| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-18页 |
| 1.1 土传病害及生物防治 | 第12页 |
| 1.2 粉红螺旋聚孢霉研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 分类地位与生物学特性 | 第12页 |
| 1.2.2 粉红螺旋聚孢霉生物防治效果 | 第12-13页 |
| 1.2.3 粉红螺旋聚孢霉生防作用机制 | 第13-14页 |
| 1.2.4 粉红螺旋聚孢霉产孢相关基因研究 | 第14页 |
| 1.3 厚垣孢子研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3.1 厚垣孢子概况及作用 | 第14-15页 |
| 1.3.2 厚垣孢子相关基因研究方法 | 第15页 |
| 1.3.3 厚垣孢子相关基因研究 | 第15-16页 |
| 1.4 高通量测序技术在转录组测序中的应用 | 第16页 |
| 1.5 本研究的主要内容、目的意义和技术路线 | 第16-18页 |
| 1.5.1 本研究主要内容 | 第16页 |
| 1.5.2 本研究目的与意义 | 第16-17页 |
| 1.5.3 本研究技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 粉红螺旋聚孢霉67-1产厚垣孢子转录组测序与分析 | 第18-33页 |
| 2.1 材料与方法 | 第18-23页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第18页 |
| 2.1.2 培养基 | 第18页 |
| 2.1.3 样品收集 | 第18-19页 |
| 2.1.4 RNA提取 | 第19页 |
| 2.1.5 RNA质量检测 | 第19页 |
| 2.1.6 cDNA文库的构建与转录组测序 | 第19-20页 |
| 2.1.7 转录组生物信息学分析 | 第20页 |
| 2.1.8 产孢差异表达基因分析 | 第20-21页 |
| 2.1.9 实时荧光定量PCR验证转录组结果 | 第21-23页 |
| 2.2 实验结果 | 第23-30页 |
| 2.2.1 分生孢子和厚垣孢子显微观察 | 第23页 |
| 2.2.2 RNA提取结果与质量检测 | 第23-25页 |
| 2.2.3 转录组分析 | 第25-27页 |
| 2.2.4 产孢差异表达基因分析 | 第27-29页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR验证 | 第29-30页 |
| 2.3 讨论 | 第30-33页 |
| 第三章 粉红螺旋聚孢霉67-1产厚垣孢子内参基因筛选 | 第33-41页 |
| 3.1 材料与方法 | 第33-35页 |
| 3.1.1 供试菌株 | 第33页 |
| 3.1.2 培养基 | 第33页 |
| 3.1.3 样品收集 | 第33页 |
| 3.1.4 cDNA第一链合成 | 第33-34页 |
| 3.1.5 内参基因引物设计与PCR扩增 | 第34-35页 |
| 3.1.6 qRT-PCR检测内参基因表达稳定性 | 第35页 |
| 3.1.7 内参基因表达稳定性分析 | 第35页 |
| 3.2 实验结果 | 第35-39页 |
| 3.2.1 内参基因引物特异性检测 | 第35-36页 |
| 3.2.2 内参基因扩增效率和相关系数 | 第36-37页 |
| 3.2.3 内参基因表达丰度分析 | 第37-38页 |
| 3.2.4 内参基因表达稳定性分析 | 第38-39页 |
| 3.3 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 粉红螺旋聚孢霉67-1产厚垣孢子相关基因功能研究 | 第41-55页 |
| 4.1 材料与方法 | 第41-45页 |
| 4.1.1 菌株、质粒和培养基 | 第41页 |
| 4.1.2 己糖激酶基因HXK67、聚酮化合物羟化酶基因PKH67和醛脱氢酶基因ALD67表达水平检测 | 第41页 |
| 4.1.3 HXK67、PKH67和ALD67生物信息学分析 | 第41-43页 |
| 4.1.4 HXK67、PKH67和ALD67敲除载体构建 | 第43页 |
| 4.1.5 HXK67、PKH67和ALD67转化 | 第43-44页 |
| 4.1.6 HXK67、PKH67和ALD67敲除转化子验证 | 第44页 |
| 4.1.7 转化子生长速率测定 | 第44-45页 |
| 4.1.8 转化子产厚垣孢子能力测定 | 第45页 |
| 4.1.9 转化子对尖孢镰刀菌拮抗能力测定 | 第45页 |
| 4.2 实验结果 | 第45-53页 |
| 4.2.1 HXK67、PKH67和ALD67表达水平检测 | 第45-47页 |
| 4.2.2 HXK67、PKH67和ALD67生物信息学分析 | 第47-50页 |
| 4.2.3 HXK67、PKH67和ALD67敲除载体构建与验证 | 第50-51页 |
| 4.2.4 HXK67、PKH67和ALD67缺失突变株验证 | 第51-52页 |
| 4.2.5 转化子生长速率测定 | 第52页 |
| 4.2.6 转化子产厚垣孢子能力测定 | 第52页 |
| 4.2.7 转化子对尖孢镰刀菌拮抗能力测定 | 第52-53页 |
| 4.3 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 全文结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简历 | 第66页 |
