| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 缩略语 | 第13-15页 |
| 第一章 剪切增强子复合体蛋白研究进展 | 第15-18页 |
| 1 Notch 信号途径 | 第15-16页 |
| 2 Notch 信号途径与疾病的关系 | 第16页 |
| 3 E(spl)m4 蛋白 | 第16-17页 |
| 4 E(spl)m4 蛋白的研究展望 | 第17-18页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第18-20页 |
| 1 研究目的和意义 | 第18页 |
| 2 研究内容 | 第18页 |
| 3 实验流程 | 第18-20页 |
| ·原核表达及抗体制备 | 第18-19页 |
| ·家蚕中BmEm4 的转录水平和翻译水平分析 | 第19页 |
| ·与Notch 信号途径相关的功能研究 | 第19-20页 |
| 第三章 生物信息学分析 | 第20-27页 |
| 1 生物信息学工具 | 第20页 |
| 2 方法 | 第20-21页 |
| ·BmEm4 基因的序列分析 | 第20页 |
| ·BmEm4 基因的序列受microRNA 调控位点的分析 | 第20-21页 |
| 3 结果 | 第21-25页 |
| ·BmEm4 基因的序列 | 第21-22页 |
| ·BmEm4 蛋白高级结构的预测 | 第22页 |
| ·BmEm4 蛋白定位的预测 | 第22页 |
| ·BmEm4 基因的同源性和保守序列分析 | 第22-24页 |
| ·BmEm4 基因潜在microRNA 结合位点的分析 | 第24-25页 |
| 4 讨论 | 第25-27页 |
| 第四章 BmEm4 的原核表达与抗体制备 | 第27-44页 |
| 1 材料与试剂 | 第27-30页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27-28页 |
| ·主要试剂的配制 | 第28-30页 |
| 2 方法 | 第30-38页 |
| ·BmEm4 基因的克隆 | 第30-34页 |
| ·BmEm4 基因序列的测定 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的转化及鉴定 | 第35页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌（BL21）中的表达 | 第35页 |
| ·表达情况的SDS-PAGE 电泳分析 | 第35-36页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| ·抗体的制备 | 第37-38页 |
| ·抗体的纯化 | 第38页 |
| ·抗体效价的测定 | 第38页 |
| 3 结果 | 第38-42页 |
| ·家蚕蛹总RNA 琼脂糖电泳检测 | 第38页 |
| ·RT-PCR 扩增完整的ORF 框 | 第38-39页 |
| ·重组质粒pET-28a-BmEm4 的鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组质粒的测序结果 | 第40页 |
| ·重组质粒的诱导表达及纯化 | 第40页 |
| ·抗体的纯化 | 第40-41页 |
| ·抗体的效价测定 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 第五章 Bm Em4 的表达分析 | 第44-58页 |
| 1 材料与试剂 | 第44-46页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44页 |
| ·主要试剂的配制 | 第44-46页 |
| 2 方法 | 第46-49页 |
| ·家蚕总RNA 的提取 | 第46页 |
| ·荧光定量PCR 引物的设计 | 第46页 |
| ·荧光定量PCR | 第46-47页 |
| ·荧光定量PCR 数据分析 | 第47页 |
| ·家蚕总蛋白质的提取及定量 | 第47-48页 |
| ·Western blotting 检测BmEm4 蛋白的分布 | 第48页 |
| ·家蚕冰冻切片的制作 | 第48页 |
| ·免疫荧光染色 | 第48-49页 |
| 3 结果 | 第49-55页 |
| ·家蚕发育过程中BmEm4 基因的转录水平分析 | 第49-50页 |
| ·家蚕发育过程中BmEm4 蛋白表达量的变化 | 第50-51页 |
| ·五龄幼虫各个组织中BmEm4 转录水平的分析 | 第51-53页 |
| ·五龄幼虫各个组织中蛋白表达量分析 | 第53页 |
| ·BmEm4 在家蚕幼虫中的组织分布 | 第53-54页 |
| ·BmEm4 在家蚕蛹中的组织分布 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 第六章 亚细胞定位 | 第58-61页 |
| 1 材料与试剂 | 第58页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58页 |
| ·主要试剂的配制 | 第58页 |
| 2 方法 | 第58-59页 |
| 3 结果 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 第七章 与Notch 信号途径相关的研究 | 第61-65页 |
| 1 材料与试剂 | 第61页 |
| ·材料 | 第61页 |
| ·试剂与仪器 | 第61页 |
| 2 方法 | 第61-63页 |
| ·BmN 细胞的传代培养 | 第61-62页 |
| ·不同浓度DAPT 处理BmN 细胞 | 第62页 |
| ·细胞RNA 的提取与逆转录反应 | 第62页 |
| ·荧光定量PCR | 第62页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第62页 |
| ·Western Blotting 分析 | 第62-63页 |
| 3 结果 | 第63-64页 |
| ·不同浓度DAPT 处理24 h 后BmEm4 基因的转录水平变化 | 第63页 |
| ·不同浓度DAPT 处理24 h 后BmEm4 基因的表达水平变化 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 在学期间发表的论文 | 第70页 |
