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感染GCRV草鱼和赤眼鳟miRNA的鉴定与分析

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第一章 文献综述第15-33页
    1 病毒性草鱼出血病研究进展第15-21页
        1.1 病毒性草鱼出血病的病原与防治第15-17页
            1.1.1 草鱼呼肠孤病毒(GCRV)第15-16页
            1.1.2 GCRV的疫苗免疫第16-17页
        1.2 GCRV的免疫途径和免疫相关基因第17-21页
            1.2.1 鱼类的先天性免疫途径第17-18页
            1.2.2 GCRV的受体基因第18-19页
            1.2.3 GCRV的免疫相关基因第19-20页
            1.2.4 GCRV的免疫相关信号通路第20-21页
            1.2.5 GCRV对草鱼细胞凋亡的影响第21页
    2 动物miRNA的研究进展第21-31页
        2.1 miRNA的概念第21-22页
        2.2 miRNA的作用机制第22-23页
        2.3 小RNA的分类第23-24页
        2.4 miRNA的检测与鉴定方法第24-25页
        2.5 miRNA的研究进展第25-31页
            2.5.1 miRNA的表达特征第25页
            2.5.2 miRNA与疾病相关研究进展第25-29页
            2.5.3 鱼类中已报道的miRNA第29-30页
            2.5.4 miRNA的进化与保守性第30-31页
        2.6 miRNA靶基因研究方法第31页
    3 研究目的与意义第31-33页
第二章 草鱼和赤眼鳟miRNA Solexa测序第33-50页
    1 材料与方法第33-38页
        1.1 材料第33页
            1.1.1 实验动物第33页
            1.1.2 攻毒实验的病毒第33页
        1.2 方法第33-38页
            1.2.1 人工攻毒第33-34页
            1.2.2 试验样品采集第34页
            1.2.3 总RNA的提取第34页
            1.2.4 总RNA质量检测第34-35页
            1.2.5 RNA混合样本的构建第35页
            1.2.6 草鱼和赤眼鳟cDNA测序文库的构建第35-36页
            1.2.7 测序文库质检所用仪器和试剂第36页
            1.2.8 上机测序第36页
            1.2.9 测序数据分析第36-37页
            1.2.10 主要分析的数据库第37-38页
            1.2.11 数据分析所用程序第38页
    2 结果与分析第38-48页
        2.1. miRNA测序数据第38-43页
            2.1.1 测序数据总览第39-42页
            2.1.2 Clean小RNA长度分布第42-43页
        2.2 miRNA的检出与分类第43-48页
    3 讨论第48-50页
        3.1 实验样本的选择第48页
        3.2 草鱼和赤眼鳟miRNA文库的构建及测序第48-50页
第三章 草鱼和赤眼鳟miRNA的特征分析第50-72页
    1 材料与方法第50页
        1.1 材料第50页
        1.2 方法第50页
    2 结果与分析第50-70页
        2.1 草鱼和赤眼鳟miRNA的共表达和差异表达结果第50-59页
        2.2 差异基因表达水平的聚类分析第59-61页
        2.3 miRNA成簇分析第61-62页
        2.4 miRNA的进化分析和家族分析第62-69页
        2.5 miRNA种子序列分析第69-70页
    3 讨论第70-72页
        3.1 草鱼和赤眼鳟miRNA的特征分析第70页
        3.2 差异表达miRNA的成簇调控及进化分析第70-72页
第四章 草鱼和赤眼鳟miRNA的验证、靶基因预测及通路分析第72-93页
    1 材料与方法第72-76页
        1.1 实验数据第72页
        1.2 miRNA荧光定量PCR验证方法第72-74页
            1.2.1 引物设计第72页
            1.2.2 主要实验试剂第72页
            1.2.3 主要实验仪器第72页
            1.2.4 实验步骤第72-74页
            1.2.5 数据分析方法第74页
        1.3 miRNA靶基因预测方法第74-76页
        1.4 生物信息数据分析第76页
            1.4.1 GO分析第76页
            1.4.2 KEGG分析第76页
    2 结果与分析第76-90页
        2.1 miRNA的qPCR验证第76-77页
        2.2 靶基因预测第77-83页
        2.3 KEGG分析第83-84页
        2.4 GO富集分析第84-90页
    3 讨论第90-93页
        3.1. miRNA测序结果的可信度第90-91页
        3.2. miRNA靶基因预测分析第91页
        3.3 KEGG和GO富集分析第91-93页
第五章 结论、创新点及研究展望第93-95页
    1 结论第93页
    2 特色与创新第93-94页
    3 下一步研究展望第94-95页
参考文献第95-105页
附录第105-111页
致谢第111-112页
作者简介第112页

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