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固氮施氏假单胞菌ACC脱氨酶基因acdS的功能鉴定

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
第一章 文献综述第16-38页
   ·前言第16页
   ·植物根际促生细菌的研究第16-24页
     ·植物根际促生细菌的种类第16-18页
     ·直接促进植物生长功能第18-22页
     ·间接促进植物生长功能第22-23页
     ·植物根际促生菌的应用第23-24页
   ·乙烯的研究进展第24-28页
     ·乙烯的生物合成第24-25页
     ·应激乙烯第25-26页
     ·胁迫信号传导和应答有关的基因第26-28页
   ·ACC 脱氨酶的研究进展第28-33页
     ·ACC 脱氨酶的生化特征第28页
     ·蛋白质结构第28-29页
     ·PLP 依赖酶和ACC 脱氨酶第29-31页
     ·转录机制第31-33页
   ·含ACC 脱氨酶的PGPR 研究现状第33-36页
   ·立题依据第36-38页
第二章 施氏假单胞菌A1501 中acdS 基因的生物信息学分析第38-46页
   ·材料第38页
     ·菌株第38页
     ·酶和试剂第38页
   ·方法第38-40页
     ·细菌基因组RNA 的提取第38-39页
     ·RNA 反转录为cDNA第39页
     ·反转录PCR(RT-PCR)第39-40页
     ·进化树构建与分析方法第40页
   ·结果与分析第40-45页
     ·施氏假单胞菌A1501acdS 基因转录单元分析第40-42页
     ·G+C 含量分析第42页
     ·ACC 脱氨酶基因(acdS)表达的转录调控分析第42-43页
     ·P.stutzeri A1501 中acdS 与其他菌中同源基因的进化分析第43-44页
     ·蛋白质结构预测第44-45页
   ·讨论第45-46页
第三章 acdS 基因突变株的构建及功能互补第46-57页
   ·材料第46-47页
     ·菌株和质粒第46页
     ·培养基第46-47页
     ·酶和化学试剂第47页
     ·主要仪器第47页
   ·方法第47-51页
     ·碱裂解法小量提取细菌质粒第47-48页
     ·细菌基因组DNA 的提取第48页
     ·基因的PCR 扩增第48-49页
     ·PCR 产物的纯化第49页
     ·琼脂糖凝胶电泳中DNA 片段的回收第49-50页
     ·酶切及连接反应第50页
     ·高效率转化感受态细胞的制备第50页
     ·大肠杆菌电击转化第50-51页
     ·三亲结合实验第51页
   ·结果分析第51-56页
     ·acdS 突变株的构建第51-52页
     ·acdS 基因重组载体的构建第52-56页
   ·讨论第56-57页
第四章 acdS 突变株的表型鉴定及与水稻的相互作用第57-73页
   ·材料第57-58页
     ·菌株第57页
     ·培养基第57-58页
     ·化学试剂第58页
     ·主要仪器第58页
   ·方法第58-63页
     ·生长曲线的测定第58-59页
     ·固氮酶活的测定第59页
     ·考马斯亮蓝法测定全细胞的蛋白含量第59-60页
     ·ACC 脱氨酶活性测定第60页
     ·细菌基因组RNA 的提取第60-61页
     ·RNA 反转录为cDNA第61页
     ·实时荧光定量PCR 实验第61-62页
     ·逆境胁迫实验第62页
     ·Biolog 分析野生型与突变株对碳源的利用情况第62页
     ·菌株与水稻的互作第62-63页
   ·结果分析第63-73页
     ·野生型、突变株及功能互补菌株生长曲线的测定第63-64页
     ·胁迫条件下野生型与acdS 突变株的生长状况第64-65页
     ·acdS 基因缺失对盐胁迫耐受性影响第65-66页
     ·ACC 酶活性第66页
     ·acdS 突变对固氮酶活性的影响第66-67页
     ·qRT-PCR 分析验证第67-69页
     ·Biolog 分析野生型与突变株对多种碳源的利用情况第69-70页
     ·acdS 突变株与野生型在不同盐浓度下对水稻的生长状况第70-71页
     ·acdS 突变株与野生型在不同重金属离子下对水稻的生长状况第71-73页
第五章 结论第73-74页
参考文献第74-85页
致谢第85-86页
作者简历第86页

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