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H2S信号与钙信号交互作用对烟草细胞耐热性的调控

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩写表第10-11页
1 引言第11-22页
    1.1 H_2S信号第11-14页
        1.1.1 植物中H_2S合成的途径第11-12页
            1.1.1.1 L-半胱氨酸脱巯基酶途径第11-12页
            1.1.1.2 D-半胱氨酸脱巯基酶途径第12页
            1.1.1.3 半胱氨酸合成酶途径第12页
            1.1.1.4 氰丙酸合成酶途径第12页
            1.1.1.5 亚硫酸还原酶途径第12页
        1.1.2 H_2S信号分子调控植物耐热性第12-14页
            1.1.2.1 H_2S与抗氧化系统的关系第13页
            1.1.2.2 H_2S与渗透调节物质的关系第13-14页
            1.1.2.3 H_2S与钙信使系统的关系第14页
    1.2 钙信号第14-16页
        1.2.1 Ca~(2+)分布第15页
        1.2.2 钙信号作用特点第15-16页
        1.2.3 钙信号与逆境胁迫第16页
    1.3 热胁迫与耐热性第16-20页
        1.3.1 生物膜系统与耐热性第17-18页
        1.3.2 渗透调节物质和抗氧化系统与耐热性第18页
        1.3.3 热激蛋白(HSPs)与耐热性第18-20页
    1.4 问题的提出与研究内容第20-21页
        1.4.1 问题的提出第20页
        1.4.2 研究内容第20-21页
    1.5 技术路线第21-22页
2 材料与方法第22-40页
    2.1 材料第22-26页
        2.1.1 实验材料第22页
        2.1.2 试剂和培养基第22-23页
            2.1.2.1 主要试剂第22页
            2.1.2.2 培养基第22-23页
        2.1.3 试剂配制第23-26页
        2.1.4 主要仪器设备第26页
    2.2 实验方法第26-40页
        2.2.1 烟草悬浮细胞的培养第26-28页
        2.2.2 CaCl_2处理烟草悬浮细胞第28页
        2.2.3 EGTA处理烟草悬浮细胞第28页
        2.2.4 LaCl_3处理烟草悬浮细胞第28-29页
        2.2.5 CaM处理烟草悬浮细胞第29页
        2.2.6 三氟拉嗪(TFP)处理烟草悬浮细胞第29-30页
        2.2.7 测定H_2S含量(亚甲基蓝法)第30-31页
            2.2.7.1 H_2S标准曲线的绘制第30-31页
            2.2.7.2 测定H_2S含量第31页
        2.2.8 NaHS处理烟草悬浮细胞第31-32页
        2.2.9 炔丙基甘氨酸(PAG)处理烟草悬浮细胞第32页
        2.2.10 测定钙离子含量第32-34页
            2.2.10.1 钙离子标准曲线的绘制第32-33页
            2.2.10.2 钙离子含量的测定第33-34页
        2.2.11 测定LCD酶的活性第34-35页
        2.2.12 测定半胱氨酸合成酶(OAS-TL)的活性第35页
        2.2.13 H_2S对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第35-36页
        2.2.14 悬浮培养细胞存活率的测定(显微计数法)第36页
        2.2.15 H_2S水平对Ca~(2+)诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第36-37页
        2.2.16 Ca~(2+)和Ca M水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第37页
        2.2.17 TTC法测定细胞活力第37页
        2.2.18 MDA含量的测定第37-38页
        2.2.19 细胞再生能力测定第38页
        2.2.20 SPSS单因素方差分析第38-40页
3 结果与分析第40-85页
    3.1 Ca~(2+)对烟草悬浮培养细胞H_2S水平的影响第40-45页
        3.1.1 CaCl_2处理对烟草悬浮培养细胞H_2S水平的影响第40-41页
        3.1.2 EGTA处理对烟草悬浮培养细胞H_2S水平的影响第41-43页
        3.1.3 LaCl_3处理对烟草细胞H_2S水平的影响第43-45页
    3.2 Ca~(2+)对烟草悬浮培养细胞H_2S代谢酶活性的影响第45-49页
        3.2.1 CaCl_2处理对烟草悬浮培养细胞LCD酶活性的影响第45-46页
        3.2.2 CaCl_2处理对烟草悬浮培养细胞OAS-TL酶活性的影响第46-47页
        3.2.3 EGTA处理对烟草悬浮培养细胞LCD酶活性的影响第47-48页
        3.2.4 EGTA处理对烟草悬浮培养细胞OAS-TL酶活性的影响第48-49页
    3.3 CaM对烟草细胞H_2S水平的影响第49-53页
        3.3.1 CaM处理对烟草悬浮培养细胞H_2S水平的影响第49-51页
        3.3.2 TFP处理对烟草悬浮培养细胞H_2S水平的影响第51-53页
    3.4 H_2S对烟草悬浮细胞Ca~(2+)水平的影响第53-56页
        3.4.1 NaHS处理对烟草悬浮培养细胞Ca~(2+)水平的影响第53-54页
        3.4.2 PAG处理对烟草悬浮培养细胞Ca~(2+)水平的影响第54-56页
    3.5 CaM对烟草细胞H_2S代谢酶活性的影响第56-58页
        3.5.1 CaM处理对烟草悬浮培养细胞LCD酶活性的影响第56-57页
        3.5.2 TFP处理对烟草悬浮培养细胞LCD酶活性的影响第57-58页
    3.6 H_2S对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第58-60页
        3.6.1 NaHS处理对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第58-59页
        3.6.2 PAG处理对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第59-60页
    3.7 Ca~(2+)对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第60-64页
        3.7.1 上调Ca~(2+)水平对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第60-62页
        3.7.2 下调Ca~(2+)水平对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第62-64页
    3.8 H_2S对Ca~(2+)诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第64-65页
        3.8.1 上调和下调H_2S对Ca~(2+)诱导的烟草悬浮细胞耐热性的影响第64-65页
    3.9 Ca~(2+)和CaM对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第65-85页
        3.9.1 上调细胞Ca~(2+)水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第65-70页
        3.9.2 下调细胞Ca~(2+)水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第70-80页
            3.9.2.1 LaCl_3下调细胞Ca~(2+)水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第70-75页
            3.9.2.2 EGTA下调细胞Ca~(2+)水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第75-80页
        3.9.3 上调细胞CaM水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第80-82页
        3.9.4 下调细胞CaM水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响第82-85页
4 讨论与展望第85-88页
    4.1 H_2S与钙信号交谈第85-86页
    4.2 H_2S与钙信号交谈对烟草细胞耐热性的调控第86页
    4.3 结论第86页
    4.4 展望第86-88页
参考文献第88-93页
攻读学位期间发表的学术论文和研究成果第93-94页
致谢第94页

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