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基于白粉菌胁迫下的转录组鉴定小麦外源抗病相关基因及病原致病的效应子蛋白

摘要第6-7页
abstract第7-8页
第一章 引言第15-24页
    1.1 小麦白粉病概况第15-16页
        1.1.1 小麦白粉病的分布及危害第15页
        1.1.2 小麦白粉病病原菌及其生物学特性第15-16页
        1.1.3 小麦与白粉菌的亲和性与非亲和性互作的细胞学研究第16页
    1.2 小麦近缘种抗病基因研究第16-19页
        1.2.1 小麦外源抗白粉病基因的鉴定第16-17页
        1.2.2 小麦-簇毛麦易位系抗白粉病研究进展第17-19页
    1.3 植物应答白粉病菌侵染的防御反应第19-20页
    1.4 布氏白粉菌效应子蛋白基因研究第20-22页
        1.4.1 植物效应子蛋白及其特性第20页
        1.4.2 布氏白粉菌效应子蛋白的鉴定第20-21页
        1.4.3 布氏白粉菌效应子蛋白基因的功能研究第21-22页
    1.5 本研究的目的和意义第22页
    1.6 技术路线第22-24页
第二章 寄主-病原菌互作早期细胞学反应第24-31页
    2.1 试验材料第24页
        2.1.1 植物材料和白粉病菌第24页
    2.2 试验方法第24-25页
        2.2.1 白粉病菌的收集、繁殖及人工接菌方法第24-25页
        2.2.2 染色方法与显微观察第25页
        2.2.3 H_2O_2的检测第25页
    2.3 结果与分析第25-29页
        2.3.1 抗、感材料的发病症状第25页
        2.3.2 白粉菌吸器第25-27页
        2.3.3 乳突第27-28页
        2.3.4 过敏性细胞坏死(HR)第28-29页
    2.4 讨论第29-31页
第三章 筛选、鉴定与抗病相关的候选基因第31-50页
    3.1 试验材料第31-34页
        3.1.1 小麦材料第31-32页
        3.1.2 引物第32-34页
    3.2 试验方法第34-39页
        3.2.1 白粉菌菌株的培养及接菌方法第34页
        3.2.2 转录组测序第34页
        3.2.3 植物材料基因组DNA提取第34页
        3.2.4 目的基因片段筛选第34-35页
        3.2.5 PCR产物的回收第35页
        3.2.6 目的片段的连接、转化和阳性克隆筛选第35页
        3.2.7 小麦叶片总RNA提取及反转录第35-36页
        3.2.8 实时荧光定量PCR第36-37页
        3.2.9 农杆菌感受态制备和转化第37页
            3.2.9.1 农杆菌感受态制备第37页
        3.2.10 病毒介导的基因沉默(VIGS)第37-39页
    3.3 结果与分析第39-47页
        3.3.1 筛选、鉴定来自 6V第39-41页
        3.3.2 qRT-PCR分析第41-42页
        3.3.3 VIGS分析第42-45页
        3.3.4 分子标记的开发第45-47页
    3.4 讨论第47-50页
        3.4.1 从转录组数据中寻找位于簇毛麦 6VS染色体上的基因序列第47页
        3.4.2 6V第47页
        3.4.3 上调表达基因与VIGS的功能分析第47-49页
        3.4.4 易位染色体 6V第49-50页
第四章 白粉菌重要候选效应子蛋白基因的鉴定第50-64页
    4.1 试验材料第50-51页
        4.1.1 小麦材料及菌株第50页
        4.1.2 载体、酶及主要试剂第50-51页
        4.1.3 引物第51页
    4.2 试验方法第51-56页
        4.2.1 白粉菌菌株的培养及接菌方法第51-52页
        4.2.2 转录组测序第52页
        4.2.3 白粉菌与宛7107亲和互作的cDNA文库构建第52页
        4.2.4 小麦总RNA的提取及反转录第52页
        4.2.5 实时荧光定量PCR第52页
        4.2.6 基因枪介导的单细胞瞬时表达第52-54页
        4.2.7 目标蛋白筛选cDNA文库的酵母双杂交分析第54-56页
    4.3 结果与分析第56-62页
        4.3.1 转录组效应子蛋白基因的筛选第56-58页
        4.3.2 白粉菌候选效应子蛋白基因的致病性分析第58-59页
        4.3.3 白粉菌重要候选效应子蛋白基因的寄主靶标鉴定第59-62页
    4.4 讨论第62-64页
第五章 全文结论第64-65页
参考文献第65-71页
致谢第71-72页
作者简历第72页

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