摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩写表 | 第10-11页 |
1 引言 | 第11-22页 |
1.1 H_2S信号 | 第11-14页 |
1.1.1 植物中H_2S合成的途径 | 第11-12页 |
1.1.1.1 L-半胱氨酸脱巯基酶途径 | 第11-12页 |
1.1.1.2 D-半胱氨酸脱巯基酶途径 | 第12页 |
1.1.1.3 半胱氨酸合成酶途径 | 第12页 |
1.1.1.4 氰丙酸合成酶途径 | 第12页 |
1.1.1.5 亚硫酸还原酶途径 | 第12页 |
1.1.2 H_2S信号分子调控植物耐热性 | 第12-14页 |
1.1.2.1 H_2S与抗氧化系统的关系 | 第13页 |
1.1.2.2 H_2S与渗透调节物质的关系 | 第13-14页 |
1.1.2.3 H_2S与钙信使系统的关系 | 第14页 |
1.2 钙信号 | 第14-16页 |
1.2.1 Ca~(2+)分布 | 第15页 |
1.2.2 钙信号作用特点 | 第15-16页 |
1.2.3 钙信号与逆境胁迫 | 第16页 |
1.3 热胁迫与耐热性 | 第16-20页 |
1.3.1 生物膜系统与耐热性 | 第17-18页 |
1.3.2 渗透调节物质和抗氧化系统与耐热性 | 第18页 |
1.3.3 热激蛋白(HSPs)与耐热性 | 第18-20页 |
1.4 问题的提出与研究内容 | 第20-21页 |
1.4.1 问题的提出 | 第20页 |
1.4.2 研究内容 | 第20-21页 |
1.5 技术路线 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-40页 |
2.1 材料 | 第22-26页 |
2.1.1 实验材料 | 第22页 |
2.1.2 试剂和培养基 | 第22-23页 |
2.1.2.1 主要试剂 | 第22页 |
2.1.2.2 培养基 | 第22-23页 |
2.1.3 试剂配制 | 第23-26页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-40页 |
2.2.1 烟草悬浮细胞的培养 | 第26-28页 |
2.2.2 CaCl_2处理烟草悬浮细胞 | 第28页 |
2.2.3 EGTA处理烟草悬浮细胞 | 第28页 |
2.2.4 LaCl_3处理烟草悬浮细胞 | 第28-29页 |
2.2.5 CaM处理烟草悬浮细胞 | 第29页 |
2.2.6 三氟拉嗪(TFP)处理烟草悬浮细胞 | 第29-30页 |
2.2.7 测定H_2S含量(亚甲基蓝法) | 第30-31页 |
2.2.7.1 H_2S标准曲线的绘制 | 第30-31页 |
2.2.7.2 测定H_2S含量 | 第31页 |
2.2.8 NaHS处理烟草悬浮细胞 | 第31-32页 |
2.2.9 炔丙基甘氨酸(PAG)处理烟草悬浮细胞 | 第32页 |
2.2.10 测定钙离子含量 | 第32-34页 |
2.2.10.1 钙离子标准曲线的绘制 | 第32-33页 |
2.2.10.2 钙离子含量的测定 | 第33-34页 |
2.2.11 测定LCD酶的活性 | 第34-35页 |
2.2.12 测定半胱氨酸合成酶(OAS-TL)的活性 | 第35页 |
2.2.13 H_2S对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第35-36页 |
2.2.14 悬浮培养细胞存活率的测定(显微计数法) | 第36页 |
2.2.15 H_2S水平对Ca~(2+)诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第36-37页 |
2.2.16 Ca~(2+)和Ca M水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第37页 |
2.2.17 TTC法测定细胞活力 | 第37页 |
2.2.18 MDA含量的测定 | 第37-38页 |
2.2.19 细胞再生能力测定 | 第38页 |
2.2.20 SPSS单因素方差分析 | 第38-40页 |
3 结果与分析 | 第40-85页 |
3.1 Ca~(2+)对烟草悬浮培养细胞H_2S水平的影响 | 第40-45页 |
3.1.1 CaCl_2处理对烟草悬浮培养细胞H_2S水平的影响 | 第40-41页 |
3.1.2 EGTA处理对烟草悬浮培养细胞H_2S水平的影响 | 第41-43页 |
3.1.3 LaCl_3处理对烟草细胞H_2S水平的影响 | 第43-45页 |
3.2 Ca~(2+)对烟草悬浮培养细胞H_2S代谢酶活性的影响 | 第45-49页 |
3.2.1 CaCl_2处理对烟草悬浮培养细胞LCD酶活性的影响 | 第45-46页 |
3.2.2 CaCl_2处理对烟草悬浮培养细胞OAS-TL酶活性的影响 | 第46-47页 |
3.2.3 EGTA处理对烟草悬浮培养细胞LCD酶活性的影响 | 第47-48页 |
3.2.4 EGTA处理对烟草悬浮培养细胞OAS-TL酶活性的影响 | 第48-49页 |
3.3 CaM对烟草细胞H_2S水平的影响 | 第49-53页 |
3.3.1 CaM处理对烟草悬浮培养细胞H_2S水平的影响 | 第49-51页 |
3.3.2 TFP处理对烟草悬浮培养细胞H_2S水平的影响 | 第51-53页 |
3.4 H_2S对烟草悬浮细胞Ca~(2+)水平的影响 | 第53-56页 |
3.4.1 NaHS处理对烟草悬浮培养细胞Ca~(2+)水平的影响 | 第53-54页 |
3.4.2 PAG处理对烟草悬浮培养细胞Ca~(2+)水平的影响 | 第54-56页 |
3.5 CaM对烟草细胞H_2S代谢酶活性的影响 | 第56-58页 |
3.5.1 CaM处理对烟草悬浮培养细胞LCD酶活性的影响 | 第56-57页 |
3.5.2 TFP处理对烟草悬浮培养细胞LCD酶活性的影响 | 第57-58页 |
3.6 H_2S对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第58-60页 |
3.6.1 NaHS处理对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第58-59页 |
3.6.2 PAG处理对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第59-60页 |
3.7 Ca~(2+)对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第60-64页 |
3.7.1 上调Ca~(2+)水平对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第60-62页 |
3.7.2 下调Ca~(2+)水平对烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第62-64页 |
3.8 H_2S对Ca~(2+)诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第64-65页 |
3.8.1 上调和下调H_2S对Ca~(2+)诱导的烟草悬浮细胞耐热性的影响 | 第64-65页 |
3.9 Ca~(2+)和CaM对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第65-85页 |
3.9.1 上调细胞Ca~(2+)水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第65-70页 |
3.9.2 下调细胞Ca~(2+)水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第70-80页 |
3.9.2.1 LaCl_3下调细胞Ca~(2+)水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第70-75页 |
3.9.2.2 EGTA下调细胞Ca~(2+)水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第75-80页 |
3.9.3 上调细胞CaM水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第80-82页 |
3.9.4 下调细胞CaM水平对H_2S诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的影响 | 第82-85页 |
4 讨论与展望 | 第85-88页 |
4.1 H_2S与钙信号交谈 | 第85-86页 |
4.2 H_2S与钙信号交谈对烟草细胞耐热性的调控 | 第86页 |
4.3 结论 | 第86页 |
4.4 展望 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-93页 |
攻读学位期间发表的学术论文和研究成果 | 第93-94页 |
致谢 | 第94页 |