摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第15-24页 |
1.1 小麦白粉病概况 | 第15-16页 |
1.1.1 小麦白粉病的分布及危害 | 第15页 |
1.1.2 小麦白粉病病原菌及其生物学特性 | 第15-16页 |
1.1.3 小麦与白粉菌的亲和性与非亲和性互作的细胞学研究 | 第16页 |
1.2 小麦近缘种抗病基因研究 | 第16-19页 |
1.2.1 小麦外源抗白粉病基因的鉴定 | 第16-17页 |
1.2.2 小麦-簇毛麦易位系抗白粉病研究进展 | 第17-19页 |
1.3 植物应答白粉病菌侵染的防御反应 | 第19-20页 |
1.4 布氏白粉菌效应子蛋白基因研究 | 第20-22页 |
1.4.1 植物效应子蛋白及其特性 | 第20页 |
1.4.2 布氏白粉菌效应子蛋白的鉴定 | 第20-21页 |
1.4.3 布氏白粉菌效应子蛋白基因的功能研究 | 第21-22页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第22页 |
1.6 技术路线 | 第22-24页 |
第二章 寄主-病原菌互作早期细胞学反应 | 第24-31页 |
2.1 试验材料 | 第24页 |
2.1.1 植物材料和白粉病菌 | 第24页 |
2.2 试验方法 | 第24-25页 |
2.2.1 白粉病菌的收集、繁殖及人工接菌方法 | 第24-25页 |
2.2.2 染色方法与显微观察 | 第25页 |
2.2.3 H_2O_2的检测 | 第25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-29页 |
2.3.1 抗、感材料的发病症状 | 第25页 |
2.3.2 白粉菌吸器 | 第25-27页 |
2.3.3 乳突 | 第27-28页 |
2.3.4 过敏性细胞坏死(HR) | 第28-29页 |
2.4 讨论 | 第29-31页 |
第三章 筛选、鉴定与抗病相关的候选基因 | 第31-50页 |
3.1 试验材料 | 第31-34页 |
3.1.1 小麦材料 | 第31-32页 |
3.1.2 引物 | 第32-34页 |
3.2 试验方法 | 第34-39页 |
3.2.1 白粉菌菌株的培养及接菌方法 | 第34页 |
3.2.2 转录组测序 | 第34页 |
3.2.3 植物材料基因组DNA提取 | 第34页 |
3.2.4 目的基因片段筛选 | 第34-35页 |
3.2.5 PCR产物的回收 | 第35页 |
3.2.6 目的片段的连接、转化和阳性克隆筛选 | 第35页 |
3.2.7 小麦叶片总RNA提取及反转录 | 第35-36页 |
3.2.8 实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
3.2.9 农杆菌感受态制备和转化 | 第37页 |
3.2.9.1 农杆菌感受态制备 | 第37页 |
3.2.10 病毒介导的基因沉默(VIGS) | 第37-39页 |
3.3 结果与分析 | 第39-47页 |
3.3.1 筛选、鉴定来自 6V | 第39-41页 |
3.3.2 qRT-PCR分析 | 第41-42页 |
3.3.3 VIGS分析 | 第42-45页 |
3.3.4 分子标记的开发 | 第45-47页 |
3.4 讨论 | 第47-50页 |
3.4.1 从转录组数据中寻找位于簇毛麦 6VS染色体上的基因序列 | 第47页 |
3.4.2 6V | 第47页 |
3.4.3 上调表达基因与VIGS的功能分析 | 第47-49页 |
3.4.4 易位染色体 6V | 第49-50页 |
第四章 白粉菌重要候选效应子蛋白基因的鉴定 | 第50-64页 |
4.1 试验材料 | 第50-51页 |
4.1.1 小麦材料及菌株 | 第50页 |
4.1.2 载体、酶及主要试剂 | 第50-51页 |
4.1.3 引物 | 第51页 |
4.2 试验方法 | 第51-56页 |
4.2.1 白粉菌菌株的培养及接菌方法 | 第51-52页 |
4.2.2 转录组测序 | 第52页 |
4.2.3 白粉菌与宛7107亲和互作的cDNA文库构建 | 第52页 |
4.2.4 小麦总RNA的提取及反转录 | 第52页 |
4.2.5 实时荧光定量PCR | 第52页 |
4.2.6 基因枪介导的单细胞瞬时表达 | 第52-54页 |
4.2.7 目标蛋白筛选cDNA文库的酵母双杂交分析 | 第54-56页 |
4.3 结果与分析 | 第56-62页 |
4.3.1 转录组效应子蛋白基因的筛选 | 第56-58页 |
4.3.2 白粉菌候选效应子蛋白基因的致病性分析 | 第58-59页 |
4.3.3 白粉菌重要候选效应子蛋白基因的寄主靶标鉴定 | 第59-62页 |
4.4 讨论 | 第62-64页 |
第五章 全文结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简历 | 第72页 |