蛋白降低了肝细胞受胰岛素刺激所产生的AKT的磷酸化水平 | 第38-39页 |
| 3.2.3 TSP1基因的缺失提高了肝细胞对胰岛素的敏感性 | 第39-40页 |
| 3.2.4.TSP1蛋白引起了肝细胞中炎症因子的增多 | 第40页 |
| 3.2.5.TSP1基因的缺失降低了肝细胞对内毒素的炎症反应 | 第40-41页 |
| 3.2.6 TSP1引起了PA处理肝细胞的氧化应激反应 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55-57页 |
| 附录：英文缩略词（ABBREVIATIONS） | 第57-59页 |
| 研究生期间成果 | 第59-60页 |
