摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章:绪论 | 第9-19页 |
·胚胎干细胞 | 第9-10页 |
·诱导多潜能性干细胞 | 第10-13页 |
·细胞核重编程走向应用亟需解决的问题 | 第13-15页 |
·本课题研究的介绍 | 第15-18页 |
·Turner syndrome | 第17页 |
·Trisomy 8 syndrome | 第17页 |
·Trisomy13 syndrome | 第17-18页 |
·Derivative 22 syndrome | 第18页 |
·本课题研究的意义 | 第18-19页 |
第二章:实验材料与方法 | 第19-41页 |
·材料 | 第19-25页 |
·本课题所有的细胞来源 | 第19页 |
·主要耗材与试剂 | 第19-20页 |
·本课题所用的引物总结 | 第20-22页 |
·本课题所用的抗体总结 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·培养基和一些重要试剂的配置方法 | 第23-25页 |
·MEF 培养基(无双抗) | 第23页 |
·MEF 冻存液 | 第23页 |
·丝裂霉素贮存液 | 第23页 |
·B-Mecaptoenthanol 溶液 | 第23-24页 |
·bFGF 溶液 | 第24页 |
·Dispase | 第24页 |
·人胚胎干细胞/人诱导性多能干细胞培养基 | 第24页 |
·2×人胚胎干细胞冻存液 | 第24页 |
·EB 培养基 | 第24-25页 |
·心肌诱导培养基 | 第25页 |
·神经分化诱导培养基 | 第25页 |
·神经前体细胞培养培养基 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-41页 |
·MEF 的分离 | 第25-27页 |
·制作饲养层细胞 | 第27页 |
·多能性细胞的复苏 | 第27-28页 |
·人诱导性多能干细胞/人胚胎干细胞传代以及日常维护 | 第28-29页 |
·人诱导性多能干细胞/人胚胎干细胞冻存 | 第29页 |
·人的iPS 诱导流程 | 第29-30页 |
·人iPSCs 克隆挑取、培养及鉴定 | 第30-31页 |
·核型分析的步骤 | 第31页 |
·心肌,神经元,肝细胞三个胚层组织的定向分化 | 第31-33页 |
·心肌分化 | 第31-32页 |
·神经分化 | 第32页 |
·肝细胞定向分化 | 第32-33页 |
·流式细胞仪分选 | 第33-34页 |
·RNA 提取步骤及RT-PCR | 第34-35页 |
·RT-PCR | 第34-35页 |
·Real-time PCR | 第35页 |
·基因组提取DNA | 第35-38页 |
·DNA 样品处理 | 第36页 |
·PCR 扩增Promoter 区域(以人源的OCT4 和NANOG 为例) | 第36-38页 |
·免疫荧光 | 第38-39页 |
·组织常规染色(HE staining) | 第39-40页 |
·DNA 芯片分析 | 第40-41页 |
第三章:实验结果 | 第41-55页 |
·非整倍体疾病IPSCS 的获取与鉴定 | 第41-42页 |
·非整倍体疾病IPSCS 转录水平的比较与鉴定 | 第42-43页 |
·非整倍体疾病IPSCS 体外和体内的自发分化能力 | 第43页 |
·TURNER 疾病来源的IPSCS 三个胚层的定向分化能力的研究 | 第43-55页 |
第四章:讨论 | 第55-58页 |
参考文献 | 第58-62页 |
附录 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
攻读硕士学位期间取得的与学术论文相关的成果 | 第64页 |