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中国野生华东葡萄抗白粉病株系白河-35-1转录因子基因(WRKY)表达与功能研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 文献综述第13-29页
   ·葡萄白粉病及抗病分子机理研究进展第13-15页
     ·葡萄白粉病第13页
     ·葡萄抗病分子机理研究进展第13-15页
   ·转录因子与植物抗病性第15-18页
   ·WRKY 转录因子研究进展第18-27页
     ·WRKY 类转录因子的概念、结构与分类第18-20页
     ·WRKY 起源与进化第20页
     ·WRKY 转录因子参与抵抗生物胁迫第20-23页
     ·WRKY 转录因子参与抵抗非生物胁迫第23-24页
     ·WRKY 转录因子参与对植物生长发育的调控第24-26页
     ·WRKY 调控网络第26-27页
     ·功能冗余的WRKY第27页
   ·葡萄转录因子研究进展第27-28页
   ·本研究目的和意义第28-29页
第二章 中国野生华东葡萄抗白粉病株系白河-35-1 两个WRKY 基因全长的分离第29-37页
   ·材料第29-30页
   ·方法第30-32页
     ·田间人工接种葡萄白粉菌第30页
     ·RNA 提取及纯化第30-31页
     ·cDNA 第一链合成第31页
     ·RACE 克隆测序第31-32页
   ·结果与分析第32-36页
     ·VpWRKY1 和VpWRKY2 序列分析第32-35页
     ·进化关系及同源性分析第35-36页
   ·讨论第36-37页
第三章 VpWRKY1 和VpWRKY2 表达模式分析第37-49页
   ·材料第37页
   ·方法第37-39页
     ·田间处理及采样第37-38页
     ·半定量RT-PCR 及定量RT-PCR(qRT-PCR)检测第38-39页
   ·结果与分析第39-47页
     ·VpWRKY1 和VpWRKY2 在接种白粉菌前后的半定量表达分析第39-40页
     ·VpWRKY1 和VpWRKY2 在11 个葡萄种质中的存在检测及EST 序列对比.第40-41页
     ·VpWRKY1 和VpWRKY2 在11 个葡萄种质叶片接种白粉菌前后表达分析..第41-45页
     ·VpWRKY1 和VpWRKY2 在白河-35-1 叶片受信号分子处理前后表达分析..第45-47页
     ·VpWRKY1 和VpWRKY2 在白河-35-1 中表达的组织特异性第47页
   ·讨论第47-49页
第四章 VpWRKY1 和VpWRKY2 转录因子基本特征分析第49-60页
   ·材料第49页
   ·方法第49-56页
     ·转录激活活性验证第49-54页
     ·VpWRKY1 和VpWRKY2 亚细胞定位第54-56页
   ·结果与分析第56-58页
     ·VpWRKY1 和VpWRKY2 转录激活活性分析第56-58页
     ·VpWRKY1 和VpWRKY2 核定位功能分析第58页
   ·讨论第58-60页
第五章 VpWRKY1、VpWRKY2 转基因拟南芥抗病功能分析第60-67页
   ·材料第60页
   ·方法第60-62页
     ·拟南芥转基因及阳性植株筛选第60-61页
     ·VpWRKY1、VpWRKY2 在转基因拟南芥株系中的表达检测第61-62页
     ·转基因拟南芥抗病性鉴定第62页
   ·结果与分析第62-66页
     ·拟南芥转化与阳性植株获得第62-64页
     ·VpWRKY1、VpWRKY2 在PCR 阳性植株中的表达分析第64页
     ·VpWRKY1、VpWRKY2 转基因拟南芥的抗病性分析第64-66页
   ·讨论第66-67页
第六章 VpWRKY1、VpWRKY2 对葡萄及拟南芥抗病相关基因表达的影响第67-74页
   ·材料第67页
   ·方法第67-68页
     ·VpWRKY1、VpWRKY2 在同源系统中的瞬时过表达及干扰第67-68页
     ·葡萄及拟南芥抗病相关基因在转基因叶片中的表达检测第68页
   ·结果与分析第68-71页
     ·拟南芥抗病相关基因在转基因株系中的表达分析第68-71页
     ·拟南芥抗病相关基因启动子区W-box 元件分析第71页
     ·VpWRKY1、VpWRKY2 在瞬时转化同源系统中调控抗病相关基因的表达第71页
   ·讨论第71-74页
第七章 VpWRKY1、VpWRKY2 启动子活性分析第74-81页
   ·材料第74页
   ·方法第74-75页
     ·启动子克隆及载体构建第74-75页
     ·瞬时转化及GUS 活性分析第75页
   ·结果与分析第75-77页
     ·启动子克隆与序列分析第75-76页
     ·启动子活性分析第76-77页
   ·讨论第77-81页
第八章 结论第81-83页
参考文献第83-97页
附录第97-101页
致谢第101-102页
个人简介第102页

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