| 致谢 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第13-23页 |
| 1.1 军团菌 | 第13-14页 |
| 1.1.1 嗜肺型军团菌(Legionella pneumophila) | 第13-14页 |
| 1.1.2 军团菌病(Legionnaires’disease) | 第14页 |
| 1.2 嗜肺型军团菌与分泌系统 | 第14-17页 |
| 1.2.1 革兰氏阴性菌的分泌系统 | 第14-16页 |
| 1.2.2 Tcm/Dot Ⅳ型分泌系统 | 第16-17页 |
| 1.3 嗜肺型军团菌侵染过程 | 第17-19页 |
| 1.3.1 进入宿主细胞 | 第17-18页 |
| 1.3.2 LCV(Legionella-containing vacuoles) | 第18-19页 |
| 1.3.3 离开宿主细胞 | 第19页 |
| 1.4 逆向运输与Retromer复合物 | 第19-20页 |
| 1.5 RidL在侵染中的作用 | 第20-21页 |
| 1.6 本研究的意义 | 第21-23页 |
| 第2章 实验材料和实验方法 | 第23-47页 |
| 2.1 材料 | 第23页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.2 实验用酶、试剂、试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.2.1 分子克隆 | 第23页 |
| 2.2.2 蛋白表达与纯化 | 第23-24页 |
| 2.2.3 蛋白质结晶 | 第24页 |
| 2.3 主要实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.4 试剂配制 | 第25-29页 |
| 2.4.1 常用试剂部分 | 第25-26页 |
| 2.4.2 SDS-PAGE所需药品 | 第26页 |
| 2.4.3 SDS-PAGE蛋白电泳胶 | 第26-27页 |
| 2.4.4 硒代蛋白表达部分 | 第27-28页 |
| 2.4.5 亲和纯化及柱层析所用的缓冲液 | 第28-29页 |
| 2.5 实验方法 | 第29-47页 |
| 2.5.1 RidL基因克隆 | 第29-33页 |
| 2.5.2 目的基因的鉴定 | 第33-35页 |
| 2.5.3 RidL蛋白的表达 | 第35-38页 |
| 2.5.4 RidL蛋白纯化 | 第38-41页 |
| 2.5.5 蛋白结晶 | 第41-43页 |
| 2.5.6 晶体的优化 | 第43-45页 |
| 2.5.7 衍射数据收集 | 第45-47页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第47-63页 |
| 3.1 RidL的表达 | 第47页 |
| 3.1.1 RidL的小量表达 | 第47页 |
| 3.1.2 RidL的大量表达 | 第47页 |
| 3.2 RidL的纯化 | 第47-52页 |
| 3.2.1 蛋白大量表达 | 第47-48页 |
| 3.2.2 亲和纯化 | 第48-49页 |
| 3.2.3 离子交换纯化 | 第49-50页 |
| 3.2.4 分子筛纯化 | 第50-51页 |
| 3.2.5 RidL硒代蛋白的表达和纯化 | 第51-52页 |
| 3.3 RidL结晶和晶体的优化 | 第52-58页 |
| 3.3.1 初步筛选 | 第52-54页 |
| 3.3.2 晶体优化 | 第54-58页 |
| 3.4 RidL晶体衍射和数据处理 | 第58-63页 |
| 3.4.1 配制合适的防冻液 | 第58页 |
| 3.4.2 确定相位 | 第58-59页 |
| 3.4.3 衍射数据的收集和处理 | 第59-61页 |
| 3.4.4 提高RidL重原子衍生物分辨率的方法探讨 | 第61-63页 |
| 第4章 小结与展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 作者简介和科研成果 | 第71页 |
